屈娅荣
- 作品数：10 被引量：22H指数：2
- 供职机构：安康市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 尿路致病性大肠杆菌外膜蛋白T的致病机理研究
- 背景和目的：<br> 尿路感染(urinary tract infection，UTI)，简称尿感，是指病原体侵入尿路粘膜或组织引起的尿路炎症。根据感染部位，尿路感染可分为下尿路感染和上尿路感染，前者主...
- 屈娅荣
- 关键词：蛋白水解酶细胞外基质黏附分子
- MUC2基因表达对益生菌调节肠屏障作用的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察益生菌诱导的乳鼠结肠MUC2基因的表达及其对益生菌抑制E.coli K1株E44黏附侵袭肠屏障作用的影响。方法 SD乳鼠分别用益生菌、E44株和益生菌+E44株三组灌胃7 d后,RT-PCR法观察益生菌和E44株诱导结肠MUC2基因的表达;靶向MUC2基因的shRNA真核质粒表达载体(shRNA MUC2)和阴性对照shRNA NC转染人结肠癌Lovo细胞,荧光定量PCR法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测MUC2基因对益生菌拮抗致病菌E44粘附侵袭的影响。结果灌胃益生菌组SD乳鼠肠道MUC2基因明显上调,而E44组则显著降低。用shRNA MUC2转染Lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7%;益生菌对E44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,E44相对粘附率为56.64%,相对侵袭率为66.64%。结论益生菌诱导的MUC2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一;MUC2基因沉默后,益生菌对E44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低。
- 余晶仪郝小燕龙敏王勤屈娅荣温扬明张文炳罗军曹虹
- 关键词：MUC2SHRNA益生菌E.COLI
- 安康市2013-2014年手足口病实验室检测结果分析
- 2016年
- 目的分析2013-2014年安康市手足口病的病原学特征,为该病预防提供依据。方法对安康市10个区、县送检的手足口病(HFMD)患者临床标本采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果共检测标本1 113份,其中489份肠道通用型病毒核酸阳性,检出率为43.94%;EV71阳性率为31.90%(156/489),Cox Al6阳性率为23.72%(116/489);其他肠道病毒阳性为44.38%(217/489)。不同性别间阳性检出率差异有统计学意义(χ2=6.62,P<0.05),5岁以下儿童为高发人群。结论 2013年和2014年HFMD主要流行病原均为其他肠道病毒,应加强手足口病病原监测,并对其他肠道病毒的进一步分型检测。
- 杜冬冬刘斌王朵刘万静屈娅荣原凌云
- 关键词：手足口病
- 大肠埃希菌外膜蛋白T水解人防御素-4作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨外膜蛋白T(OmpT)在大肠埃希菌CFT073致尿路感染中的作用机制。方法以人膀胱癌上皮细胞5637的cDNA为模版,扩增人防御素-4(HBD-4)基因,连接至质粒pET-28a,重组质粒经转化、诱导和纯化处理后获得His-HBD-4融合蛋白;采用琼脂糖扩散法和最小抑菌浓度方法检测HBD-4对ompT野生株、敲除株和回补株的抗菌活性,并分别观察比较ompT野生株CFT073、敲除株和回补株水解HBD-4的差异。结果通过测序鉴定及双酶切电泳证实成功构建HBD-4原核表达载体pET-28a-HBD-4,获得HBD-4体外表达菌株;HBD-4对CFT073与ompT敲除株的最小抑菌浓度不同,野生株为10μg/mL,敲除株为6μg/mL;与HBD-4共同孵育后,敲除株的生长状态受到抑制,但对野生株的影响较小。结论初步证实ompT作为毒力因子参与对人固有免疫系统成分的水解,在大肠杆菌致尿路感染的过程中发挥重要作用。
