庄淑珍
- 作品数：22 被引量：28H指数：3
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶抗血清的制备及抗体效价检测被引量：1
- 2014年
- 目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶(MpCHI786)的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方法从小胸鳖甲成虫中提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增Mpchi786 cDNA,构建原核表达载体pET30a-Mpchi786,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达获得融合蛋白His-MpCHI786。对融合蛋白切胶纯化后与弗氏佐剂混合作为抗原。另外,构建真核表达质粒pcDNA3.0-Mpchi786,对小鼠尾静脉高压注射,8 h后RT-PCR检测其在肝脏的瞬时表达。以pcDNA3.0-Mpchi786肌肉注射免疫小鼠3次后,再用His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次,DNA免疫和免疫结束后收集免疫小鼠的血清,ELISA和Western blot法检测抗血清效价和特异性。结果 RT-PCR结果显示尾静脉高压注射8 h后,pcDNA3.0-Mpchi786质粒在小鼠肝脏有特异性表达。Western blot检测表明,用His-MpCHI786融合蛋白作为抗原,pcDNA3.0-Mpchi786DNA质粒免疫3次的抗血清和His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次后的抗血清都显示了特异性反应条带。ELISA检测结果显示抗血清效价高达1∶204 800以上。结论利用DNA-蛋白质联合免疫法能够获得效价高、特异性的小胸鳖甲几丁质酶MpCHI786的抗血清。
- 陆雪莹李洁琼庄淑珍刘小宁马纪
- 关键词：几丁质酶抗血清抗体效价
- 草原兔尾鼠卵透明带3蛋白的免疫原性及其抗血清对体外精卵结合的影响
- 2008年
- 目的:大肠杆菌表达的重组草原兔尾鼠透明带3(Recombinant Luguruszone pellucida3,r-LZP3)蛋白的免疫原性直接影响抗体的滴度,通过对r-LZP3免疫原性的分析,获得特异性的抗血清,并探讨r-LZP3和抗血清对体外精卵结合的影响。方法:在大肠杆菌中以包涵体形式表达r-LZP3,经过变性、复性及纯化后作为抗原,用LZP3DNA疫苗初免小鼠后,再用r-LZP3进行免疫加强,产生特异性的LZP3抗血清;通过EL1SA测定抗体应答的水平;蛋白印迹、间接免疫荧光和免疫组化方法检测抗血清同r-LZP3、鼠卵母细胞表面天然ZP的反应性;精卵结合实验观察r-LZP3、抗血清体外对鼠精卵结合能力的影响。结果:用LZP3DNA疫苗免疫制备的抗血清在免疫鼠中产生了较高的抗体滴度,并且可以识别大肠杆菌表达的r-LZP3以及鼠卵细胞表面天然的ZP,抗血清和r-LZP3也都能在体外抑制鼠的精卵结合。结论:大肠杆菌表达的r-LZP3有较好的免疫原性,r-LZP3和抗血清能够在体外阻止鼠的精卵结合。
- 张爱莲庄淑珍刘菲张富春
- 关键词：草原兔尾鼠卵透明带3免疫原性抗血清卵母细胞精卵结合
- RNAi与哺乳动物基因功能的研究
- 本文介绍了RNAi的作用机制，探讨了利用RNAi技术研究哺乳动物基因功能的优势及进展，并进一步探讨了RNAi研究哺乳动物基因功能面临的挑战和研究策略。
- 李菁菁庄淑珍张富春
- 关键词：RNA干扰基因功能哺乳动物
- 小鼠胚胎成纤维细胞分离培养研究被引量：7
- 2007年
- 为探索实验室影响小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）分离和培养的因素,取昆明白小鼠胚胎分离成纤维细胞,利用体外培养体系,对不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度和作用时间对MEF分离及培养的影响进行研究,观察MEF的生长形态及其生物学特性。结果表明,在实验室条件下,12.5-14.5 d胎龄的小鼠胎儿MEF分离效果最好;最佳培养基为DMEM添加15%小牛血清;第3代细胞增殖最旺盛;室温条件下,0.125%胰蛋白酶消化MEF时间以8-10 min为宜。在培养ES细胞时,应选择第3-5代的MEF作为饲养层细胞。研究获得了可在实验室分离制备MEF的方法,为实验室进一步分离培养ES细胞奠定基础。
- 庄淑珍吕芳潘巍张富春
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性
- mGSCs减数分裂相关研究
- 精原干细胞（mGSCs）减数分裂主要从细胞微环境和精原干细胞内的基因表达调控两个方面进行研究。本文从睾丸细胞参与减数分裂的相关基因、体外诱导胚胎干细胞形成精子、生理条件下细胞微环境对mGSCs减数分裂的调控以及异体移植后...
