寇沛
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Erbin在肾纤维化中表达上调
- 周巧丹许楚瓯寇沛裴广畅张亚敏刘丽丽曾锐徐钢
- 构建含Erbin目的基因的稳定真核表达质粒
- 寇沛周巧丹刘丽丽徐钢
- Erbin基因沉默对乳腺癌细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察Erbin基因表达沉默后对乳腺癌细胞形态及侵袭迁移生物学行为的影响。方法:通过慢病毒shRNA转染技术建立低表达Erbin的乳腺癌细胞模型。蛋白质印迹法检测基因沉默前后Erbin蛋白表达的效果;倒置显微镜观察基因沉默前细胞形态改变;Matrigel-Transwell小室法检测细胞侵袭能力改变;Transwell小室法检测细胞迁移能力改变。蛋白质印迹法检测转移相关基因基质金属蛋白酶-2(matrix metallopro teinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达改变。结果:成功建立了Erbin基因沉默乳腺癌细胞模型。蛋白质印迹法显示,稳定表达Erbin-shRNA细胞的Erbin蛋白表达明显被抑制,Erbin基因沉默后乳腺癌细胞变长、变梭,细胞间隙明显增宽,侵袭能力为56.3±7.6,明显高于空载体转染组的29.3±2.1,t=-5.908,P=0.004;迁移能力为83.6±7.2,较空载体转染组的52.6±8.3显著增强,t=-4.868,P=0.008。Erbin-shRNA转染后转移相关基因MMP-2表达为0.74±0.021,较空载体组的0.25±0.039明显上调,t=-19.23,P<0.001;MMP-9的表达为0.78±0.037,较空载体组的0.32±0.078也显著上调,t=-10.02,P=0.001。结论:Erbin基因的表达沉默对乳腺癌细胞的部分恶性生物学行为的发生有一定促进作用,可促进细胞变长、变梭,促进细胞侵袭迁移能力增强。
- 曾巧周巧丹陈琳寇沛廖盼丽许楚瓯付会玲刘萍刘丽丽徐钢
- 关键词：ERBINRNA干扰乳腺肿瘤
- CD4+T细胞促进肾小管间质纤维化的进展
- 刘丽丽寇沛马祖福陈胜徐钢
- Erbin在肾间质纤维化中的表达和作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨Erbin在肾脏间质纤维化中表达量的变化及上调Erbin对转化生长因子β1（TGF—β1）诱导大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）转分化的影响。方法体内实验采用SD大鼠5／6肾切除法建立肾纤维化动物模型，收集并检测各组血清中Scr、BUN水平；Masson染色观察肾问质纤维化程度；免疫组化及Western印迹检测Erbin的分布与表达。体外实验采用TGF—β1（10μg／L）刺激NRK52E细胞72h建立上皮细胞一间充质转分化（EMT）细胞模型；免疫荧光及Western印迹法检测E钙黏蛋白（E-cadhefin）和仪平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化；RT—PCR及Western印迹法检测Erbin的表达变化。用脂质体2000将质粒Prk5-mye-Erbin瞬时转染至NRK52E细胞，Western印迹法观察上调Erbin表达后对上述各种指标的影响。结果（1）假手术组大鼠肾功能正常[Scr（33．96±7．28）μmol／L、BUN（8．11±2．55）mm01／L]，Masson染色未见肾间质纤维化，Erbin在肾小管表达较少；模型组大鼠Scr[（140．52±61．11）μmol／L1、BUN[（34．23±7．66）mmol／L]均显著高于假手术组（均P〈0．05），肾间质可见明显纤维化，Erbin在肾小管表达也明显增加，是假手术组的2．9倍（P〈0．01）。（2）正常NRK52E细胞表达E—cadhefin，少量表达Erbin和α-SMA。TG-β 1刺激后，NRK52E细胞E—cadhefin表达显著减少，Erbin和α-SMA则表达增加（均P〈0．05）；而转染质粒Prk5-myc-Erbin可逆转TGF-β1诱导的NRK52E细胞E-cadhefin表达下调，并可抑制d—SMA表达上调（均P〈0．05）。结论Erbin在肾间质纤维化中表达增加，上调Erbin表达可抑制TGF—B1诱导NRK52E发牛EMT,提示Erbin在肾脏纤维化中可发挥保护作用。
- 周巧丹寇沛许楚瓯曾锐白寿军裴广畅张亚敏韩敏刘丽丽徐钢
- 关键词：纤维化肾小管上皮细胞ERBIN