- 屈娅荣赵铁曹曦尤帅余晶仪温扬明张立科曹虹
- 关键词：大肠埃希菌尿路感染
- Real-timePCR在GB/T 4789.4-2010中的应用
- 2016年
- 通过应用Real-timePCR检测,提高沙门氏菌的检出率;同时简化实验程序,减少工作量,为可能发生的食物中毒尽早提供实验依据。选取2014、2015年国家食品风险监测标本。标准组按照GB/T 4789.4-2010进行沙门氏菌检测;实验组取GB/T 4789.4-2010中规定的第一次增菌液进行Real-timePCR,若阳性继续按照GB/T 4789.4-2010后续步骤检测,若阴性则直接报告结果。共检测370个标本,共检出沙门氏菌5株,标准组与实验组检测结果一致,符合率100%。通过应用Real-timePCR,可以为目的菌检出提供导向作用,有助于提高其检出率;对于PCRReal-timePCR阴性的标本,可提前3-4d直接报告,缩短了实验周期;由于后续只针对Real-timePCR阳性标本进行检测,减少了实验者的工作量,节约了阴性标本后续检测的实验试剂。
- 刘万静李湘平刘斌杜冬冬屈娅荣李海燕周惠萍
- 关键词：沙门氏菌REAL-TIMEPCR
- 2012-2014年安康市食品风险监测概况被引量：5
- 2016年
- 调查分析安康市食品污染状况,预防食物中毒暴发流行。按照《全国食源性疾病监测工作手册》的要求采样、检测、保存菌株、网络报告。共计监测672份样品,检出致病菌50株,总检出率7.44%。检出沙门、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌O157∶H7,检出率分别为0.17%、3.21%、2.87%、6.76%、0.83%;阪崎肠杆菌、致泻大肠杆菌、大肠杆菌O104∶H4、志贺氏菌均未检出。安康市食品致病菌污染状况复杂,单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌检出率较高,尤其应注意单增李斯特菌引起的食物中毒。
- 刘万静刘斌李湘平屈娅荣周慧萍杜东东
- 关键词：食物中毒单增李斯特菌
- 2016-2018年安康市流行性感冒病原学监测分析被引量：2
- 2020年
- 目的分析安康市2016-2018年流行性感冒(简称流感)监测数据,了解流感流行情况,为流感防控提供科学依据。方法以2016-2018年安康市哨点医院流感样病例(influenza-like illness,ILI)为研究对象,采集咽拭子,利用Real-time PCR进行流感病毒核酸检测。结果2016-2018年共检测流感样病例咽拭子样本5774份,核酸阳性1113份,平均阳性率为19.28%。共报告流感样病例24761例,0~4岁组就诊比例(ILI%)最高(55.52%),60岁以上组ILI%最低(4.98%),各年龄组流感样病例分布差异有统计学意义(χ^2=625.207,P<0.05)。从核酸阳性分布来看,0~4岁组阳性占比最高(34.95%),60岁以上组占比最低(2.51%),差异有统计学意义(χ^2=17.815,P<0.05)。结论安康市流感好发人群为学龄儿童,各年优势流行株不同,呈交替流行,流行末期被原优势毒株替代。应不断加强流感监测和健康教育宣传,建议易感人群接种流感疫苗,以防流感暴发。
- 杜冬冬刘斌史伟屈娅荣李湘平李海燕刘万静原凌云焦欢
- 关键词：流感病毒病原学流行性感冒流感样病例流感疫苗
- 血小板活化因子受体在伴放线放线杆菌致病过程中的作用
- 2016年
- 目的研究血小板活化因子受体(PAFR)在磷脂酰胆碱(PC)阳性伴放线放线杆菌(Aa)黏附侵袭人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)过程中的作用。方法利用PAFR拮抗剂(CV3988)和抗PAFR抗体作用于HUVEC 30 min后,观察PC阳性Aa对HUVEC黏附和侵袭的影响;并采用MTT法分析PC阳性和阴性Aa诱导细胞损伤的情况。结果采用100、200、500 nmol/L的PAFR拮抗剂预处理HUVEC,显著减少了PC阳性Aa对HUVEC的黏附和侵袭(P<0.001),黏附率分别为对照组的(36.29±3.52)%,(19.04±3.35)%和(7.69±3.19)%;侵袭率分别为对照组的(12.12±1.58)%,(7.08±0.29)%和(2.60±2.26)%。