崔海宏
- 作品数：13 被引量：108H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金教育部高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人源性大肠癌cDNA噬菌体库的构建及PCR鉴定被引量：4
- 2003年
- 为构建人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,从人大肠癌组织中提取总RNA ,纯化mRNA ,用RT PCR反转录合成cDNA第一链 ,用LD PCR合成cDNA第二链 ,除去小于 5 0 0bp的小片段 ,与λTriplEx2噬菌体连接 ,体外包装。转化E .coliXL1 blue大肠杆菌 ,滴定文库的滴度 ,用IPTG和X gal测定重组率。用PCR鉴定插入cDNA片段大小。构建成含 2 .0 7× 10 6 pfu/ml重组子的人大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,重组率为 94.5 % ,插入外源cDNA片段大小从 60 0bp～ 4kb ,平均约 1.4kb。文库合符要求 。
- 刘宇虎张振书武金宝钟东崔海宏王亚东
- 关键词：结肠直肠肿瘤噬菌体CDNA文库
- 结肠腺癌细胞株eIF-4E对NF-κB表达的影响及诱导凋亡机理的探讨被引量：1
- 2004年
- 目的 研究真核细胞起始因子 (EukaryoticInitiationFactor 4E ,eIF 4E)对NF κB表达及活性水平的影响 ,并对其阻滞后诱导肿瘤细胞凋亡的途径进行探讨。方法 应用脂质体包裹与eIF 4EmRNA翻译起始点互补的反义寡核苷酸 (asODN) ,处理人大肠腺癌细胞LS 174T。使用Westernblot和RT PCR方法分别检测eIF 4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变。EMSA用来比较eIF 4E阻滞前后NF κB活性的改变。采用流式细胞仪检测LS 174T细胞凋亡。结果 eIF 4E被阻抑表达后 ,NF κB蛋白表达和活性水平也有显著下降。伴随eIF 4E表达和NF κB活性水平下降 ,LS 174T细胞的凋亡率显著升高。结论 本试验证明NF κB受eIF 4E的翻译调控 ,eIF 4E的抗凋亡作用部分可能是通过调节NF κB活性来实现的。此结论对于结肠癌试验性和肿瘤临床的基因治疗具有一定意义。
- 杨玉捷钟世顺张亚历赖卓胜王群英崔海宏王亚东
- 关键词：结肠腺癌NF-ΚB流式细胞仪
- 溃疡性结肠炎患者肠粘膜中趋化因子和核转录因子的变化被引量：10
- 2003年
- 目的 :研究溃疡性结肠炎 (UC)患者肠粘膜中趋化因子IL 8,MCP 1和核转录因子NF κB的变化 .方法 :患者30例经柳氮磺胺吡啶和糖皮质激素治疗前后与正常人比较 .RT PCR法半定量检测肠粘膜中IL 8,MCP 1的变化 ;采作凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)法检测肠粘膜细胞核内核转录因子NF κB的变化 .结果 :UC急性期IL 8/G3PDH的比率为 1.0 9± 0 .2 2 ,缓解期为 0 .4 9± 0 .2 1,与正常对照组 0 .14± 0 .10相比均有明显增加 (P <0 .0 5 ) ,治疗前后有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;MCP 1/G3PDH的比率为急性期 0 .89± 0 .2 3,缓解期为 0 .81± 0 .19,与正常对照组 0 .0 7± 0 .0 4相比均有明显差异 (P <0 .0 1) ,但治疗前后无明显差异 .肠上皮细胞核内NF κB亦明显增加 .结论 :UC的发生发展与IL 8,MCP 1等趋化因子的变化密切相关 ,它的表达由细胞核内NF κB调控 .柳氮磺胺吡啶和糖皮质激素可能通过抑制NF κB的合成达到抗炎目的 .
