姚志峰
- 作品数:13 被引量:27H指数:4
- 供职机构:复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 猪骨髓间充质干细胞超顺磁性氧化铁标记方法的实验研究被引量:4
- 2009年
- 目的:探索超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记猪骨髓间充质干细胞(MSCs)的合适方案。方法:分离培养猪MSCs,用不同SPIO浓度、不同共孵育时间进行标记,根据标记效率指标(普鲁士蓝染色、细胞铁浓度测定、细胞透射电镜检查)和标记毒性指标(台盼蓝排除试验、CCK-8试验)确定适宜的标记条件,然后对不同标记细胞进行磁共振(MR)体外成像。结果:(1)随着SPIO浓度的增加,MSCs细胞内平均含铁量相应升高;细胞涂片普鲁士蓝染色也显示细胞内蓝染颗粒相应增加。当SPIO浓度为25、50μg·mL-1时,细胞存活率和细胞活力与无SPIO时差异无统计学意义(P>0.05);但当SPIO浓度增加到100μg·mL-1时,CCK-8试验显示细胞活力下降(P<0.01);当SPIO浓度增加到200μg·mL-1时,细胞存活率和细胞活力均下降(P<0.05);(2)设定SPIO浓度为50μg.mL-1,随共孵育时间增加,细胞内含铁量逐渐升高(各组间比较均P<0.01);当标记时间为0、2、4、8、16、24h时,细胞存活率和细胞活力并差异无统计学意义(P>0.05);但当标记时间进一步延长到48h时,细胞存活率有所降低(P<0.05);(3)按"50μg/ml×24h方案"标记后,1.5TMR成像仪体外MRT2* WIflash检测阈值为7.5×104个细胞。结论:50μg·mL-1×24h方案是猪骨髓间充质干细胞比较合适的磁探针标记方案。
- 姚志峰黄浙勇解新星张书宁巩雪杨姗张少衡黄榕翀金航曾蒙苏孙爱军邹云增葛均波
- 关键词:超顺磁性氧化铁间充质干细胞
- 小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的实验研究被引量:1
- 2007年
- 目的::探索在短时间内建立小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,为深入研究心脏肥大的分子机制提供可靠的实验对象。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为升主动脉缩窄组(手术组)和同期假手术组(对照组),手术组根据暂时阻断主动脉血流5s、10s、20s、30s同时左心腔内分别注射Ad-LacZ或PBS后又分为LacZ组和PBS组,观察术后4周不同时间小鼠体重、颈动脉血压和心脏超声等变化HE染色和X-gal染色分别观察心肌肥厚情况和基因转染情况。结果:手术成活率88.8%。升主动脉缩窄小鼠的血压较对照组明显升高。缩窄术后2周心肌明显肥厚,4周时出现失代偿性心力衰竭。X-gal染色显示阻断血流5s以上心脏有蓝染,但10s、20s、30s之间无明显区别。结论:该方法简单有效,重复性好,可在短时间内建立小鼠心肌内转基因和压力超负荷心肌肥厚模型,为心脏肥大的深入研究提供可靠的实验对象。左心室心腔直接注射转染Ad-LacZ基因同时阻断升主动脉血流10s以上可以使目的基因有较好的表达。
- 姚志峰邹云增李纪明吴剑关爱丽梁艳艳李磊葛均波
- 关键词:升主动脉心肌肥厚小鼠转基因
- 小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的建立被引量:1
- 2007年
