宋远江
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- 供职机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
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- 镁黄长石浸提液促进人脂肪干细胞体外成骨分化的机制研究
- 2013年
- 目的:探讨镁黄长石浸提液促进人脂肪干细胞成骨分化的机制。方法:分离培养人脂肪干细胞,制备镁黄长石浸提液母液及浓度为1%和10%的镁黄长石浸提液。采用体外培养的第3代人脂肪干细胞分别进行以下实验:①将接种于镁黄长石生物陶瓷材料上的第3代人脂肪干细胞分为2组,A组以生长培养液培养、B组以生长培养液+成骨诱导液培养。分别于培养开始前及培养开始后1、4、7 d和10 d提取培养液的上清液,采用电感耦合等离子体-原子发射光谱技术测定Ca、Mg、Si离子的浓度。②采用镁黄长石浸提液母液+成骨诱导液培养第3代人脂肪干细胞,分别在培养开始后1、4、7、10、14、17、21 d以Western Blot法检测细胞的细胞外调节蛋白激酶和磷酸化细胞外调节蛋白激酶的表达情况,同时在培养开始后4、10、14、17 d测定碱性磷酸酶含量。③将培养的第3代人脂肪干细胞分为4组,Ⅰ组以生长培养液+成骨诱导液培养、Ⅱ组以1%镁黄长石浸提液+成骨诱导液培养、Ⅲ组以10%镁黄长石浸提液+成骨诱导液培养、Ⅳ组以镁黄长石浸提液母液+成骨诱导液培养。培养至第10天时,以West-ern Blot法检测4组细胞的细胞外调节蛋白激酶和磷酸化细胞外调节蛋白激酶的表达情况,并测定碱性磷酸酶定量含量。结果:①人脂肪干细胞体外培养过程中镁黄长石析出离子浓度。培养过程中不同时间点的Ca离子浓度不同(P=0.001);2组Ca离子浓度总体有差别(P=0.001),进一步比较,A组各时间点Ca离子浓度均高于B组[0 d:(1.65±0.03)mmol.L-1,(1.51±0.01)mmol.L-1,P=0.001;1 d:(4.78±0.18)mmol.L-1,(2.56±0.02)mmol.L-1,P=0.001;4 d:(3.27±0.11)mmol.L-1,(1.90±0.01)mmol.L-1,P=0.001;7 d:(3.24±0.03)mmol.L-1,(2.03±0.02)mmol.L-1,P=0.001;10 d:(3.14±0.02)mmol.L-1,(2.13±0.03)mmol.L-1,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(P=0.001)。培养过程中不同时间点的Mg离子浓度不同(P=0.001);2组Mg离�
- 朱旭贞叶永玲宋远江肖治刚戴建英
- 关键词：干细胞人脂肪干细胞细胞外调节蛋白激酶镁黄长石
