孔得翔
- 作品数：8 被引量：23H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江省科技厅重点资助项目浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目更多>>
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- 弓形虫半巢式PCR检测方法的建立及弓形虫P30基因的表达
- 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)呈全球性分布,专性细胞内寄生,能导致人兽共患的弓形虫病。通常成人感染弓形虫多无症状,但孕妇、婴儿和免疫低下者感染后危害极大。牲畜感染弓形虫也给畜牧业造成严重的经济损失。迄今...
- 孔得翔
- 关键词：刚地弓形虫病原学检测基因工程疫苗
- 文献传递
- 弓形虫半巢式PCR检测方法的建立被引量：18
- 2009年
- 根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序。结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%。该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg。该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持。
- 孔得翔王素华曲道峰蔡渭明杜爱芳
- 关键词：猪弓形虫病P30基因半巢式PCR克隆
- 弓形虫速殖子表膜蛋白的研究进展被引量：2
- 2007年
- 王素华孔得翔曲道峰杜爱芳
- 关键词：膜蛋白弓形虫无性生殖有性生殖生殖阶段生活史
- pB-Act-EGFP表达载体的构建及不同转基因方法对GFP表达的影响
- 本文比较了不同转基因方法对绿色荧光蛋白基因在秀丽隐杆线虫中的表达效果。将pBluescript SK+表达载体和pcDNA-EGFP载体上的EGFP序列分别经Bam HI和Not I双酶切,连接筛选阳性克隆,并进行酶切鉴...
- 杜爱芳庞林海周前进侯玉慧高翔孔得翔
- 关键词：秀丽隐杆线虫启动子
- 文献传递
- 鸡柔嫩艾美耳球虫ZJ株TA4基因的克隆及原核表达
- 本试验对E．tenella ZJ株的TA4基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫TA4基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR的方法扩增得到一特异片段,将扩增产物克隆至 pMD18-T转化D...
- 杜爱芳高翔徐慧侯玉慧庞林海孔得翔
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫RT-PCR原核表达
- 文献传递
- 一种检测弓形虫的半巢式PCR方法
- 本发明提供一种检测弓形虫的半巢式PCR方法，通过设置PCR检测试剂盒，被检样品DNA提取，半巢式PCR扩增，扩增产物分析，判定样品为弓形虫感染阳性或阴性。发明的方法，可快速、准确地检测出被检样品中的弓形虫，也可用于弓形虫...
- 杜爱芳曲道峰孔得翔
- 文献传递
- 一种检测弓形虫的半巢式PCR方法
- 本发明提供一种检测弓形虫的半巢式PCR方法，通过设置PCR检测试剂盒，被检样品DNA提取，半巢式PCR扩增，扩增产物分析，判定样品为弓形虫感染阳性或阴性。发明的方法，可快速、准确地检测出被检样品中的弓形虫，也可用于弓形虫...
- 杜爱芳王素华曲道峰孔得翔
- 文献传递
- 猪附红细胞体体外培养体系的初步探讨被引量：3
- 2008年
- 为了建立稳定可靠、简单易行、成本低廉的猪附红细胞体体外培养方法,从RPMI-1640、D-MEM、M-199 3种培养液中筛选出效果最好的基础培养基。在筛选出的基础培养基中分别添加20%、30%、40%的猪血清,筛选出培养效果最好的血清浓度。结果表明:以RPMI-1640基础培养基中添加40%的猪血清,在37℃5%的CO2环境下体外培养效果最好。该培养方法的建立,可为猪附红细胞体生物学特性以及药物防治等奠定基础。
- 赵现锋曲道峰张红丽周前进徐慧孔得翔杜爱芳
- 关键词：猪附红细胞体体外培养
