周伟
- 作品数:11 被引量:41H指数:2
- 供职机构:复旦大学化学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学医药卫生理学更多>>
- 拟青霉菌一种人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性
- 从拟青霉菌sp.229中分离纯化得到一种能将人参皂苷Rb1专一性转化为人参皂苷Rg3的β-葡萄糖苷酶。该酶的分子量约为305KDa,由三个分子量约为102KDa的相同亚基组成。在pH3.5和55℃酶具有最佳的反应活性,在...
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:人参皂苷RB1人参皂苷RG3Β-葡萄糖苷酶纯化
- 文献传递
- 一株新的重组人源过氧化氢酶基因工程菌的构建和遗传稳定性研究被引量:2
- 2011年
- 利用pPICZαA作为新的表达载体和表达宿主酵母Gs115,成功地构建了新的人源过氧化氢酶表达工程菌G13,并考察了新的工程菌G13的遗传稳定性。通过对新的重组菌整合质粒的酶切,PCR鉴定,及SDS-PAGE电泳、单抗dot-blot证实了该重组菌质粒构建正确,可以有效表达重组的人源过氧化氢酶。新的重组酵母菌G13在连续传代24次后,没有发生质粒的丢失现象,表达的过氧化氢酶活力稳定。
- 史训龙施志慧周伟叶丽朱海燕冯美卿周珮
- 关键词:毕氏酵母基因工程菌重组质粒
- 拟青霉菌一种人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性
- 从拟青霉菌 sp.229中分离纯化得到一种能将人参皂苷 Rb1专一性转化为人参皂苷 Rg3的β-葡萄糖苷酶.该酶的分子量约为305KDa,由三个分子量约为102KDa 的相同亚基组成.在 pH3.5和55 ℃酶具有最佳的...
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶纯化
- 文献传递
- 一种利用微晶纤维素分离纯化β葡糖苷酶的方法被引量:1
- 2008年
- β葡糖苷酶(EC3.2.1.21)存在于许多植物、昆虫、酵母、霉菌及细菌体内,它参与生物体的糖代谢,能够水解结合于底物末端的非还原性β-D-葡糖苷键,释放出β-D-葡萄糖和相应的配基。在医药工业中,利用β葡糖苷酶的这种生物转化功能,可将某些广泛存在的天然产物转化为在自然界稀有甚至不存在的药物。
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:葡糖苷酶微晶纤维素分离纯化生物转化D-葡萄糖医药工业
- 2-(4-噻唑甲酰胺基)丙烯酰胺的合成
- 2016年
- 那西肽是含硫多肽类抗生素家族中的成员,具有多种药理活性.通过计算机辅助设计发现那西肽的边链:2-(4-噻唑甲酰胺基)丙烯酰胺是主要的活性中心.介绍了一种合成2-(4-噻唑甲酰胺基)丙烯酰胺的方法.以DL-丝氨酸为起始原料,经甲酯化、缩合、消除和氨解合成目标产物,收率分别达到97%、65%、70%和53%.该方法的建立为以后进行那西肽相关活性片段的结构修饰提供了原料合成方法.
- 魏雪娇刘晓会张魁礼周伟周珮
- 关键词:那西肽
- 反相高效液相色谱法测定人参皂甙Compound-K的含量被引量:12
- 2005年
- 人参皂甙compoundK(CK)在人参中的含量极低,但它是其他含量较高的人参皂甙Rb1和Rb2等在人体肠道内的主要降解产物和最终吸收形式,具有很高的生物活性。采用反相高效液相色谱法测定了人参总皂甙发酵液中CK的含量。色谱条件为:反相C18柱;乙腈水(体积比为48∶52)溶液为流动相,流速1.0mL/min;紫外检测波长203nm;柱温35℃;外标法定量。结果表明:CK的质量浓度为0.05~0.8g/L时,其峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9998。方法的检测限(S/N=3)为2.5mg/L,峰面积测定值的相对标准偏差(n=6)为2.20%。测定栽培人参总皂甙及三七茎叶总皂甙微生物发酵液中CK的平均加标回收率(n=3)分别为98.6%和99.7%。该方法快速简便,准确可靠,可用于CK的制备研究及药物开发。
- 周伟罗振时周珮
- 关键词:高效液相色谱法人参
- D-氨基酸氧化酶在毕赤酵母中的表达及快速纯化被引量:2
- 2006年
- 目的建立简便、快速纯化D-氨基酸氧化酶(DAAO)的新方法,以利用高纯度的DAAO转化头孢菌素C制备戊二酰-7-氨基头孢霉烷酸(GL-7ACA)。方法通过基因工程手段,构建N端和C端各镶嵌6个组氨酸的DAAO重组质粒,电转化Pichia pastoris GS115电感受态细胞,利用PCR方法筛选阳性转化子,再经甲醇诱导筛选出高表达菌。结果高表达重组菌(PHD12)摇瓶发酵单位达到2 000 IU/L,发酵罐内达到22 500 IU/L。并利用Ni螯合型树脂对表达的DAAO经一步分离纯化,以60%的总收率获得纯化产物。纯化产物保持良好的转化CPC-Na活性。结论利用基因工程表达组氨酸标记蛋白,可简化基因工程的下游工序。
- 冯美卿史训龙孙传文周伟周珮
- 关键词:D-氨基酸氧化酶毕赤酵母快速纯化
- 重组人源过氧化氢酶表达优化和纯化研究
- 2011年
- 研究了重组表达人源过氧化氢酶酵母菌株G13的发酵工艺和纯化方法。对接种量、生长期培养基、生长时间、诱导时间等因素进行了优化,并确立了10 L发酵罐的发酵条件。结果表明,菌体最高密度达到了0.15g/mL,比原重组菌株S4提高了1倍,人源过氧化氢酶表达量也由原来的平均600 U/mL提高到了1500U/mL。同时建立了二步法纯化该酶工艺,获得了电泳纯的人源过氧化氢酶。所得到的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,证实产物为人源过氧化氢酶。
- 史训龙施志慧周伟叶丽朱海燕冯美卿周珮
- 关键词:毕氏酵母纯化
- 主客体化学应用于药物拮抗剂设计研究
- 2023年
- 很多药物在体内残留导致毒副作用.基于残留药物在血液内循环的特征,设计分子、大分子和超分子主体,利用主客体化学原理络合和捕集血液内的残留药物,降低其游离浓度,加速其通过肾脏排泄,实现拮抗和消除这些残留药物毒副作用的目的,是近年来主客体化学研究的重要方向,也是功能超分子体系研究的重要应用出口.本文总结了近年来利用环糊精、杯芳烃、柱芳烃及其类似物、葫芦脲和开环葫芦脲、超分子有机框架和柔性有机框等设计残留药物拮抗剂方面取得的进展,讨论了针对残留药物开展主客体化学的一般原则和识别特征,最后提出了推进针对药物拮抗的主客体体系进一步走向临床前研究需要考虑和解决的挑战.
- 余尚博周伟田佳马达张丹维黎占亭
- 关键词:主客体化学药物残留拮抗大环化合物分子识别
- 稀有人参皂苷compoundK研究进展被引量:23
- 2007年
- 人参皂苷compound K是二醇型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物和最终吸收形式。近年来,由于其各种出色的生物活性和作用,对该化合物的研究越来越受到重视。本文对人参皂苷compound K的制备、生物活性、吸收及代谢等研究进行了详细综述。
- 周伟周珮
- 关键词:生物活性代谢