叶霁
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省高等学校优秀青年人才基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 四种维生素对杜氏盐藻生长的影响被引量：13
- 2008年
- 汪本凡唐欣昀赵良侠曹媛媛甘旭华叶霁
- 关键词：杜氏盐藻维生素B1维生素B6维生素B12维生素H
- 钝顶螺旋藻表达载体p215 t-spp的构建及转化被引量：1
- 2009年
- 用合适的限制性内切酶消化载体p215 t,胶回收获得含有gfp基因及amp基因大片段。设计引物,采用PCR扩增无菌钝顶螺旋藻A9藻株的强启动子片段;在T4连接酶的作用下进行体外连接重组,构建了带有螺旋藻启动子和gfp报告基因的新型表达载体p215 t-spp。将该载体转入钝顶螺旋藻,利用报告基因的表达,在荧光显微镜下观察并记录转化藻细胞,p215 t-spp质粒显著提高转化率。研究了不同PEG浓度、转化时间及冰浴处理对转化率的影响。采用1%PEG能有效促进细胞吸收DNA,获得10.5‰的转化率。实验初步证明,带有螺旋藻启动子的报告基因gfp能够在钝顶螺旋藻中顺利表达。
- 王芬叶霁曹媛媛张海生甘旭华唐欣昀
- 关键词：钝顶螺旋藻启动子GFP基因转化率
- 微藻无菌化技术的研究进展被引量：15
- 2007年
- 无菌纯藻是深入开展藻类生理学和遗传学研究的基础。目前已有涂布划线法,离心洗涤技术、稀释滤过技术、辐照技术、毛细吸管技术、抗生素技术、化学消毒技术、利用其他生理特性等技术用于微藻的纯化。拟介绍国内外近年来微藻无菌纯化技术的研究进展。
- 汪本凡赵良侠叶霁甘旭华唐欣昀
- 关键词：微藻
- 甘油对杜氏盐藻电击转化的影响被引量：1
- 2007年
- 通过在HEPES电击缓冲液中添加不同浓度的甘油,讨论了甘油对电转前细胞存活率的影响;通过在盐藻培养基中添加不同浓度的甘油,讨论了甘油对盐藻细胞生长的影响;使用含有不同浓度甘油的HEPES缓冲液介导质粒载体转入盐藻细胞,比较了甘油对于转化率的影响。实验结果表明,在电击缓冲液中添加0.5mol/L甘油能有效提高细胞存活率,促进转化细胞恢复生长,从而获得最佳转化效果。因此,0.5mol/L甘油可作为杜氏盐藻电击转化过程中一种良好的稳渗剂。
- 叶霁唐欣昀
- 关键词：杜氏盐藻甘油电击转化
- 3种钝顶螺旋藻株胞内核酸酶活性效果研究被引量：1
- 2009年
- 取钝顶螺旋藻A9、抗刀豆氨酸（CS）突变株A9c、藻体长直型A9L的无菌纯藻藻株胞内核酸酶粗提取液，分别对入-DNA或p8760进行酶切消化后研究酶活。对于A9藻株，p8760更适于作为酶切底物进行酶活研究；酶切最适反应温度为37～45℃，酶切最适反应时间为3h，50℃开始酶活被抑制；A9e藻株酶切最适反应温度为37℃，酶切最适反应时间为3～4h，45℃开始酶活被抑制；A9L藻株，λ-DNA更适于作为酶切底物进行酶活研究，酶切最适反应温度为37—55℃，酶切最适反应时间为2—3h，60℃开始酶活被抑制。对此3种无菌藻株胞内核酸酶活性效果的初步研究表明，藻株形态的变异或抗氨基酸类似物突变，都会影响和改变其胞内核酸酶的活性，这些可为控制胞内核酸酶对螺旋藻转基因操作的影响和选择合适的藻株用于螺旋藻的遗传转化奠定一定的基础。
- 胡晓倩唐欣昀甘旭华曹媛媛叶霁
- 关键词：钝顶螺旋藻酶活
- 绿色荧光蛋白gfp基因在钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)A9藻株中的表达被引量：3
- 2008年
- 将钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)A9藻株在24℃培养,经2 mmol/L的EDTA预处理24 h;采用功率300 W的超声波处理70 s获得单细胞样品,以本实验室构建的携带gfp基因的质粒p215t转化A9藻株单细胞藻液,利用Amp作为选择标记,使单细胞在平板上再生长出单藻落,获得17株具有Amp抗性的转化藻株,转化率3.73‰。在390 nm紫光激发下,生长30天的转化藻丝体发出稳定绿色荧光;培养45天后具有绿色荧光的藻丝出现断裂、具有荧光藻丝长度缩短的现象。实验结果初步表明:报告基因gfp在螺旋藻中得到稳定有效的表达,可以采用单细胞再生形成单藻落技术进行螺旋藻的基因克隆。
- 张海生叶霁唐欣昀王芬曹媛媛张明
- 关键词：钝顶螺旋藻GFP基因绿色荧光
- 杜氏盐藻GFP表达载体的构建及电转化
- 本实验扩增了RR-gfp和gfp片段,并分别与含有盐藻强启动子的载体连接,构建了2种带有gfp报告基因的新型质粒表达载体p215t和p115t,质粒酶切电泳结果从分子水平证明载体构建成功。质粒载体转化Escherichi...
- 叶霁
- 关键词：质粒载体电击转化
- 文献传递
