孔心涓 作品数:121 被引量:505 H指数:12 供职机构: 青岛大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
抗乙型肝炎病毒C区基因的MlGS RNA核酶真核表达载体的构建和表达 目的 M1 RNA 核酶是 E.coli 核糖核酸酶 P (RNase P)的 RNA 亚单位,在体内执行核酸内切酶活性,切割 tRNA 前体(pre-tRNA)和一些小 RNA 分子的5′端前导序列。对 M1 RNA ... 毛涛 田字彬 孔心涓 张民生 张翠萍文献传递 早期肠内营养对神经外科危重患者免疫功能的影响 目的:研究早期给予完全肠外营养(TPN)及肠内外混合营养(TPN+EN)治疗对神经外科重症患者免疫功能的影响。
方法:采用前瞻性对照研究将神经外科危重患者按入院顺序随机分为完全肠外营养(TPN)组及肠内外混合营... 武星汝 田字彬 李连弟 孔心涓 魏良洲 张翠萍 赵清喜关键词:肠内营养 神经外科 免疫功能 文献传递 表没食子儿茶素没食子酸酯对人胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响 2011年 目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胰腺癌细胞株SW1990增殖及细胞凋亡、细胞周期的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度EGCG(6.25、12.5、25、50、100μg/ml)对体外培养的SW1990细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测EGCG(25μg/ml)对SW1990细胞凋亡及不同浓度的EGCG(0、10、20、30、40、50 μg/ml)对SW1990细胞周期的影响.结果 不同浓度EGCG(0、25、50μg/ml)作用SW1990细胞24 h后,吸光度值(A492)分别为0.46±0.04、0.42±0.04、0.27±0.03,48 h后分别为0.48±0.02、0.31±0.03、0.16±0.02,72 h后分别为0.51±0.01、0.24±0.04、0.14±0.04,EGCG呈浓度及时间依赖性抑制SW1990的增殖(P<0.01).25 μg/ml EGCG作用于SW1990细胞24、48、72 h后的细胞凋亡率分别为(8.33±1.15)%、(19.77±0.81)%、(29.17±0.75)%,而对照组相应的细胞凋亡率分别为(2.77±0.45)%、(3.20±0.26)%、(3.67±0.35)%,两组差异具有统计学意义(P<0.01).0、20、50 μg/ml EGCG作用SW1990细胞24 h后,G0/G1期细胞分别占(57.59±0.97)%、(62.99±1.91)%、(68.87±1.88)%,随着EGCG浓度的增加,Go/G1期细胞比例明显增加,而S期和G2/M期细胞比例相应下降(P<0.01).结论 EGCG能明显抑制SW1990细胞的增殖,其机制可能与其诱导SW1990细胞凋亡及调控细胞周期有关. 彭凯 孔心涓 田字彬 张翠萍 赵清喜 魏良洲 王斌关键词:胰腺肿瘤 表没食子儿茶素没食子酸酯 细胞周期 锤头状核酶对肝癌突变基因p53的抑制作用 被引量:3 2003年 目的 探讨p53核酶对肝癌细胞突变型抑癌基因p53的抑制作用。方法 应用计算机设计并合成针对突变型p53(249位密码子AGG→AGT)的锤头状核酶RZ,构建其体外转录和真核表达载体,检测核酶对突变型p53(mtp53)的体外切割作用,并在Lipofect AMINE^(TM)2000的介导下转染肝癌细胞MHCC97,应用逆转录聚合酶联反应(RT—PCR)检测核酶对肝癌细胞突变型p53的抑制作用。结果 测序证实核酶基因被正确克隆入体外转录载体pBSKU6和真核载体pEGFPC1中。体外切割效率为42%,而野生型p53(wtp53)没有被切割。在LipofectAMINETM2000的介导下成功转染肝癌细胞MHCC97,RT—PCR检测证实突变型p53的mRNA水平明显下降,细胞内的切割效率为69%。结论 p53核酶可成功抑制肝癌细胞中突变型p53的表达,为肝癌的基因治疗提供了一个新的选择。 孔心涓 林菊生 宋宇虎 沈霞 金由辛关键词:锤头状核酶 肝癌 P53基因 基因治疗 乙肝肝移植受者术后胃肠镜筛查结果报告-单中心经验 目的调查因乙肝相关性终末期肝病接受原位肝移植手术的患者术后胃肠道疾病的发生率,并对其影响因素进行初步探讨。方法选取2018年1月至2018年6月间于青岛大学附属医院器官移植中心门诊定期随访的乙肝肝移植受者,对其进行电子胃... 刘东岳 解曼 孔心涓 臧运金 饶伟文献传递 非乙醇性脂肪性肝炎病人IL-6和hsCRP测定及意义 2009年 目的探讨非乙醇性脂肪性肝炎(NASH)病人血清白细胞介素-6(IL-6)和高敏C反应蛋白(hsCRP)水平及其临床意义。方法检测27例NASH病人(NASH组)、33例非乙醇性单纯性脂肪肝病人(NAFL组)及30例健康对照者(对照组)血清IL-6、hsCRP、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和空腹血糖(FPG)水平,并测定收缩压及体质量指数(BMI)。