- 目的建立成年小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,探讨手术中关键性技术问题,为以后利用此模型研究相关心脏疾病提供可靠的实验方法。方法20只C57/BL6小鼠分成两组,分别是Lacz组和PBS组,用乙醚麻醉后,剪断右侧第一、二肋骨,打开胸腔,分离主动脉,用自制的弯钩在升主动脉下穿线,用带31G针头注射器从左心室部位进针,分别把携带Lacz基因的腺病毒载体100μl和PBS100μl注射入左心室,同时提起主动脉下的线暂时阻断主动脉血流5s、10 s、20 s、30 s后,关闭胸腔,饲养第2天,打开胸腔用26G的针头缩窄升主动脉70%,术后饲养1周,从右测颈动脉用27G针头穿刺测量血压后,取出心脏,用X-Gal染色,制成冰冻切片,显微镜下观察心脏的染色情况,用H-E染色观察心脏肥厚情况.以不缩窄升主动脉但做手术过程的假手术组做对照组。结果①术后1周成活率95%。②缩窄升主动脉的实验组比对照组的血压明显升高(P<0.05)。③H-E染色显示缩窄升主动脉1周后心室壁厚度增加。④肉眼和显微镜下都可以观察到同正常小鼠心脏比较,转染Lacz基因后阻断5 s或者更长时间主动脉血流的小鼠,心脏开始有蓝染,随时间延长颜色逐渐加深,但是阻断10 s、20 s和40 s主动脉血流的小鼠心脏蓝染无明显区别。结论①该方法简单有效,重复性好,可用来制作心肌内基因和心脏压力超负荷模型。②左心室心腔直接注射转染腺病毒携带的基因后,同时阻断升主动脉血流10 s以上可以使心脏基因有较好的表达,并且小鼠成活率高。
- 李纪明姚志峰吴剑关爱丽马桢梁艳艳李磊邹云增
- 关键词:小鼠心肌主动脉血流升主动脉室壁厚度冰冻切片
- 过表达P53、Ang-1和VEGF对压力超负荷引起的心肌重构和心力衰竭的影响被引量:1
- 2007年
- 目的观察过表达P53、Ang-1和VEGF对压力超负荷引起的心肌重构和心力衰竭过程的影响,以阐明心肌重构和心力衰竭发生发展的机制,为寻找防治该类疾病的新方法提供理论基础。方法将60只C57/BL6小鼠分成3组:P53组、Ang-1 +VEGF组和PBS组,用开胸心腔直接注射方法,分别转染腺病毒携带的P53、Ang-1+VEGF基因和PBS,转染第2天末,用升主动脉缩窄的方法建立压力超负荷模型,模型建立成功后,每周做心脏超声检测心脏功能和形态变化,每组分别于第2天、1周、2周和4周末测量右侧颈动脉压后取材,用H-E染色、Masson染色、TUNEL和免疫组化观察心脏形态变化和新生血管生成,用Western blot检测P53、Ang-1和VEGF表达情况,实验中有仅做手术过程但不缩窄升主动脉的假手术组做对照组。结果①在2-14d,缩窄升主动脉的小鼠心脏射血分数逐渐升高达高峰,14-28 d,逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著降低, Ang-1+VEGF组都显著升高,组间差异有统计学意义(P<0.05)。②在2-14 d,缩窄升主动脉的小鼠心室壁厚度逐渐升增加达高峰,14-28 d逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著降低, Ang-1+VEGF组都显著升高,组间差异有统计学意义(P<0.05)。③在2-28 d,缩窄升主动脉的小鼠心肌细胞凋亡数目逐渐增多,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著增多, Ang-1+VEGF组都显著减少,组间差异有统计学意义(P<0.05)。④在2-14 d,缩窄升主动脉的小鼠新生血管逐渐增多达高峰,14-28 d逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著减少, Ang-1+VEGF组都显著增多,组间差异有统计学意义.(P<0.05)。⑤Western blot检测腺病毒转染的P53、Ang-1和VEGF显示,转染组同未转染组比较,表达显著升高。结论①P53可以加剧压力超负荷导致心力衰竭发生发展的过程,Ang-1牙VEGF可以延缓压力超负荷导致心力衰竭发生发展的过程。②P53�
- 李纪明姚志峰李磊关爱丽吴剑梁艳艳马桢邹云增
- 关键词:ANG-1P53心肌重构升主动脉缩窄心脏射血分数
- 一种动脉模型快速生成方法
- 本发明公开了一种动脉模型快速生成方法,包括:利用CTA对冠状动脉造影并进行三维重建,得到三维模型,其中存在断点的血管为目标血管;利用DSA造影得到目标血管的连续的若干造影图像;根据目标血管趋势和造影图像计算基准血流速度;...
