吕欣
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- PHF10融合蛋白表达、抗体制备及其在胃癌中的表达的检测
- 2010年
- 目的:制备PHF10多克隆抗体,并检测胃癌细胞系和胃黏膜永生化细胞株GES-1中PHF10表达谱。方法:在大肠杆菌BL21中表达GST标签标记的PHF10融合蛋白,以纯化的PHF10重组融合蛋白为抗原制备兔PHF10多抗血清。进一步利用亲和纯化方法制备PHF10多克隆抗体;为确定PHF10抗体的特异性,通过Western blot检测瞬时表达的Flag-PHF10融合蛋白,同时以抗Flag单克隆抗体(mAb)作为对照;利用制备的抗体通过Western blot检测PHF10在GES-1和各种胃癌细胞系中的表达。结果:与PHF10特异性结合的抗体能够通过免疫法获得;利用制备的抗体检测到PHF10在各胃癌细胞系与GES-1之间表达差异有统计学意义。结论:获得了特异性抗PHF10抗体,用该抗体可以检测到胃癌细胞系中PHF10的表达,可能是一个新的肿瘤靶标。
- 魏敏刘家云吕欣聂辉刘炳亚朱正纲杨忠印顾琴龙
- 关键词:抗体胃癌
- PHF10磷酸化多克隆抗体的制备与其在胃癌细胞PHF10磷酸化水平检测中的应用被引量:1
- 2011年
- 目的 制备PHD指蛋白 10(PHF10)磷酸化多克隆抗体并用于PHF10蛋白的研究,探讨其在胃癌发生发展中的作用与机制.方法 结构预测后应用固相法合成磷酸化多肽.应用磷酸化多肽免疫家兔得到多克隆抗体,并利用Dotblot方法进行此抗体特异性效价的鉴定,结果显示PHF10最低阳性检测浓度为7.8μg/L.利用PHF10磷酸化多抗对8株胃癌细胞和胃黏膜永生化细胞PHF10蛋白磷酸化水平进行检测,胃癌细胞株PH F10磷酸化水平明显高于胃黏膜永生化细胞GES-1.结果 制备出的PHF10蛋白磷酸化多克隆抗体效价较高,可用于磷酸化PHF10蛋白的鉴定.结论 此多克隆抗体可用于PHF10蛋白的研究.
- 吕欣魏敏朱正纲刘炳亚顾琴龙
- 关键词:多克隆抗体磷酸化胃癌