唐乙
- 作品数：16 被引量：36H指数：3
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠水通道蛋白1基因shRNA慢病毒载体构建与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的应用RNA干扰技术,构建小鼠水通道蛋白1(AQP1)基因重组慢病毒载体并鉴定。方法对小鼠AQP1 mRNA分析,设计合成的单链引物经退火形成双链寡核苷酸序列,连接入经Age I和EcoR I双酶切线性化的pLKO.1-TRC慢病毒质粒载体中,菌液PCR鉴定并经测序验证。测序正确后与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞,收集病毒上清经高速离心浓缩后感染小鼠小胶质细胞BV-2,Western blot法分析筛选有效shRNA序列。结果成功退火合成3对发夹shRNA序列并将其克隆到pLKO.1-TRC载体中,构建重组质粒pLKO-AQP1-SH1、2、3,经菌液PCR鉴定和测序验证载体构建成功。Real-time PCR检测发现重组质粒pLKO-AQP1-SH2感染BV-2细胞后AQP1 mRNA表达最低,Western blot结果进一步验证结果的准确性。结论成功构建出AQP1基因shRNA慢病毒载体。
- 章杰江华张盈帆方帆宋艳玲唐乙芦立轩
- 关键词：AQP1慢病毒神经系统损伤
- SOCS-1抑制TLR-4表达减轻肝脏缺血再灌注损伤的实验研究
- 启动获得性免疫应答需要特异性抗原的刺激和来自抗原提呈细胞(APC)的共刺激信号共同作用。TLRs 活化可激活天然免疫系统,诱导细胞产生活性氧中间物(ROI)、活性氮中间物(RNI)的产生以及 IFN-γ和 IL-1等炎症...
- 唐乙宋少华刘芳周绍武王海梁林峰丁国善王全兴曹雪涛
- 关键词：缺血再灌注损伤SOCS-1TLR-4肝移植
- 文献传递
- 糖尿病小鼠移植sil-1ri-ig基因修饰的同种胰岛细胞延长移植物存活期的机制研究
- i型糖尿病即胰岛素依赖型糖尿病(iddm)是一种受多基因调控并以胰岛素缺乏及血糖升高为其主要特征的自身免疫性疾病,胰岛β细胞的特异性免疫损伤是其发病的关键环节,免疫系统主要通过自身反应性t淋巴细胞、细胞因子等介导对胰岛β...
- 唐乙
- 关键词：I型糖尿病胰岛细胞
- 文献传递网络资源链接
- 雷帕霉素促进Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞产生的分子机制
- CD4CD25T调节性T细胞(regulatory,T cell,Treg)为一类具有免疫抑制作用的T细胞,以主动的方式参与免疫应答和免疫耐受的调控,在自身免疫耐受的调节以及在肿瘤免疫和移植免疫中发挥重要的调控作用。已有...
- 沈晓芸刘芳唐乙王全兴
- 文献传递
- 大鼠原位肝移植模型的手术技巧被引量：3
- 2008年
- 目的探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的外科手术技巧,为研究肝脏缺血再灌注损伤提供技术支持。方法110只雄性SD大鼠随机配对后分别作为供体和受体,通过改良Kamada"二袖套"法施行大鼠原位肝移植。结果改良Kamada法建立大鼠原位肝移植模型共52例,7d生存率88.5%,7例长期存活大于100d。结论大鼠原位肝移植模型的建立需要极度的耐心和娴熟的手术技巧,模型的建立有助于研究肝脏缺血再灌注损伤,移植免疫及器官保存。
- 王振猛唐乙宋少华陆智杰王全兴俞卫锋
- 关键词：原位肝移植动物模型
- 乳鼠肌源性干细胞向许旺样细胞的诱导分化被引量：1
- 2013年
- 背景:有证据显示,肌源性干细胞能够促进肌纤维的再生,增强再生肌组织的功能,并具有分化为神经外膜组织细胞和具有许旺细胞表型细胞的潜能。目的:分析许旺细胞条件培液诱导小鼠乳鼠源肌源性干细胞向许旺细胞的分化,探讨其作为神经组织工程的种子细胞的可行性。方法:取C57BL/6乳鼠四肢骨骼肌,采用改良的Preplate技术纯化培养肌源性干细胞,利用抗体Desmin和Sca-1对纯化后的细胞进行免疫细胞化学鉴定。采用许旺细胞条件培液诱导其向许旺细胞分化,并行许旺细胞特异性抗体S100β、P75NTR免疫细胞化学鉴定。结果与结论:从小鼠骨骼肌中分离得到肌源性干细胞,能在体外稳定增殖传代,Desmin和Sca-1免疫细胞化学染色阳性。肌源性干细胞经体外诱导分化后部分细胞S100β、P75NTR染色阳性。说明应用改良的Preplate方法,可从新生小鼠骨骼肌中分离得到肌源性干细胞;采用许旺细胞条件培液能将其诱导分化为许旺样细胞,有可能成为神经组织工程神经较理想的许旺细胞替代物。
- 宋艳玲唐乙丁维进王春燕苏志达江华张盈帆
- 关键词：干细胞肌源性干细胞诱导分化神经轴突神经组织工程
- 体外转染可溶性IL-1RI—Ig基因延长糖尿病小鼠移植胰岛细胞存活时间
- 2009年
