娄江涛
- 作品数：10 被引量：43H指数：4
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- 女贞子多糖在脂多糖诱导大鼠睾丸支持细胞炎性损伤中保护作用的研究被引量：12
- 2018年
- 目的:探究女贞子多糖(LLP)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠睾丸支持细胞炎性损伤的影响。方法:体外分离和培养大鼠支持细胞,分对照组、LPS组、LPS+低剂量LLP组、LPS+中剂量LLP组和LPS+高剂量LLP组,处理细胞48 h。CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,紫外分光光度法检测细胞培养液上清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)浓度; ELISA检测各组细胞培养液上清中IL-1α,IL-6和TGF-β含量后,去除LPS继续培养48 h,再次检测各组细胞培养液上清中IL-1α,IL-6和TGF-β含量。结果:各组细胞增殖组间差异有统计学意义(F=153. 93,P <0. 01),LPS组与对照组相比细胞增殖率明显降低(P <0. 01),而中剂量和高剂量LLP+LPS组与LPS组相比细胞增殖率明显增高(P <0. 01);各组细胞凋亡率组间差异有统计学意义(F=64. 06,P <0. 01); LPS组与对照组相比细胞凋亡率明显增高(P <0. 05),而与LPS组相比,中剂量和高剂量LLP+LPS组细胞凋亡率有不同程度的下降(P <0. 01)。各组细胞SOD、CAT、GSH-Px和MDA组间差异均有统计学意义(F值分别为56. 07、41. 57、238. 46、285. 31,P <0. 01),LPS组与对照组相比SOD、CAT和GSH-Px活性均明显降低(P <0. 01),MDA浓度明显增加(P <0. 01);中剂量和高剂量LLP+LPS组与LPS组相比,SOD和CAT活性均有不同程度升高,而3种剂量LLP+LPS组与LPS组相比,GSH-Px活性逐渐升高,MDA浓度逐渐下降(P <0. 01)。去除LPS前,LPS组与对照组相比IL-1α、IL-6和TGF-β浓度明显增加(P <0. 01),中剂量和高剂量LLP+LPS组与LPS组相比IL-1α浓度逐渐增加(P <0. 05或<0. 01),而3种剂量LLP+LPS组与LPS组相比,IL-6和TGF-β浓度变化不明显(P> 0. 05)。去除LPS后LPS组IL-1α、IL-6明显降低,而TGF-β明显增加(t值分别为25. 26、61. 43和-18. 16,P <0. 01); LLP+LPS组IL-1α和IL-6较LPS组下降更明显,TGF-β浓度增加更显著(P <0. 01)。结论:LLP在LPS诱导大鼠睾丸支持细胞
- 余亮亮娄江涛魏任雄陈建伟
- 关键词：支持细胞炎性损伤脂多糖免疫因子女贞子多糖
- 精浆游离MicroRNA 34-b在特发性少精子症及无精子症中的表达和临床应用被引量：2
- 2015年
- 目的研究游离Micro RNA 34-b（mi R-34b）在特发性少精子症和特发性无精子症患者精浆中的表达及诊断价值。方法收集特发性少精子症、特发性无精子症和同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性精液各20份,采用实时荧光定量PCR检测精浆游离mi R-34b的相对含量,通过方差分析统计各组间的差异,并对精浆游离mi R-34b在特发性少精子症和特发性无精子症中的诊断价值进行ROC曲线分析。结果正常对照组、特发性少精子症组和特发性无精子症组三组间精浆mi R-34b表达量差异有高度统计学意义（F=21.44,P〈0.01）,与正常对照组相比,特发性少精子症组和特发性无精子症组精浆mi R-34b表达量显著降低,差异有高度统计学意义（P均〈0.01）,但特发性少精子症组与特发性无精子症组间精浆mi R-34b相对含量差异无统计学意义（P=0.31）。ROC曲线显示mi R-34能够较好的区分特发性少精子症组与健康对照组以及特发性无精子症组与健康对照组曲线下面积分别为（AUC）为0.85（95%CI,0.73~0.97）、0.90（95%CI,0.80~0.99）。结论 mi R-34b在特发性少精子症和特发性无精子症患者精浆中明显降低,并对特发性少精子症和特发性无精症子症显示出一定的诊断价值。
- 娄江涛魏任雄余亮亮史波崔云
- 关键词：特发性少精子症特发性无精子症MI精浆
- 男性免疫性不育患者外周血T细胞亚型分布被引量：5
- 2016年