- 崔海宏陈村龙王继德杨玉捷崔耀升王群英赖卓胜
- 关键词：溃疡性结肠炎趋化因子核转录因子
- 绝经后妇女雌激素缺乏与外周血T淋巴细胞亚群改变的关系研究被引量：8
- 2003年
- 目的 通过多省市流行病学调查,探讨绝经后妇女血清性激素水平与外周血T淋巴细胞亚群的变化及两者之间的关系。方法 以816例健康绝经后妇女为研究对象,369例未闭经妇女为对照组,用放射免疫法测定血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、垂体泌乳素(PRL)、睾酮(T)、游离睾酮(FT)、17-β雌二醇(17β-E_2)及孕酮(P),用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群。结果 与对照组相比,绝经后血清17β-E_2,P水平明显下降,闭经后17β_E_2仍有下降趋势,>70岁P有所回升,E_2/P比值随增龄明显下降。闭经后T明显升高,但FT变化不明显。血清FSH,LH浓度随增龄增加,绝经后各组与对照组相比,差异均有显著性意义,但闭经后各组间差异无显著性意义。PRL值有所下降,但各组间差异无显著性意义。经线性相关分析,17β-E_2,E_2/P与年龄呈负相关(r=-0.472,P<0.001;r=-0.221,P<0.001)。CD_3^+,CD_4^+在≤60岁与对照组相比变化不明显,>60岁CD_3^+有所下降,CD_4^+则明显下降,CD_8^+绝经后各组与对照组相比无变化,CD_4^+/CD_8^+比值随增龄明显下降。经线性相关分析CD_3^+,CD_4^+与年龄呈负相关(r=-0.224,P<0.05;r=-0.298,P<0.001)。经线性相关分析CD_3^+,CD_4^+与E_2呈正相关(r=0.356,P<0.001;r=0.454,P<0.001),而CD_8^+与E_2无相关。以年龄。
- 吴迎星谭家余吴赛珠翁心植黄湘崔海宏裘宇容
- 关键词：雌激素缺乏外周血T淋巴细胞亚群放射免疫法促卵泡激素黄体生成素
- 溃疡性结肠炎患者肠黏膜Th1/Th2类细胞因子mRNA的表达被引量：27
- 2003年
- 目的:探讨溃疡性结肠炎肠黏膜内Thl型细胞分泌的细胞因子TNF-α、IL-2,Th2型细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-10的作用。方法:住院重症溃疡性结肠炎患者30例,男24例,女6例,年龄18-59(平均45±13)岁,全部患者均经电子结肠镜检查及组织学检查确诊,并连续粪培养2次排除细菌感染,同时加除阿米巴肠病,血吸虫病,肠道肿瘤和内分泌疾病,病变部位包括全结肠型15例,乙状结肠9例,直肠型6例;临床类型包括复发型20例,持续型7例和初发型3例,急性期患者均服用强的松30mg,柳氮磺胺嘧啶500mg2次/d.治疗8wk后复查纤维结肠镜.另选健康对照20名,男14名,女6名,年龄22-61(平均43±12)岁,排除胃肠道和内分泌疾病.应用RT-PCR检测溃疡性结肠炎患者黏膜内细胞因子的发达。结果:溃疡性结肠炎患者急性期应用柳氮磺胺吡啶和糖皮质激素可降低TNF-α(急性期1.22±0.02,慢性期0.78±0.08,P<0.01)、IL-2(急性期0.82±0.06,慢性期0.47±0.04,P<0.01)的表达;提高IL-10(急性期0.68±0.03,慢性期0.91±0.02,P<0.01的表达。结论:溃疡性结肠炎患者以分泌Thl细胞因子为主,存在Thl和Th2细胞因子的平衡漂移。提示他们在溃疡性结肠炎的发生发展中起了重要作用。
- 崔海宏陈村龙杨玉捷张祚建张耀东崔耀升
- 关键词：溃疡性结肠炎肠黏膜细胞因子电子结肠镜组织学检查
- 阻滞eIF-4E对乙酰肝素酶mRNA核浆转运及其表达的影响
- 2003年
- 目的 :确定结肠癌LS 1 74T细胞中过量表达的真核细胞起始因子 4E(eukaryoticinitiationfactor 4E ,eIF 4E)是否影响乙酰肝素酶 (heparanase)mRNA的核浆转运 ,并改变乙酰肝素酶表达水平 .方法 :脂质体包裹与eIF 4EmRNA翻译起始点互补的asODN转染人大肠腺癌细胞LS 1 74T .使用Westernblot,RT PCR方法分别检测eIF 4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变 .乙酰肝素酶mRNA在细胞内核浆分布水平采用Northernblot检测 ,其蛋白表达采用Westernblot检测 .结果 :asODN转染显著抑制eIF 4E基因和蛋白表达 .伴随eIF 4E被阻抑 ,Northernblot结果显示更多乙酰肝素酶mRNA滞留在细胞核 ,且其蛋白表达量也下降 .结论 :阻抑eIF 4E可影响LS 1 74T细胞乙酰肝素酶mRNA核浆转运 ,并降低乙酰肝素酶蛋白表达 .