- 目的探讨糖尿病小鼠移植经可溶性白细胞介素1（IL-1）受体胞外段Fc融合蛋白（sIL-1RI—Ig）基因修饰的胰岛细胞对延长移植物存活时间的作用及机制。方法将Ad-slL-1RI-Ig体外转染Balb／c小鼠的胰岛细胞，并将其移植给糖尿病C57BL／6小鼠，观察移植物的存活时间，并检测移植局部组织炎症细胞的浸润以及炎症细胞因子的表达。结果糖尿病小鼠移植转染slL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后，血糖水平很快下降至正常范围，胰岛移植物存活时间达（39±3）d，而移植正常胰岛细胞的小鼠胰岛移植物存活时间为（9±2）d（P〈0．01）。糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI—Ig基因的胰岛细胞后，胰岛素分泌量随糖负荷增加而升高，并与胰岛素分泌功能正常的小鼠呈相似变化趋势（P〉0．05）。糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后，移植局部组织表达肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）和RANTES等水平明显下调；病理学观察发现移植局部组织浸润的炎症细胞明显少于移植正常胰岛细胞的小鼠。结论sIL-1RFIg基因转染胰岛细胞后，可通过表达sIL-1RI-Ig，阻断IL-1的作用，降低TNF-α、IFN-γ、RANTES等细胞因子的表达，从而减轻排斥反应，延长胰岛细胞移植物的存活时间和提高胰岛素分泌功能。
- 唐乙宋少华刘芳王全兴
- 关键词：胰岛细胞移植胰岛素依赖型糖尿病
- 落新妇苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量：13
- 2009年
- 目的:探讨落新妇苷对大鼠肾脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的保护作用。方法:将24只健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组和落新妇苷组,每组8只。模型组和落新妇苷组大鼠用于制作肾脏IR模型。自术前3d开始,落新妇苷组大鼠腹腔注射12mg/mL落新妇苷30mg/kg,1次/d;模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水。于再灌注6h后检测各组大鼠血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,SCr)水平,并观察肾组织形态学变化;半定量逆转录聚合酶链式反应及蛋白印迹法检测肾组织内单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)mRNA及蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)含量。结果:再灌注6h后与模型组相比,落新妇苷组大鼠BUN和SCr水平均显著降低(P<0.01),大鼠肾小球及肾小管上皮细胞损伤明显减轻,肾组织内MCP-1mRNA(P<0.05)和蛋白表达下降,血清IL-6和IL-1β含量下降(P<0.01)。结论:落新妇苷能够有效减轻肾脏IR损伤,其保护作用可能与抑制IR后趋化因子MCP-1及细胞因子IL-6和IL-1β的产生有关。
- 宋少华沈筱芸刘芳唐乙王振猛傅志仁
- 关键词：落新妇苷再灌注损伤肾脏
- 供肝冷缺血保存24小时对同系大鼠肝移植胆汁分泌及胆道并发症产生的影响
- 肝移植术后胆道并发症(BC)是肝移植术后最常见的井发症之一，严重影响肝移远期疗效和移植物的存活。由于缺乏肝移植胆道井发症的实验动物模型，有关BC的动物实验研究的报道尚少。笔者在预实验中观察到供肝UW液冷缺血保存时间1-1...
- 史永照唐乙宋少华傅宏齐艳艳倪雷阳建宇丁国善傅志仁
- 关键词：胆汁分泌胆道并发症肝移植术
- 文献传递
- 应用改良差速贴壁法和有限稀释技术分离培养小鼠来源肌源干细胞被引量：3
- 2011年
- 背景:研究者们通过多种方法从肌组织中分离得到肌源干细胞,并应用于各类组织工程和再生医学研究。目的:结合改良的差速贴壁法和有限稀释技术分离小鼠来源肌源干细胞,并培养其单细胞克隆和亚克隆集落。方法:以新生C57BL/6小鼠四肢作为肌组织取材对象,经三重酶消化和细胞筛过滤,运用改良的差速贴壁法分离出肌源干细胞,予细胞特异标记物以免疫组织化学染色;以有限稀释技术克隆培养的方法,获得稳定的肌源干细胞单克隆和亚克隆集落。结果与结论:差速贴壁培养过程中,肌性细胞占比逐渐增高,首次贴壁1h可以获得足够数量的细胞进行第6次贴壁培养;肌源干细胞需72h左右贴壁生长,经10d左右可以增殖为300～500细胞数量的集落,细胞形态以小圆形细胞为主,并有少量梭形细胞,肌源干细胞能够维持形态并持续增殖;应用有限稀释技术可获得肌源干细胞单克隆和亚克隆集落,肌源干细胞克隆细胞均呈现Desmin染色阳性,Sca-1染色阳性,阳性率为(92.3±4.1)%。提示应用preplate法和有限稀释技术可以分离得到小鼠来源肌源干细胞及其克隆集落。
- 丁维进唐乙宋艳玲苏志达李翠刘安堂胡霞江华
- 关键词：差速贴壁法克隆亚克隆