- 目的分析男性免疫性不育患者外周血T细胞及Th细胞亚型分布情况,揭示男性免疫性不育者的机体免疫状态。方法采用流式细胞术检测男性免疫性不育患者外周血T细胞亚型分布,采用实时荧光定量PCR检测Th1和Th2的效应因子γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)在基因转录水平的表达。结果流式细胞术检测结果显示,与正常对照相比,免疫性不育患者CD3+T细胞占淋巴细胞百分比明显升高,CD8+T细胞占淋巴细胞百分比明显升高,CD4+T细胞占淋巴细胞百分比明显降低,免疫性不育者CD4/CD8比值下降并倒置,差异均具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,与正常对照相比,IFN-γ mRNA在免疫性不育组的表达量显著上调,IL-4 mRNA的表达量显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论男性免疫性不育患者免疫系统出现T淋巴细胞功能失调及Th细胞分化向Th1细胞方向极化偏移。
- 张晓霞魏任雄周俊娄江涛
- 关键词：T淋巴细胞亚群
- 精浆miR-122-3p和miR-141-Sp的稳定性及对于特发性弱精症的诊断价值SeminalplasmamiR-122·-3pandmiR-141·。5pstabilityanditsdiagnosisvalueforidiopathicasthenospermia被引量：3
- 2016年
- 目的探讨精浆游离miR-122—3p和miR-141—5p的稳定性及其对特发性弱精症的诊断价值。方法分析不同的室温孵育时间、反复冻融次数、4℃放置时间下精浆游离miR-122-3p和miR-141—5p的稳定性。应用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence guantitative-polymerase chain reaction，RT—PCR）检测实验组和对照组精浆miR-122—3p和miR-141—5p的含量，以U6snRNA作为内参。相对定量采用2^-ΔΔCt帕法。将特发性弱精症组按精子前向运动百分比分为a组（0～20％）和b组（21％～32％），比较两组精浆miR-122—3p和miR-141—5p的含量差异。结果在不同的室温孵育时间、4℃放置时间下，精浆miR-122—3p和miR-141-5p含量无明显变化。在反复冻融的条件下，精浆miR-122-3p和miR-141—5p随着冻融次数的增加而减少。RT-PCR结果表明，特发性弱精症组的精浆游离miR-122-3p含量低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），miR-141-5p含量高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。精浆游离miR-122—3p和miR-141—5p含量在特发性弱精症a组和b组之间均有显著性差异（P〈O．05）。ROC曲线结果显示，miRq22—3p曲线下面积为0．88，当以1．02为最佳截断值时，敏感度为83％，特异度为84％。miR-141—5p的曲线下面积为0．88，当以2．95为最佳截断值时，敏感度为84％，特异度为70％。结论精浆中游离miR-122-3p和miR-141—5p可稳定存在，其在特发性弱精症中的差异表达对特发性弱精症的诊断有一定的应用价值。
- 张晓霞魏任雄娄江涛周俊
- 男性不育中医证型与精浆游离microRNA表达相关性研究被引量：8
- 2016年
- 目的：观察精浆miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5p在男性不育各中医证型中的表达特征，为男性不育中医证型的辩证论治提供一种分子标志物。方法选择男性不育患者141例，依照中医辨证分型标准又分为肾阳虚证21例，肾阴虚证43例，痰湿内蕴证37例，肝郁血瘀证40例。另外选择生育力评估正常的健康男性30例为对照组。统计分析各组精液常规质量参数及精浆miR-34b、miR-122-3p、miR-141-5p表达的差异。精子浓度及前向运动精子百分率用计算机辅助精子分析系统，精子存活率用低渗膨胀实验，精子形态采用Diff-Quick染色法，精浆microRNA（miRNA）表达用实时荧光定量RT-PCR。结果肾阳虚组精子浓度（52.37±15.31）×106/mL较其他中医证型显著下调（P＜0.05）。肝郁血瘀证精子存活率（31.41±10.38）%和前向运动精子百分率（24.18±4.65）%较其他中医证型降低（P＜0.05或P＜0.01），正常形态精子（3.21±1.68）%较肾阴虚证及痰湿内蕴证显著降低（P＜0.01）。肾阴虚证精液液化时间（36.13±10.91）min较肾阳虚证及痰湿内蕴证明显延长（P＜0.05）。各组间精浆miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5p表达均有非常显著性差异（P均＜0.01）。肾阳虚证miR-34b较其他各组显著下调（P均＜0.01）。肝郁血瘀证miR-122-3p较肾阴虚证及痰湿内蕴证显著下调（P＜0.05），肝郁血瘀证miR-141-5p较肾阳虚证、肾阴虚证及痰湿内蕴证显著上调（P＜0.05或P＜0.01）。绘制ROC曲线，精浆miR-34b和miR-141-5p对肾阳虚证的诊断价值分别为ROCAUC=0.940（0.893～0.986，95%）和 ROCAUC=0.674（0.557～0.792，95%），在最佳截断值下，其敏感度和特异度分别为（90.0%，81.0%）和（62.0%，76.2%）。3种精浆miRNA对肾阴虚证及痰湿内蕴证ROCAUC均＜0.50。miR-34b、miR-122-3p和miR-141-5P对肝郁血瘀证的ROCAUC分别0.698（0.617～0.779，95%）、0.773（0.684～0.863，95%）和0.753（0.657～0