- 杨玉捷张亚历崔海宏钟世顺刘宇虎赖卓胜王继德
- 关键词：真核细胞起始因子4E乙酰肝素酶信使RNA基因治疗
- 溃疡性结肠炎患者肠黏膜菌群改变及抗体反应被引量：18
- 2003年
- 目的 :探讨溃疡性结肠炎患者肠道菌群改变及机体免疫反应。方法 :采用梯度稀释法进行菌群分析 ,同时采用透射比浊法测定IgG、IgM、IgA。 结果 :发现服用培菲康的溃疡性结肠炎患者急性期菌群与正常人相比 ,肠杆菌 (8 82± 0 6 9,P <0 0 5 )、肠球菌 (7 73± 0 2 1,P <0 0 1)及小梭菌 (6 6 8± 0 78,P <0 0 1)的数量显著增加 ,而双歧杆菌 (6 89± 0 34,P <0 0 1)和乳杆菌 (6 95± 0 5 2 ,P <0 0 1)的数量明显下降 ,且缓解期与对照相比差异无显著性。拟杆菌 (7 2 6± 0 0 3,P <0 0 5 )及双歧杆菌 (7 5 9± 0 34,P <0 0 1)较急性期明显上升 ,小梭菌 (6 13± 0 6 6 ,P <0 0 1)明显下降。未服用培菲康的溃疡性结肠炎患者急性期菌群中服药前后差异无显著性。治疗前肠杆菌 (8 77± 0 89,P <0 0 1)和肠球菌 (7 75± 0 38,P <0 0 1) ,小俊菌 (6 6 4± 0 4 3,P <0 0 1)明显增加 ,而双歧杆菌 (6 98± 0 2 5 ,P <0 0 1)和乳杆菌 (6 83±0 6 2 ,P <0 0 1)明显下降。治疗后肠杆菌 (8 93± 0 6 0 ,P <0 0 1) ,肠球菌 (7 6 1± 0 39) ,小梭菌 (6 6 8±0 72 ) ,有所下降 ,双歧杆菌 (7 12± 0 35 )和乳酸杆菌 (6 6 8± 0 72 )有所上升 ,但治疗前后差异无显著性。
- 崔海宏陈村龙孙勇刘宇虎王亚东张耀东杨玉捷潘令嘉
- 关键词：溃疡性结肠炎肠黏膜菌群抗体体液免疫
- 慢性腹壁疼痛被引量：2
- 2003年
- 崔海宏张亚历
- 关键词：腹痛流行病学病因学
- 双歧杆菌影响溃疡性结肠炎患者肠黏膜的研究被引量：24
- 2003年
- 目的 研究双歧杆菌对溃疡性结肠炎 (UC)患者肠黏膜内核因子κB (NF κB)的表达和激活的影响及肿瘤坏死因子 (TNF) α、白细胞介素 (IL) 1β、IL 10mRNA表达的影响。 方法 30例UC患者经治疗后 ,应用Western蛋白印迹分析检测NF κBp6 5表达情况 ;用凝胶电泳迁移率改变分析检测NF κB与DNA结合活性 ;逆转录 PCR检测肠黏膜内细胞因子的表达。结果 应用双歧杆菌后 3例复发 ,对照组 14例复发 ,与对照组相比 ,NF κB与DNA结合活性明显降低 ,蛋白表达量明显下降 (治疗前 0 82± 0 0 5 ,治疗后 0 31± 0 0 5 ,P <0 0 1) ;双歧杆菌明显抑制了TNF α、IL 1β的表达 ;提高IL 10的表达。结论 双歧杆菌的作用可能与抑制NF κB的激活、降低TNF α、IL 1β等致炎因子的表达 ,提高IL
- 崔海宏陈村龙王继德杨玉捷孙勇王亚东赖卓胜
- 关键词：双歧杆菌溃疡性结肠炎肠黏膜细胞因子炎症
- 生态制剂在炎症性肠病中的作用被引量：5
- 2002年
- 在炎症性肠病的研究过程中,人们开始注意到肠腔内细菌在炎症性肠病发病中的重要作用.大量临床和实验证明细菌与肠道的炎症反应有直接的联系.例如:远端回肠和结肠的细菌高密度区的解剖位点恰好是炎症性肠病病人发生炎症的常见部位.
- 崔海宏
- 关键词：生态制剂炎症性肠病
