吴瑞婷
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2013年
- 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IBV M蛋白单克隆抗体。对制备的单抗进行单抗亚型、腹水ELISA效价、特异性、交叉反应性鉴定及Western blot分析。结果获得2株能稳定分泌抗IBV M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2C10和7H6,单抗亚型分别为IgM和IgG1;腹水ELISA效价分别为1∶25 600和1∶12 800;2株单抗均只与IBV发生特异性反应,而与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型、AIV H5抗原和鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)均不反应;2株单抗与5种基因型的其他10株IBV均有良好的反应性。结论制备出2株针对IBV M蛋白的单抗,为今后更深入地研究该蛋白的分子生物学功能、抗原表位的鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立等提供了有力的工具。
- 王富妍任雅邹年莉郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 台湾基因Ⅰ型鸡传染性支气管炎病毒SCTW株的分离鉴定及致病性研究被引量：1
- 2013年
- 为分离鉴定鸡传染性支气管炎病毒(IBV)及其致病性,本研究通过病料鸡胚接种和鸡胚尿囊液的RT-PCR检测,从四川某养鸡场的发病鸡群中分离出一株IBV。其S1基因测序分析表明,该病毒分离株属于台湾基因Ⅰ型(TWⅠ)IBV,命名为SCTW株,这是中国大陆地区首次分离的TWⅠ型IBV。将该分离株与禽源致病性大肠杆菌(E.coli)分别或混合感染15日龄白羽肉鸡以鉴定其致病性,结果显示:SCTW分离株具有较强的致病性;而且E.coli的混合感染可明显增加SCTW的发病率和病死率,使其组织病理变化更加严重。因此,加强IBV的流行病学调查,做好E.coli的防治,对鸡传染性支气管炎(IB)的防制有重要的意义。
- 郭明萍王富妍吴瑞婷邹年莉赵扬黄勇
- 关键词：鸡传染性支气管炎禽源大肠杆菌
- 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)S1蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法用差速离心纯化的IBV四川分离株Sczy3免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。利用IBV鼠高免血清建立间接ELISA,筛选杂交瘤细胞。强阳性孔经有限稀释法亚克隆,获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备腹水。用鼠单克隆抗体亚型鉴定试剂盒鉴定单抗的亚型,Western blot法分析单抗的反应原性,ELISA法分析单抗的特异性及其与不同IBV毒株的交叉反应性。结果经连续4次亚克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗IBV Sczy3株单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C8C1和2C10E7,其腹水效价分别为1∶12 800和1∶25 600。2株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgM亚型;均可特异性识别S1蛋白;2株单抗只与IBV发生特异性反应,与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型和AIV H5抗原均不反应,与其他5种基因型的10株IBV毒株均可产生交叉反应。结论成功制备了2株IBV S1蛋白单克隆抗体,为IBV的检测、抗原表位筛选及致病机理的研究等提供了材料。
- 邹年莉王富妍段真真郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体
- 鸡传染性支气管炎病毒Sczy3株的致弱及其免疫效力的评价
- 鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病，是危害养禽业的主要传染病之一。其血清型众多，且不同血清型之间的交叉反应小甚至不存在交叉反应，而且现有的商品化疫苗对流行毒株无法...
- 吴瑞婷
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒流行毒株免疫保护弱毒疫苗
- 文献传递
- 1株鸽源鸡杆菌复合群3的分离和鉴定被引量：5
- 2014年
- 报道我国鸽场中鸡杆菌的感染情况.四川某种鸽场的种鸽出现以消瘦、呼吸困难、气管和肺出血、腹膜炎、输卵管炎等为主要特征的疾病.选取代表性病例,进行细菌分离和病毒检测,并对分离菌进行形态学观察、生化鉴定、动物试验、药敏试验和16S rRNA 基因序列分析.结果显示,部分病鸽只检测到新城疫病毒；从肝、肺中分离到1株革兰阴性短杆菌,命名为 SC01,该菌株为致病菌,小鼠半数致死量（LD50）为1.26＆#215;109 CFU/mL,能发酵多数糖和醇类,对头孢类药物较敏感.将 SC01与 GenBank 中同源性较近的15株细菌的16S rRNA 基因序列进行同源性分析,发现 SC01株与4株鸡杆菌复合群3（Gallibacterium genomo sp.3）的同源性为98.5%~99.5%,其中与EU423996的同源性最高,为99.5%,证实该菌株为鸡杆菌复合群3.试验结果为鸡杆菌复合群3感染的流行病学调查、诊断与治疗提供了新的参考.
- 杨晓林陈英余松城邹年莉吴瑞婷夏静牛婷王富妍黄勇
- 关键词：RRNA动物试验
- 2011年～2012年四川地区J亚型禽白血病分子流行病学调查被引量：4
- 2014年
- 为了解2011年～2012年四川地区J亚型禽白血病病毒（ALV-J）流行情况及流行病毒株的分子特征,本研究采集四川地区疑似禽白血病的病料样品784份（血液样品700份,组织样品84份）进行PCR检测,并对部分样品的gp85基因进行序列测定和分析.血液样品和组织样品ALV-J检出率分别为3.1％ （22/700）和14.3％（12/84）.核苷酸序列比对结果表明,18个阳性样品的gp85基因核苷酸同源性为87.7％～99.8％,与ALV-J株HPRS-103的核苷酸同源性为87.3％～98.2％,与以前分离的J亚群四川株SCGS-1的核苷酸序列同源性为87.9％～94.4％.遗传进化分析表明,18个样品分别属于不同的分支,其中来自石棉的样品SM与其他样品的遗传距离最远.该调查结果显示四川地区鸡场的ALV-J感染比较普遍,其gp85基因存在明显的遗传多样性,引种是导致这种遗传多样性的重要原因.
- 余松城任雅牛婷夏静吴瑞婷杨晓林易林邹年莉黄勇
- 关键词：GP85基因分子流行病学
- 含鸡源启动子的真核表达载体的构建及IBV S1蛋白抗原表位的表达
- 2015年
- 利用PCR方法扩增出鸡β-肌动蛋白(β-actin)启动子基因序列,克隆至pcDNA3.1和pCIneo载体中以替代CMV启动子,获得含鸡源启动子的真核表达载体pcDNA-act和pCIneo-act。将IBV ZY3S1蛋白抗原表位基因亚克隆到启动子替换前后的质粒中,然后将重组质粒转染至鸡胚成纤维细胞(CEF)中,采用间接免疫荧光试验检测转染细胞对S1蛋白抗原表位的表达。将重组质粒以150μg/只的剂量肌注免疫SPF雏鸡,同时设立IBV灭活疫苗组及PBS空白对照组,经间接ELISA检测免疫前后血清中IBV特异性抗体,最后使用ZY3强毒株给各组实验动物攻毒,观察鸡群的发病死亡情况,计算攻毒保护率。结果显示,替换启动子后的表达载体在CEF中对S1蛋白抗原表位的表达量以及实验动物的抗IBV抗体水平均高于未更换启动子的相应载体,攻毒后鸡群的发病率和死亡率均比替换前降低,说明外源基因的表达和启动子的来源有密切的关系。
- 牛婷余松城邹年莉吴瑞婷杨晓林夏静黄勇
- 关键词：Β-ACTINS1蛋白抗原表位