- 董武子庄淑珍窦忠英
- 关键词：减数分裂细胞微环境基因差异表达
- 文献传递
- 新疆雪莲提取液预防小鼠卵巢早衰的初步研究被引量：1
- 2013年
- [目的]初步探讨雪莲提取液调控雌性小鼠生殖生理的机制,为天山雪莲作为女性美容保健用品以及临床预防和治疗妇科疾病提供理论依据。[方法]选择60只性周期正常的小鼠,随机分为试验组和对照组,每组30只;分别于每天12:00灌胃0.5 ml雪莲提取液和浓度0.9%生理盐水,采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠性周期变化,并提取双侧卵巢组织RNA,采用RT-PCR分析卵巢中Pten和FoxO3基因的表达情况。[结果]试验组和对照组的小鼠性周期紊乱率分别为50.0%和76.7%;FoxO3和Pten基因在试验组小鼠卵巢中的表达优于对照组小鼠。[结论]雪莲提取液对连续光照造成的小鼠卵巢早衰现象有一定的预防作用。
- 张冀张曼曼王军张贝贝杨焕庄淑珍张晓红
- 关键词：卵巢早衰PTEN基因
- 大鼠胎儿脊髓源性神经干细胞分离、培养与鉴定
- 目的研究大鼠胎儿的脊髓源性神经干细胞的分离培养方法并观察其增殖和分化能力。方法分离获得胎鼠脊髓脊髓组织、无血清培养技术和酶消化法结合机械法传代培养神经干细胞、免疫细胞化学方法鉴定神经干细胞和分化情况。结果成功建立胎鼠脊髓...
- 李勇敬晓棋庄淑珍杨慧萍窦忠英
- 关键词：脊髓神经干细胞
- 文献传递
- 猪瘟病毒p80基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 本论文由两部分构成，一是利用PCR技术克隆出猪瘟病毒C-株和GXYL野毒株的p80基因，二是利用大肠杆菌原核表达系统，通过基因重组技术高效表达出p80基因的NTPase／KNA helicase功能区。主要实验和结果如下...
- 庄淑珍
- 关键词：猪瘟病毒反转录PCR套式PCR克隆
- 文献传递
- 河南省猪瘟流行毒的E_2基因序列分析和基因分型被引量：2
- 2002年
- 采用 RT- PCR和 n PCR扩增出 3株河南省近期 (1999～ 2 0 0 0年 )猪瘟流行野毒的 E2 基因 ,分别克隆于 PMD- 18T载体 ,对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列推导 ,同时进行了同源性比较及 E2 糖蛋白结构的分析。结果表明 ,所测 3株 HCV E2 基因的长度均为 116 9bp。编码的氨基酸序列均包括完整信号肽序列和部分跨膜序列 ,共由 384个氨基酸组成。3株流行毒的 E2 基因核苷酸序列同源性在 99%以上 ,相应的氨基酸序列同源性也在 99%以上 ;这 3株流行毒与 C-株兔脾组织毒 (疫苗种毒 ) E2 基因的核苷酸序列同源性在 83.14 %～ 83.2 3% ,相应的氨基酸序列同源性在 88.14 %～ 88.6 8%。经遗传发生关系分析 ,C-株兔组织毒 C-株细胞毒属于组群 1(group 1) ,河南省近期流行猪瘟毒属于组群 2 (group 2 ) ,近期猪瘟流行毒与 C-株疫苗毒的 gp5
- 薛青红刘湘涛杜守山张永国韩雪清张彦明何学斌庄淑珍谢庆阁
- 关键词：基因分型猪瘟病毒E2基因糖蛋白
- 水动力转染鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达
- 2007年
- 采用水动力转染技术将含有家鸡PPARγ基因的真核表达质粒、表达该基因siRNA的干扰质粒注射到小鼠体内,并利用RT-PCR方法检测PPARγ基因在小鼠脏器中的表达情况,以建立检测重组质粒瞬时表达和筛选siRNA序列的有效方法。结果表明:注射重组质粒pcDNA3/PPARγ后家鸡PPARγ基因在小鼠的肝脏中高效表达;同时注射重组质粒pcDNA3/PPARγ和表达该基因siRNA序列的干扰质粒pGenesil-1/PPARγshRNA1后,家鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达明显地受到抑制。与传统的真核细胞转染技术相比,水动力转染技术具有快速、简单、方便、高效、安全、成本低等优点,可作为外源重组DNA表达的检测和siRNA的筛选等一种有效的方法。
- 王启贵王娉庄淑珍郑耀虎李辉张富春
- 关键词：小鼠PPARΓ基因