- 姚志峰过伟锋
- 文献传递
- 热休克转录因子1对压力超负荷引起的心室重构和心力衰竭的影响被引量:6
- 2008年
- 目的:探讨热休克转录因子1(heat shock transcription factor 1,HSF1)对压力超负荷引起的心室重构和心力衰竭发生发展的影响及其机制。方法:将实验动物分成4组:HSF1基因敲除小鼠组(knockout组)、野生型小鼠组(wild-type组)、HSF1转基因小鼠组(transgene组)和假手术小鼠组(sham组),小鼠经缩窄升主动脉后,每周做心脏超声检测心脏功能和形态变化,分别于第1周、2周和4周末测量右侧颈动脉压后取材,用HE染色、Masson染色和Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色观察心脏形态变化和新生血管生成情况,用Western blotting检测磷酸化Akt和RT-PCR检测缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)mRNA的表达情况。结果:(1)在0-14 d,缩窄升主动脉的小鼠心室壁厚度值和新生血管数逐渐升高达高峰,14-28 d,逐渐降低,但同wild-type组比较,knockout组在每1个时期都显著降低,transgene组都显著升高;(2)knockout组小鼠左室射血分数第1周就开始下降,wild-type组小鼠从第2周开始下降,而transgene组未见到有下降;(3)磷酸化Akt和HIF-1mRNA在knockout组显著降低,transgene组显著升高;心脏纤维化和死亡率在knockout组显著升高,transgene组显著降低。结论:HSF1通过调控血管新生,改善了压力超负荷引起的心室重构和心力衰竭,其中调控HIF-1的表达可能起着重要作用。
- 李纪明邹云增姚志峰姜红关爱丽吴剑牛玉宏弭守玲梁艳艳马桢
- 关键词:心室重构充血性热休克转录因子1缺氧诱导因子1
- G-CSF对压力超负荷下小鼠心室重构和心力衰竭的影响
- 临床研究显示,心脏肥大不仅是心脏对各种刺激的代偿反应,而且是心脏病发病和死亡的独立危险因素,是心力衰竭,心源性猝死的最常见原因,许多心血管疾病如高血压、瓣膜病、心肌梗死和肥厚型心肌病等均伴有心脏肥大,同时许多内在的和外在...
- 姚志峰
- 关键词:粒细胞集落刺激因子心室重构分子机制
- 文献传递
- 涂层Canakinumab的药物球囊的制备及应用
- 本发明涉及一种涂层Canakinumab的药物球囊的制备及应用,属于生物医药技术领域。本发明通过改变药物球囊的载药成分,将紫杉醇和具有抗炎作用的Canakinumab同时涂载至药物球囊,借助于药物球囊输送系统,同时将紫杉...
- 葛均波戚志勇姚志峰宋昱高微
- 文献传递
- 急性心肌梗死与血清铜浓度相关分析
- 目的研究急性心肌梗死病人与血清铜的关系方法选取心脏监护室急性心肌梗死病人219例与正常人50例作为研究对象,心梗组与对照组应用二元回归比较年龄、术前肌酐浓度、血清铜浓度等多因素分析,并比较ST段抬高型心肌梗死与非ST段抬...
- 沈洪姚志峰姚晨玲童朝阳舒先红
- 一种动脉模型快速生成方法
- 本发明公开了一种动脉模型快速生成方法,包括:利用CTA对冠状动脉造影并进行三维重建,得到三维模型,其中存在断点的血管为目标血管;利用DSA造影得到目标血管的连续的若干造影图像;根据目标血管趋势和造影图像计算基准血流速度;...
- 姚志峰过伟锋