吕茂杰
- 作品数：18 被引量：51H指数：5
- 供职机构：瑞普(保定)生物药业有限公司更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省博士后基金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合域的分析被引量：5
- 2009年
- 以猪流行性腹泻病毒(PEDV)可溶性的猪氨基肽酶N受体为靶蛋白对PEDV S1基因特异性肽库进行3轮生物淘选,然后对30个淘选的噬菌体克隆进行测序。序列分析发现,2个噬菌体克隆展示无义氨基酸序列,其余28个噬菌体克隆展示的氨基酸序列位于PEDV S蛋白的第249-529位氨基酸区域,这个区域被命名为MRR。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对MRR基因进行真核表达。Western blot结果表明,表达的MRR重组蛋白能够与兔抗PEDV多克隆抗体反应。
- 孙东波陈建飞时洪艳申识川吕茂杰范秀萍陈洪岩冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白
- 一种制备猪瘟活疫苗的方法
- 一种制备猪瘟活疫苗的方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：a.细胞接种；b.制苗用细胞培养；c.病毒接种；d.病毒培养与收获；e.疫苗制备。本发明对制苗用细胞进行了筛选，加强了细胞与病毒的适应性；采用激流灌注式生...
- 李倬刘涛郑朝朝郁宏伟李建丽杨保收梁武吕茂杰邱贞娜柳珊
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：10
- 2008年
- 以纯化的重组PEDV N蛋白为抗原免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了7株稳定分泌抗重组N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为9C1、7H8、3C10、6C4、10G9、2C10和4B3。7株杂交瘤细胞诱导小鼠产生的腹水抗体效价分别为1∶3 200、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800、1∶25 600、1∶64 00和1∶12 800。9C1、7H8、3C10、6C4、10G9和2C10免疫球蛋白类型均为IgM,轻链均为κ链;4B3免疫球蛋白类型为IgG2a,轻链为κ链。Western blot试验结果显示,这7株单克隆抗体均能与天然的PEDV N蛋白发生反应。
- 冯力孙东波陈建飞时洪艳吴波平崔晓辰吕茂杰刘娣童光志
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体
- 猪流行性腹泻病毒抗体ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2018年
- 为检测猪血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体水平,以纯化的PEDV作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立了检测PEDV血清IgG抗体的诊断方法:当血清OD_(450nm)值>0.31时,判定阳性;当OD_(450nm)值小于0.26时,判定阴性;当OD_(450nm)值介于两者之间判定可疑。结果表明,试验建立的ELISA抗体检测方法可用于检测猪血清中猪流行腹泻病毒抗体、监测猪流行腹泻病的流行情况和评价相关疫苗的免疫效果。
- 赵玉龙石勇石勇吴雅清刘涛朱秀同吴雅清马明吕茂杰
- 关键词：猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒ELISA
- 一种猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗的制备方法
- 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗的制备方法。本发明的一种冻干保护剂，包括质量百分比如下组分组成：蔗糖，卡波姆，PEG8000，丙氨酸，L‑半胱氨酸，硫酸锌，酶解明胶，余量为水。本发明的一种猪传染性胃...
- 何平有赵玉龙刘涛吴亚婷焦玉兰朱秀同郁宏伟吕茂杰柳珊
- 文献传递
- 一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检测方法
- 一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检测方法，它包括6个步骤：细胞的铺板及培养、病毒的梯度稀释、病毒沉降剂的添加、病毒的接种及培养、免疫荧光检测和统计特异荧光孔的数目，并计算猪瘟病毒滴度。本发明为一种可精确评价猪瘟兔化弱毒活疫苗效...
- 李倬梁武李守军郁宏伟刘涛柳珊杨保收朱秀同李建丽吕茂杰郑朝朝
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒蛋白对Vero E6核蛋白B23.1的影响被引量：1
- 2012年
- 为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)核蛋白N对Vero E6细胞核仁蛋白B23.1的影响,将本实验室构建的DsRed-N1/B23.1重组质粒转染Vero E6细胞,转染6h后接种PEDV,分别在转染后12、18h和24h三个时间点,进行病毒感染细胞的间接免疫试验,同时设未感染对照组,而后利用激光共聚焦显微镜分析感染和转染细胞中B23.1蛋白的变化。结果表明,PEDV N蛋白与Vero E6核蛋白B23.1有共定位特征,在PEDV感染Vero E6细胞12h后,B23.1蛋白开始发生变化,随着时间的延长逐渐碎裂、分散。这个结果提示,病毒可能通过破坏核仁的结构和核仁蛋白的功能,进而为病毒的复制提供便利。
- 石达吕茂杰陈建飞时红艳张志榜冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白
- 猪乙型脑炎的诊断与防治
- 乙型脑炎(Japanese Encephalitis,JE),由乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)引起的流行性乙型脑炎,简称乙脑,是一种人与动物共患的蚊媒病毒性疾病。日本脑炎病...
- 吕茂杰郁宏伟韩佳丽梁武杨保收
- 文献传递
- 一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检测方法
- 一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检测方法，它包括6个步骤：细胞的铺板及培养、病毒的梯度稀释、病毒沉降剂的添加、病毒的接种及培养、免疫荧光检测和统计特异荧光孔的数目，并计算猪瘟病毒滴度。本发明为一种可精确评价猪瘟兔化弱毒活疫苗效...
- 李倬梁武李守军郁宏伟刘涛柳珊杨保收朱秀同李建丽吕茂杰郑朝朝
- 文献传递
- Vero E6细胞中B23.1基因的扩增及其原核表达
- 2012年
- 应用RT-PCR技术,利用含有酶切位点的上、下游引物扩增得到Vero E6细胞中编码B23.1蛋白的基因片段,并进行序列测定及分析,结果表明,B23.1基因含有一个长901bp的开放阅读框(ORF),未发现碱基的插入和缺失。将其进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,而后定向克隆到经相同双酶切的pGEX-6p-1载体中,构建的重组质粒命名为pGEX-6p-B23.1;将该质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达;SDS-PAGE结果表明,表达出与预期大小相符的约68ku的重组蛋白,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting分析结果表明,表达的重组蛋白与B23蛋白单克隆抗体有很好的反应活性。
- 吕茂杰陈建飞时洪艳冯力
- 关键词：重组蛋白反应活性