结果与对照组相比,NASH组血清hsCRP、IL-6、ALT、AST、GGT、TC、TG、FPG、BMI和收缩压水平均明显升高,差异有显著性(F=3.58~35.70,q=5.30~10.50,P<0.05、0.01);NAFL组血清hsCRP、ALT、AST、GGT、TC、BMI亦明显升高,差异有显著意义(q=4.24~6.69,P<0.01)。与NAFL组相比,NASH组血清IL-6、ALT、AST、GGT、TG、收缩压水平均明显升高,差异有显著意义(q=2.54~10.46,P<0.05、0.01)。结论血清IL-6及hsCRP在NASH的诊断及鉴别诊断中有一定的临床意义。 任媛媛 田字彬 孔心涓 赵清喜 魏良洲关键词:白细胞介素-6 Maxizyme对肝癌突变抑癌基因p53抑制作用的实验研究 【目的】设计并合成针对人肝癌突变抑癌基因p53(mtp53)249位密码子(AGG→AGT颠换)的Maxizyme和锤头状核酶,构建其细胞外转录载体和真核表达载体,使其在细胞内在U6RNA聚合酶Ⅲ作用下高效转录.通过细胞... 孔心涓关键词:锤头状核酶 原发性肝癌 突变型P53 基因治疗 文献传递 乙型肝炎肝移植术后新型核苷(酸)类似物的应用研究进展 被引量:1 2021年 乙型肝炎复发是乙型肝炎肝移植受者术后面临的常见问题之一。近年来,核苷(酸)类似物(NAs)的应用极大地降低了肝移植术后乙型肝炎复发率,但其长期应用也带来了诸如HBV耐药及肾功能损伤等弊端。富马酸替诺福韦酯(TDF)和富马酸丙酚替诺福韦(TAF)均属于治疗乙型肝炎的低耐药NAs,其在肝移植领域的临床应用显示出良好的疗效和耐受性,尤其是在单一NAs预防肝移植术后乙型肝炎复发方面,具有较好的应用前景。本文对TDF和TAF等新型NAs在乙型肝炎肝移植术后的最新应用进展作一综述。 翟慧敏 解曼 孔心涓 饶伟关键词:核苷(酸)类似物 乙型肝炎 终末期肝病模型评估失代偿期肝硬化患者预后的价值 被引量:7 2009年 目的:评价终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)对肝硬化患者短期预后预测的价值.方法:对肝硬化失代偿期患者203例进行回顾性分析,随访患者在3、6及12mo内的预后.记录每例患者入院第1天的MELD及Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分.应用接受者工作特征曲线(ROC曲线)及其曲线下面积(AUC)比较MELD、CTP评估患者生存时间的准确性.依据ROC曲线的截断值绘制Kaplan-Meier生存曲线,应用非参数秩相关即Spearman等级相关检验分析MELD与CTP评分的相关性.结果:3、6及12mo内分别死亡23、39、85例,MELD评分与CTP评分均显著相关(r=0.76,0.69,0.71,均P<0.01).3、6及12mo内MELD与CTP对住院患者预后预测的AUC分别为0.886和0.775(P<0.01)、0.892和0.876(P>0.05)、0.873和0.866(P>0.05).生存分析表明2评分系统均可有效预测3、6及12mo内患者可能的生存率和死亡率(P<0.01).结论:MELD模型可预测失代偿肝硬化患者12mo内的生存率,3mo内MELD模型优于CTP评分,但6mo及12mo内MELD模型和CTP评分相比没有明显优势. 孔心涓 姜英俊 赵清喜 武军 刘思良 田字彬关键词:终末期肝病模型 肝硬化失代偿期 下丘脑性厌食大鼠胃肠组织核组蛋白2/nesfatin-1的表达及胃排空的变化 被引量:1 2014年 目的研究下丘脑性厌食大鼠和对照大鼠胃肠组织核组蛋白2/nesfatin-1的表达差异及胃排空变化情况。方法 雄性Wistar大鼠均分为下丘脑腹外侧核(VLH)损毁组和对照组,每组各6只,将电极插至大鼠VLH区,VLH损毁组通人2 mA直流电流10s损毁核团,对照组不通入电流。监测大鼠术后每日摄食量及体质量增加量,术后21 d,酚红灌胃法测定胃排空率,取胃、十二指肠、小肠、结肠组织,分别采用实时荧光定量RT-PCR及免疫组织化学和免疫荧光的方法检测核组蛋白2 mRNA及核组蛋白2/nesfatin-1蛋白的表达情况。计量资料采用两独立样本均数t检验,采用rest2009软件分析RT-PCR结果。结果VLH损毁组大鼠较对照组摄食量明显减少,体质量增长减慢,呈下丘脑性厌食表现。VLH损毁组大鼠胃排空率[(29.12±3.96)%]低于对照组[(61.08±6.02)%],差异有统计学意义(=-10.864,P〈0.01)。核组蛋白2/nesfatin-l蛋白分别表达于大鼠胃黏膜中下2/3的内分泌细胞、十二指肠及小肠腺窝部潘氏细胞。VLH损毁组大鼠胃、十二指肠、小肠组织核组蛋白2/nesfatin1蛋白表达量均少于对照组,差异有统计学意义(t=-7.130,P=0.001;t=-9.599,P〈0.01;t=-21.111,P<0.01)。VLH损毁组大鼠胃、十二指肠、小肠组织核组蛋白2 mRNA表达量分别为对照组的27.1%(16.5%~40.2%)、27.8%(13.6%~58.0%)、53.4%(41.0%~74.7%),差异均有统计学意义(t=-6.023,P〈0.01;t=-3.410,P=0.017;t=-4.900,P=0.001);VLH损毁组结肠组织核组蛋白2 mRNA表达量为对照组的95.0%(74.0%~134.7%),差异无统计学意义(P〉O.05)。结论下丘脑性厌食大鼠胃、十二指肠、小肠组织核组蛋白2mRNA及核组蛋白2/nesfatin-1蛋白表达下调,胃排空率降低。 邓润钧 田字彬 魏良洲 孔心涓 丁雪丽 荆雪 张翠萍 孙桂荣 葛银林关键词:胃排空 NESFATIN-1