孔祥复
- 作品数：9 被引量：22H指数：2
- 供职机构：中国科学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人细胞周期相关激酶启动子的克隆和初步分析被引量：3
- 2004年
- 克隆人的细胞周期相关激酶(CCRK)基因启动子,分析与其表达有关的转录调控因子。通过巢式PCR方法,从人的基因组总DNA中分离出CCRK基因5'端非翻译区大小为1072bp的片段。这段片段的3'端起始点在第一个外显子里第一个翻译密码子ATG(+1)上游128bp处。以1072bp为模板,对启动子进行5'端删除分析,分别扩增951bp穴-1072/-128雪、564bp穴-692/-128雪、313bp穴-441/-128雪、127bp穴-239/-128雪的片段,与pGL3-Basic荧光素酶报告载体重组构建,人工加上克隆位点,5'端带有KpnI、3'端带有XhoI位点。瞬时转染恶性神经胶质瘤细胞株U373,通过双荧光素酶活性进行分析。对分离出的1072bp的片段进行测序,结果与GenBank(AccessionAF035013雪的序列比较,同源序列达到98%。双荧光素酶活性分析564bp片段有最强的活性,313bp片段为有活性的最小片段。本研究为进一步研究分析CCRK的核心启动子和与其相关的转录因子奠定基础。
- 贾向志林李家宓何明亮马文煜黄培堂孔祥复黄翠芬
- 关键词：启动子克隆转录
- 小鼠模型与人类疾病(续)被引量：1
- 2001年
- 孔祥复黄建东
- 关键词：疾病模型多基因疾病
- 功能基因组学研究──香港大学分子生物学研究所功能基因研究现状
- 2003年
- 彭英孔祥复
- 关键词：人类基因组基因功能非洲爪蟾生物学
- 无
- 2013年
- 孔祥复
- 小鼠模型与人类疾病(续):癌症被引量：1
- 2001年
- 孔祥复黄建东
- 关键词：癌症小鼠模型人类疾病
- 人细胞周期相关激酶(CCRK)启动子的分析和特征研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :分析人CCRK基因启动子、启动子的核心序列及与其表达相关的转录因子。方法 :采用 5′ RACE技术鉴定人CCRK基因的转录起始点 ;对启动子区 3′端 3个截短片段 2 5 5bp(- 36 7/- 12 8) ,2 10bp(- 32 2 /- 12 8)和16 0bp(- 2 72 /- 12 8)进行删除分析 ,双荧光素酶分析测出的最小活性片段作为核心启动子的上游位点。通过生物软件MatInspectorV2 .2分析核心启动子区域 ,寻找并推测重要的转录因子 ,并对其核心序列进行定点突变分析 ,再通过电泳迁移率 (EMSA)实验加以鉴定。结果 :采用 5′ RACE技术 ,得到的PCR产物直接测序 ,定位 - 2 4 2“T”为转录起始点 ;通过启动子 3′端小片段删除分析 ,2 5 5 ,2 10和 16 0bp均无活性 ,由此判断 3′端 2 5 5个核苷酸不存在核心启动子序列 ,并定位一段 74bp的区域为核心启动子 (- 4 4 1/- 36 7)区域。通过MatInspector软件分析 ,发现在这段核心启动子区域内有 3个重要的结合位点 :DeltaEF 1,NF κB和Sp1。对这 3个结合位点的核心序列进行定点突变后瞬时转染U373,经双荧光素酶分析发现DeltaEF 1的活性明显升高 ,NF κB没有变化 ,Sp1的活性降低但不太明显。进一步通过电泳迁移率 (EMSA)实验鉴定 ,DeltaEF 1和NF κB能与U373核蛋白形成特异性的DNA 蛋白质复合体 。
- 贾向志林李家宓何明亮马文煜黄培堂孔祥复黄翠芬
- 关键词：神经胶质瘤启动子定点突变转录因子
- 小鼠模型与人类疾病被引量：15
- 2001年
- 小鼠是人类疾病理想的动物模型，不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富，其大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。另外，高分辨率的小鼠遗传及物理连锁图谱已经建成，小鼠基因组的测序工作不久即将完成，而且修饰小鼠基因组的技术（包括建立转基因小鼠、基因敲除、以及改建小鼠染色体的技术）也已具备；分析复杂遗传病的方法也相继建立……。这些进展加速了对小鼠疾病基因位点的鉴定与克隆，同时也促进了新模型的建立。从而使得小鼠成为人类疾病动物模型的首选。 "小鼠遗传学分析的技术与资源"，将简要介绍用于建立人类疾病的动物模型的基本技术与方法，以及现有的小鼠遗传资源。在以后各部分中，将列举涉及多种人类疾病的 100多个小鼠模型。其中大多数的模型的变异，在小鼠与患者的表型极为相似；因而有助于人们理解人类疾病及寻找有效的预防、治疗方法。
- 孔祥复黄建东
- 关键词：小鼠模型人类疾病疾病动物模型
- 胎儿乙醇综合征的动物模型和治疗方法
- 提供了用于研究乙醇对胎儿发育的影响的非洲爪蟾(非洲有爪蛙)胚胎模型。非洲爪蟾胚胎在特定发育阶段暴露于乙醇以依赖剂量和时间的方式导致类似于人类胎儿乙醇综合征(FAS)中观察到的具有小头和生长迟缓的蝌蚪。本发明还提供了筛选试...
- 彭英林李家宓孔祥复杨百皓
- 文献传递
- 胎儿乙醇综合征的动物模型和治疗方法
- 提供了用于研究乙醇对胎儿发育的影响的非洲爪蟾(非洲有爪蛙)胚胎模型。非洲爪蟾胚胎在特定发育阶段暴露于乙醇以依赖剂量和时间的方式导致类似于人类胎儿乙醇综合征(FAS)中观察到的具有脑过小和生长迟缓的蝌蚪。本发明还提供了筛选...
- 彭英林李家宓孔祥复杨百皓
- 文献传递
