周佳海
- 作品数：18 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海有机化学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 三种Bcl-2家族蛋白的表达、纯化及活性分析被引量：3
- 2010年
- Bcl-2家族蛋白(Bcl-xL、Bcl-2、Mcl-1等)是细胞凋亡、自吞噬等生命过程的重要调控因子,是近年来热门的抗肿瘤药物靶标。从文献报道的蛋白序列出发,克隆用于表达Bcl-2蛋白的人源Bcl-2/Bcl-xL嵌合基因以及用于表达Mcl-1蛋白的人源与鼠源Mcl-1嵌合基因,分别构建谷胱甘肽巯基转移酶(GST)和组氨酸标签融合基因的原核表达质粒,建立这些融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达及纯化方法,以及GST融合的Bcl-xL蛋白的表达纯化方法。通过基于荧光偏振原理的实验方法,测定表达纯化得到的目标蛋白与Bid BH3多肽的结合常数,所得结果与文献报道值接近,而且带有GST标签的融合蛋白与无标签蛋白的活性基本一致。这些成功表达纯化的目标蛋白可应用于以Bcl-2家族蛋白为靶标的小分子调控剂的体外筛选。
- 朱翠侠李勋李雯雯石志敏周佳海王任小
- 关键词：BCL-2家族蛋白纯化荧光偏振体外筛选
- SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用
- 本发明涉及SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用。具体而言，本申请涉及构建嵌合SecA蛋白、在细菌中共表达该嵌合SecA蛋白和SecB蛋白而增加secB基因缺失细菌分泌蛋白效率的方法、在secB基因缺失细菌中构建...
- 刁刘洋周佳海杨晟罗兰·佛洛德尔
- Rubisco的蛋白质工程研究
- 首先,分析构建了含有串联的聚球藻Rubisco大亚基基因和合成的烟草、小麦Rubisco小亚基基因的质,在大肠杆菌中实现了双基因的稳定、高水平的共表达.通过对杂化酶的稳定性、τ值以及其他各种动力学常数的测定,对由两种合成...
- 周佳海
- 关键词：基因重组突变体烟草RUBISCO
- 文献传递
- 1株产灵菌红素家族红色色素细菌的分离鉴定及其色素性质研究被引量：7
- 2017年
- 对分离自重庆酉阳喀斯特槽谷石漠化地区土壤的1株产红色色素的细菌进行了形态学、生理生化特性和16S rRNA序列鉴定,进一步对该色素的溶解性、抑菌性和稳定性行进了研究,测定了其最大紫外吸收波长;同时,采用硅胶色谱柱对色素进行了纯化,通过薄层层析、质谱和光谱扫描对色素成分进行分析。结果显示,该菌在30℃培养时,色素产量较高。该色素在无水乙醇中的溶解性优于其他有机溶剂,在530 nm处有最大紫外吸收峰;该红色素对大肠杆菌(Escherichia coli)及耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)无抑菌作用;对极端pH值较敏感,尤其是强碱性pH值。且其光和热稳定性良好,耐氧化能力较强,耐还原能力较弱;金属离子对该色素有不同程度的消色作用,Cu^(2+)的消色作用最明显。16S rRNA序列分析结果显示,该菌与多株黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的16S rRNA序列一致。质谱分析结果显示,该色素的分子质量为324.2,与灵菌红素的分子质量非常接近,但光谱扫描结果与其不一致。
- 李春燕牟希张媛陈瑶杨大成郑鹄志郑波周佳海蒋勇军谢建平
- 关键词：灵菌红素粘质沙雷氏菌色素RRNA
- 一种防水粘合材料的制备方法和应用
- 本发明公开了一种防水粘合剂的制备方法和应用，该防水粘合剂为重组制备的红巨藤壶TRX‑Mrcp‑20K蛋白溶液，所述TRX‑Mrcp20k蛋白的核酸和蛋白序列分别由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。其制备...
- 周佳海黄维雪张普娟程若晓
- 透性化细胞海藻糖合成酶的制备及其催化合成海藻糖的工艺优化被引量：1
- 2017年
- 笔者以麦芽糖为底物,开展经渗透细胞技术处理得到的透性化细胞海藻糖合成酶催化制备海藻糖的新工艺开发。首先,对比不同透性化试剂对异源表达海藻糖合成酶的大肠杆菌工程菌的透性化处理效果,发现使用硫酸粘杆菌素时海藻糖合成酶的催化转化率高达64.6%,是传统超声破碎的2.63倍;其次,通过参数优化获得硫酸粘杆菌素透性化处理的最佳条件,即:1.5 g/L的硫酸粘杆菌素在30℃下处理60 min,得到的海藻糖合成酶活性最高,为5 209 U/mL;最后,利用透性化处理后的大肠杆菌工程菌进行全细胞催化制备海藻糖工艺研究,结果表明:以质量分数25%的麦芽糖为底物,在pH 7.5、30℃条件下,获得海藻糖的转化率为65.6%;进一步通过离心收集细胞进行反复催化试验,在20批次之后,转化率仍维持在62.5%,显示了良好的应用前景。
- 刘念高振赵倩如王凯峰郭玉欣江凌周佳海
- 关键词：海藻糖硫酸粘杆菌素全细胞催化
- 琼胶酶AgaB的结构与催化机制研究
- ＜正＞随着科技的发展,海洋资源越来越多的被人们开发并加以利用。琼胶作为海藻工业的三大多糖之一,与它的降解产物琼寡糖已被广泛应用于食品,医药,生物技术等领域。而降解琼胶最有效的方式是采用琼胶酶酶解。琼脂糖结构琼胶酶AgaB...
- 任艾明周佳海
- 文献传递
- 一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序被引量：5
- 2000年
- 介绍了一个简便的DNA改组操作程序 .首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的 170 0bp左右的基因片段 ,两者相比较同源性大于 93 % .然后将其等量混合后 ,在Mg2 +存在的条件下 ,用DNaseⅠ切割成 10～5 0bp的小片段 .这些小片段在不外加引物的前提下 ,利用PCR反应进行重聚 ,再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增 ,获得了与原来片段大小相当的基因片段 .
- 周佳海陈海宝
- 关键词：DNA改组定向进化
- SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用
- 本发明涉及SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用。具体而言，本申请涉及构建嵌合SecA蛋白、在细菌中共表达该嵌合SecA蛋白和SecB蛋白而增加secB基因缺失细菌分泌蛋白效率的方法、在secB基因缺失细菌中构建...
- 刁刘洋周佳海杨晟罗兰·佛洛德尔
- 文献传递
- 天然产物生物合成途径中的结构酶学研究
- <正>很多天然产物都是微生物的次级代谢产物,它们通过聚酮合酶、非核糖体聚肽合酶或者它们的嵌合形式进行生物合成得到。尽管次生代谢途径中天然产物的种类和构型千变万化,但是它们的生物合成途径都是由多个模块(识别单元、激活单元、...
- 周佳海
- 文献传递