- 魏任雄崔云黄纪红娄江涛张晓霞周俊
- 关键词：不育中医证型微RNAS
- 红景天苷减轻手机电磁辐射对大鼠睾丸支持细胞损伤的实验研究被引量：4
- 2018年
- [目的]探究红景天苷在手机电磁辐射诱导睾丸支持细胞损伤中的保护作用。[方法]体外分离培养大鼠睾丸支持细胞,并分为5组,对照组、辐射组、辐射+低剂量红景天苷组、辐射+中剂量红景天苷组和辐射+高剂量红景天苷组。对照组不作任何处理,其余组均接受频率为900MHz的电磁辐射,24h/d,辐射+低剂量红景天苷组、辐射+中剂量红景天苷组和辐射+高剂量红景天苷组同时分别加入终浓度分别为100、200、400μg·mL-1的红景天苷,继续培养5d后,CCK-8法检测各组细胞增殖活性;紫外分光光度法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;FQ-PCR检测各组细胞雄激素结合蛋白(androgen binding protein,ABP)、抑制素βB亚基(inhibinβB,INHβB)mRNA表达水平。[结果]各组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=153.93,P<0.01);与对照组比较,辐射组细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与辐射组比较,辐射+中剂量红景天苷组和辐射+高剂量红景天苷组细胞增殖活性增高(P<0.01)。各组间SOD、CAT、GPx活性和MDA含量差异均有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,辐射组SOD、CAT和GPX活性均明显降低,MDA含量明显增加(P<0.01);与辐射组比较,辐射+中剂量红景天苷组和辐射+高剂量红景天苷组SOD、CAT和GPX活性逐渐升高,MDA含量逐渐下降(P<0.05或P<0.01)。各组细胞中ABP和INHβB mRNA表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,辐射组ABP和INHβB mRNA表达均明显降低(P<0.01);与辐射组比较,辐射+中剂量红景天苷组和辐射+高剂量红景天苷组ABP和INHβB m RNA表达均增高(P<0.05或P<0.01)。[结论]红景天苷可降低手机电磁辐射对睾丸支持细胞分泌ABP和INHβB的影响,减轻睾丸支持细胞氧化损伤。
- 翁碧霞娄江涛余亮亮魏任雄
- 关键词：红景天苷睾丸支持细胞FQ-PCR
- 脱敏煎治疗男性免疫性不育疗效分析及对外周血T细胞亚型的影响被引量：3
- 2017年
- 目的分析脱敏煎治疗男性免疫性不育患者前后AsAb、精液常规参数、外周血T细胞及Th细胞亚型分布的变化情况,探讨脱敏煎对男性免疫性不育患者的精液常规参数及机体免疫状态的影响。方法收集男性免疫性不育患者50例,在脱敏煎治疗前后检测患者AsAb;计算机辅助精子分析仪检测精子浓度及前向运动精子(PR);低盐膨胀实验检测精子存活率,Diff-Quick染色法检测正常精子形态百分率;流式细胞术检测患者外周血T细胞亚型分布;RT-PCR检测IFN-γ、IL-4 mRNA表达情况。结果经脱敏煎治疗后,患者AsAb转阴率达76.00%,精子浓度明显升高(P<0.05),精子活率及PR亦明显升高(P均<0.01),而正常精子形态百分率无明显变化(P>0.05)。患者外周血CD3^+T和CD8^+T细胞数明显降低,CD4^+T细胞数明显升高(P均<0.01)。IFN-γmRNA表达量显著下调(P<0.05),IL-4 mRNA的表达量显著上调(P<0.05)。结论脱敏煎治疗可明显改善男性免疫性不育患者T淋巴细胞功能失调,提高精子浓度/精子存活率和活力,降低AsAb阳性率。
- 娄江涛郜都吴骏张晓霞魏任雄
- 关键词：男性免疫性不育T细胞亚型脱敏煎
- miR-34b在男性不育患者精浆中的表达及其临床意义被引量：4
- 2015年
