吕坤
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:蚌埠医学院更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 4-1BB配体在肿瘤细胞株上的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系被引量:3
- 2007年
- 目的检测4-1BBL在肿瘤细胞株上的表达及其功能。方法半定量RT-PCR检测几种肿瘤细胞株内4-1BBL mRNA表达;流式细胞术检测肿瘤细胞表面4-1BBL蛋白的表达;MTT法检测4-1BBLmAb对肿瘤细胞增殖的影响。结果4- 1BBL在Raji和THP-1细胞株表面表达率分别为26.8%和15.3%,而在T1301和Jurkat细胞株中,4-1BBL mRNA水平虽有一定表达,但蛋白水平却几乎不表达;4-1BBLmAb可以促进肿瘤细胞的增殖。结论4-1BBL在不同肿瘤细胞株上的表达有差异;4-1BBL在肿瘤细胞的增殖和长期存活中发挥重要作用。
- 刘琦吕坤葛晓松吴俊英
- 关键词:肿瘤细胞4-1BB配体增殖
- 4-1BB/4-1BBL在肿瘤免疫治疗中的作用被引量:1
- 2007年
- 吕坤吴俊英
- 关键词:免疫疗法4-1BB4-1BBL
- 人4-1BB配体基因真核表达载体的构建、表达及其体外抗肿瘤效应被引量:7
- 2007年
- 目的:构建人4-1BB配体(h4-1BBL)全长基因的真核表达载体,并在肿瘤细胞HT-29中转染表达;探讨人4-1BBL基因转染的肿瘤细胞体外诱导的抗肿瘤活性。方法:用RT-PCR从Raji细胞中克隆h4-1BBL全长基因,测序后,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-h4-1BBL。通过脂质体法以重组载体转染HT-29细胞,用RT-PCR检测转染细胞中h4-1BBLmRNA的表达;用流式细胞术检测转染细胞表面h4-1BBL分子的表达。分离外周血单个核细胞(PBMC),用抗CD3mAb扩增T细胞,并与h4-1BBL基因转染及未转染的HT-29细胞混合培养。用MTT比色法检测CTL的增殖及杀伤活性;用流式细胞术检测分泌IFN-γ的T细胞。结果:从Raji细胞中克隆到h4-1BBL全长cDNA,测序完全正确。构建的h4-1BBL基因真核表达载体在HT-29中获得稳定表达。与未转染的细胞相比较,h4-1BBL基因转染的肿瘤细胞HT-29能更有效地刺激T细胞活化、增殖,促进IFN-γ分泌,并能有效地诱导CTL产生针对野生型HT-29细胞的特异性杀伤。结论:成功地构建pcDNA3.1(-)h4-1BBL重组真核表达载体。4-1BBL基因转染的肿瘤细胞介导的协同刺激信号,能增强野生型肿瘤细胞的免疫原性,诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答。
- 吕坤吴俊英李柏青
- 关键词:基因转染抗肿瘤免疫应答