夏章权
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hVEGF165/hBD-3双基因修饰BMSCs及其对放创复合伤的促愈作用研究
- 随着社会的发展进步，人们对全身和局部的电离损伤的担心愈来愈大，这些电离损伤来源于：核电站事故、恶性肿瘤治疗性的辐射、长时间的X线透视、核医学中过量放射性材料的吸入、核爆炸性恐怖事件等。机体损伤后出现协调的愈合过程，其中包...
- 夏章权
- 关键词：人血管内皮生长因子165创伤愈合放创复合伤
- 文献传递
- HBD3基因真核表达质粒载体的构建及其体外表达和活性鉴定
- 2012年
- 目的构建人β防御素3(HBD3)基因真核表达质粒载体,观察其在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,并检测其活性。方法利用RT-PCR方法从牙龈组织中扩增出HBD3基因片段,通过DNA重组技术将基因片段重组于pVIVO1-mcs真核表达质粒载体上,构建成pVIVO1-HBD3重组质粒载体,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组质粒载体进行鉴定。运用jetPEI转染试剂将重组质粒转染BMSCs后,RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹法检测目的基因的表达。取转染重组质粒的BMSCs无血清上清的浓缩液,采用K-B纸片扩散法进行抗菌活性实验。结果 (1)酶切电泳分析得到相应的目的片段,大小与理论计算值一致,DNA测序证实目的基因序列正确无突变,成功构建真核表达质粒载体pVIVO1-HBD3。(2)RT-PCR和免疫荧光、蛋白质印迹法分别从mRNA和蛋白质2个水平证实转染的BMSCs高表达HBD3。(3)转染重组质粒的BMSCs无血清上清的浓缩液对白色念珠菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌产生明显的抑菌环,证实了表达分泌出的HBD3的抗菌活性。结论构建了pVIVO1-HBD3基因真核表达质粒载体,证实其转染BMSCs后基因的表达和活性。
- 夏章权张从纪王涛
- 关键词：Β防御素间质干细胞
- VEGF165/HBD3双基因共表达真核质粒载体的构建及其体外表达
- 2011年
- 目的构建人血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)和人β防御素3(humanbeta defensins,HBD3)双基因共表达真核质粒载体、观察其在293FT细胞中的表达,并检测其活性。方法利用RT-PCR方法分别从白血病细胞(HL60)和牙龈组织中扩增出VEGF165和HBD3基因片段,通过DNA重组技术将基因片段先后重组于pVIVO1-mcs真核表达载体上,构建成pVIVO1-VEGF165-HBD3重组质粒载体,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组质粒载体进行鉴定。运用脂质体转染的方法将重组质粒转染293FT细胞后,RT-PCR和Western blot法检测目的基因的表达。用转染重组质粒的293FT无血清上清刺激内皮细胞EA.hy926增殖,CCK-8法检测其增殖效应。取转染重组质粒的293FT无血清上清的浓缩液,采用K-B纸片扩散法进行抗菌活性实验。结果①酶切电泳分析得到相应的目的片段,大小与理论计算值一致,DNA测序证实目的基因序列正确无突变,成功构建真核表达质粒载体pVIVO1-VEGF165-HBD3。②RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白质2个水平证实:转染重组质粒的293FT细胞高表达VEGF165和HBD3。③转染重组质粒的293FT无血清上清明显促进内皮细胞EA.hy926的增殖,证实了表达分泌出的VEGF165的活性。转染重组质粒的293FT无血清上清的浓缩液对大肠埃希菌(escherichia coli,EC)(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)(ATCC 25923)、绿脓杆菌(pseudomonas aeruginosa,PA)(ATCC 27853)和枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis,BS)(ATCC62037)产生明显的抑菌环,证实了表达分泌出的HBD3的活性。结论构建了pVIVO1-VEGF165-HBD3双基因共表达真核质粒载体,证实其转染293FT细胞后双基因的表达和活性。
- 夏章权张从纪王涛
- 关键词：血管内皮生长因子165人Β防御素3基因表达
- VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法
- 本发明涉及一种VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法，利用pVIVO1-mcs质粒载体系统，采用酶切重组的方式，将人牙龈组织中获得HβD3cDNA和白血病细胞(HL-60)中获得VEGF165cDNA构建成...
- 张从纪夏章权
- 文献传递
- 基因和干细胞疗法修复慢性难愈创伤的研究与应用
- 2012年
- 背景:许多疾病和因素都会使伤口久治不愈或延迟愈合,基因疗法和干细胞疗法为慢性难愈创伤的治疗提供了新的技术途径。目的:针对基因疗法和干细胞疗法用于治疗慢性难愈创伤的研究作一综述。方法:以"gene therapy,stem cell therapy和chronic wound"为检索词,检索Medline数据库(1980/2010-12),文献检索语种限制为英语。将近年发表的针对性强的文章纳入研究范围,同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章。排除与基因疗法和干细胞疗法相关性不强、陈旧的文献。结合自身的研究经验和纳入排除标准,对查阅到的最新研究成果详细分析并加以总结概括。结果与结论:初次检索到267篇文献,严格按照纳入标准,最终将33篇文献纳入研究。基因疗法和干细胞疗法都是新的治疗方法,其相关理论和技术已经成熟,为慢性难愈创伤的治疗提供了新的技术途径,它们的有效运用有望给慢性难愈创伤带来突破性的治疗效果。
- 夏章权张从纪王涛
- 关键词：基因疗法干细胞疗法愈合转染