- 目的研究精浆游离miR-34b在体外不同条件下的稳定性及其与男性不育症患者精液参数的关系。方法选取男性不育症患者80例和同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性20例为正常对照组，将8例正常的精液标本分别在室温和．80℃下放置，以不同时间点检测精浆miR-34b的稳定性。采用实时荧光定量PCR检测精浆游离miR-34b的相对含量，精子浓度及精子活力用计算机辅助精子分析系统，精子存活率采用低盐膨胀实验检测，正常精子形态百分率采用Diff-Quick染色法。分析男性不育症组和正常对照组精液参数及miR-34b表达量的差异，对精浆游离miR-34b在男性不育组精浆中的诊断价值进行ROC曲线分析，并采用Pearson直线相关分析miR-34b与男性不育组精液各参数的相关性。结果精浆游离miR-34b在室温和低温下不同时间点表达量无明显变化（F=0．13，P=0．97；F=0．35，P=0．84）。与正常组比较发现，男性不育组精浆游离miR-34b表达下调（P〈0．01）。两组的精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率（PR）和正常形态精子百分率均有差异（P〈0．01）。ROC曲线显示miR-34b能够较好的区分不育组与健康对照组，曲线下面积分比（AUC）为0．85（0．79．0．95，95％）。Pearson直线相关分析发现男性不育患者精浆miR-34b表达量与精子密度（r=0．28，P〈0．05）、精子活率（r=0．56，P〈0．01）、前向运动精子百分率（r=0．41，P〈0．01）正相关，与精子形态无相关性（r=0．15，P〉0．05）。结论精浆miR-34b在室温下稳定，并能在．80℃条件下长期保存，在男性不育患者精浆中表达下调，并与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率呈正相关，与精子形态无相关性。
- 娄江涛魏任雄余亮亮张晓霞崔云
- 关键词：不育微RNASROC曲线
- 3031例血流感染病原菌分离情况及耐药性分析被引量：1
- 2012年
- 目的研究我院血流感染病原菌的分离情况以及对抗生素的耐药情况,以指导临床合理用药。方法采用BACT/ALERT 3D60全自动血培养仪进行血培养,西门子MicroScan WalkAway 40全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果 2009～2011两年间共送检血培养标本3 031例,基本采用单侧双瓶采血,需氧培养1 531例,厌氧培养1 500例,共分离出病原菌268株,阳性率8.84%。其中G+菌152株,占56.7%;G-菌98株,占36.6%;真菌18株,占6.7%。最常见的分离病原菌是凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌。仪器报警阳性在12 h之内82株,12～24 h之间105株,24 h内共有187株,占78.6%,且12 h内同一株兼性厌氧菌培养比需氧培养阳性报告稍快。结论血流感染是临床上最严重感染,快速准确地培养出病原菌并进行耐药性分析是非常重要的,以便指导临床合理用药。另外,对于凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),临床医生应结合病史、症状及其他检查来判断是污染还是真正的病原菌。
- 夏晴晴娄江涛王卫华陈建伟
- 关键词：血流感染病原菌耐药性
- TGF-β1在大鼠睾丸支持细胞的作用及对紧密连接的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨TGF-β1在大鼠睾丸支持细胞增殖和凋亡中的作用以及对紧密连接相关蛋白基因表达的影响。方法:体外分离和培养大鼠睾丸支持细胞,分空白对照组、TGF-β1受体阻滞剂组、TGF-β1刺激组和TGF-β1+受体阻滞剂组共4组。CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;建立支持细胞原代双室培养模型,应用跨上皮电阻测定法(TER)检测单层细胞两侧跨细胞电阻值;RT-PCR和Western印迹检测支持细胞闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)和紧密连接蛋白Ⅱ(ClaudinⅡ)的相对表达量。结果:各组细胞增殖组间差异有统计学意义(F=5.05,P<0.05),TGF-β1刺激组与空白对照组相比细胞增殖率增加(P<0.05),而TGF-β1+受体阻滞剂组与TGF-β1刺激组相比细胞增殖率降低(P<0.05)。各组细胞凋亡率组间差异无统计学意义(F=1.13,P>0.05);各组细胞间TER差异有统计学意义(F=38.99,P<0.01),与空白对照组比较TGF-β1刺激组TER降低(P<0.01),与TGF-β1刺激组比较,TGF-β1+受体阻滞剂组和TGF-β1受体阻滞剂组细胞TER升高(P均<0.01);各组支持细胞中ZO-1、ClaudinⅡmRNA及蛋白在各组中的表达量差异均无统计学意义(F_(mRNA)=0.49,0.93,P均>0.05;F_(蛋白)=0.28,1.31,P均>0.05),而Occludin mRNA及蛋白在各组中的表达量差异均有统计学意义(F_(mRNA)=6.86,F_(蛋白)=6.87,P均<0.05);与空白对照组相比,TGF-β1刺激组Occludin mRNA及蛋白表达明显降低(P均<0.01),而加入受体阻滞剂后,Occludin mRNA及蛋白表达明显回升(P均<0.05)。结论:TGF-β1对睾丸支持细胞的增殖有促进作用,并能通过调节Occludin蛋白的表达而影响大鼠支持细胞间的紧密连接。
- 娄江涛魏任雄余亮亮陈建伟崔云
- 关键词：转化生长因子Β1睾丸支持细胞