用抗PAFR抗体预处理HUVEC后Aa对HUVEC的黏附率和侵袭率分别为(50.05±5.28)%和(39.09±6.50)%,显著降低了Aa对宿主细胞的黏附和侵入(P<0.001)。采用200 nmol/L和500 nmol/L的PAFR拮抗剂和25μg/m L抗PAFR抗体预处理HUVEC后,PC阳性的Aa与细胞作用以后,细胞的存活率显著升高(P<0.001),从(25.39±9.33)%分别升高到(91.12±3.14)%,(94.12±2.15)%和(65.5±1.87)%。而PC阴性的Aa菌株中,预处理组与未预处理的组相比,细胞活力并没有显著增加(P>0.05)。结论我们发现PAFR在PC阳性的Aa对宿主细胞的粘附、侵袭及诱导胞死亡的过程中发挥了重要作用。
- 王勤轩东英钟德钰屈娅荣余晶仪曹虹章锦才
- 关键词：伴放线放线杆菌血小板活化因子受体人脐静脉血管内皮细胞
- 尿路致病性大肠杆菌外膜蛋白T的致病机制被引量：2
- 2014年
- 目的探讨大肠杆菌外膜蛋白T(OmpT)参与尿路致病性大肠杆菌致病的机制。方法通过建立人膀胱癌移行上皮细胞模型,检测野生株CFT073、ompT基因敲除株COTD、回补株COTD(pST)的体外黏附情况;比较野生株、敲除株和回补株对细胞外基质的体外黏附能力;通过荧光定量PCR方法,比较ompT基因敲除以后,iha和iroN基因的mRNA表达水平;建立小鼠动物模型,比较有无OmpT菌株所致小鼠膀胱和肾脏的细菌载量、血液菌浓度及炎症因子IL-6和IL-8的蛋白表达水平,验证OmpT的致炎作用。结果野生株细胞黏附率为(8.81±1.13)%,敲除株为(4.62±0.39)%,敲除株的黏附率明显低于野生株(P<0.05);野生株的细胞外基质黏附率为(8.85±0.79)%,敲除株为(4.95±0.59)%,敲除株的黏附率明显低于野生株(P<0.05);与敲除株比较,iha和iroN基因在野生株中的表达水平分别是敲除株的2.1和3.8倍;野生株感染的小鼠膀胱组织中细菌载量均数为6.36±0.06,敲除株为6.01±0.07,回补株为6.29±0.06,野生株感染的小鼠肾脏组织中细菌载量为6.25±0.05,敲除株为5.87±0.06,差异均有统计学意义(P<0.05);野生株和回补株所致小鼠膀胱和肾脏组织炎症中IL-6检出的阳性率分别为60%和50%,而ompT基因敲除株则为12.5%。IL-8的表达情况同IL-6。结论初步证实OmpT通过发挥毒力因子的作用,从而影响尿路致病性大肠杆菌对宿主细胞的黏附,其可能机制是影响细菌对细胞外基质的黏附和参与iha和iroN基因的表达并在致炎过程中发挥重要作用。
- 屈娅荣何肖龙王勤张立科龙敏罗军张文炳曹虹
- 关键词：尿路致病性大肠杆菌基因敲除
- 应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库被引量：1
- 2013年
- 目的应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库。方法采集登革确诊患者恢复期外周血,分离外周血淋巴细胞并提取其总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库;将抗体基因库转染CHO细胞、用流式细胞仪分析抗体在CHO细胞表面的表达。结果以1.2μg总RNA为模板,用6套引物扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,轻链基因库容量为1.45×104,重链基因库容量为1.8×105;随机挑选的10个轻链克隆和10个重链克隆,经过测序鉴定,轻链有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,重链有7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析含有正确阅读框架的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达,抗体库中可表达的抗体多样性达到109。结论以1.2μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建可表达库容量达到109的登革病毒特异性全长人抗体基因库。
- 温扬明蓝开健王俊洁余晶仪屈娅荣赵卫张复春谭万龙曹虹周辰
- 关键词：登革病毒
