叶琳洁
- 作品数：7 被引量：11H指数：1
- 供职机构：西北工业大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
- 2014年
- 目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。
- 叶琳洁黄庆生李琦张明杰马旭东杨慧师俊玲
- 关键词：细胞毒活性体外扩增活化性受体抑制性受体
- 人降钙素原重组表达、单、多克隆抗体的制备及ELISA检测方法
- 本发明公开了一种人降钙素原重组表达、单、多克隆抗体的制备及ELISA检测方法，包括以下步骤：(1)引物合成；(2)目的基因的重组表达及鉴定；(3)抗体制备及鉴定。本发明通过设计4条引物应用PCR扩增特定PCT该片段，构建...
- 杨慧黄庆生唐蕊华李晶车速李冀刘亚雄叶琳洁邵燕师俊玲
- 文献传递
- 细菌青霉素结合蛋白被引量：11
- 2013年
- 青霉素结合蛋白(penicillin binding protein,PBP)是一类在细菌细胞壁肽聚糖生物合成过程中起重要作用的酶类。在聚合过程中,它主要发挥糖基转移酶、肽基转移酶和D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶(D,D-羧肽酶)活性。PBP数量和结构的改变是导致细菌产生β-内酰胺类抗生素耐药性的重要原因之一。本文对青霉素结合蛋白的分类命名、结构功能、耐药机制等方面进行了综述。
- 李冀杨慧呼延霆叶琳洁车速李琦黄庆生尹大川
- 关键词：青霉素结合蛋白细菌耐药性Β-内酰胺类抗生素
- 失重条件下人NK细胞活化性受体的表达调控机制研究
- NK细胞(自然杀伤细胞,natural killer cell)足机体重要的免疫细胞,在抗肿瘤、抗病毒感染免疫中发挥重要作用.NK表面有许多活化性受体及抑制性受体,NK细胞的杀伤活性即受活化性和抑制性受体的调节.其中NK...
- 叶琳洁黄庆生
- 关键词：NK细胞模拟失重NKG2D
- 一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的原核表达及纯化方法
- 本发明公开了一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：(1)引物合成；(2)目的基因的扩增；(3)重组质粒的构建；(4)重组载体在大肠杆菌中的诱导表达；(5)重组蛋白的纯化。本发明...
- 杨慧李冀黄庆生师俊玲唐蕊华李晶车速刘亚雄叶琳洁邵燕
- 文献传递
- 响应重力负荷变化的抗肌萎缩表达载体构建
- 2012年
- 目的:为了验证‘肌肉生长抑制素’启动子(PM)对去负荷(失重)的响应能力,观察PM调控下的抗萎缩蛋白(mM)表达载体在肌细胞去负荷时的表达水平及抗萎缩活性。方法:首先,构建了PM调控下的荧光素酶表达载体(pGL3-PM-Luc),检测模拟失重下荧光素酶基因在肌细胞中的表达水平,验证PM对重力负荷变化的响应。随后,构建了PM调控下的mM表达载体‘pGL3-PM-mM’,观察模拟失重下mM在肌细胞中的表达及其对肌细胞增殖的影响。结果:模拟失重下,‘pGL3-PM-Luc’转染的肌细胞荧光素酶表达提高了29%,‘pGL3-PM-mM’载体转染的肌细胞,mM表达上调了2.6倍,细胞增殖活性提高了24%。结论:PM在失重条件下可开启下游基因的表达,依此特点构建的mM表达载体,其mM的表达能随负荷减少而增加,且可促进肌细胞的增殖活性。
- 车速黄庆生李琦叶琳洁杨慧
- 关键词：肌肉萎缩肌肉生长抑制素失重
- 体外扩增人自然杀伤细胞的抗肿瘤活性研究
- 目的 为了比较人外周血单个核细胞(PBMC)中NK细胞经体外扩增与活化前后的活性以及为了初步观察肿瘤患者NK细胞扩增后的应用效果。方法 首先,采集健康人PBMC,对其中的NK细胞进行扩增与活化。对扩增活化前后的NK细胞在...
- 叶琳洁黄庆生李琦张明杰杨慧师俊玲
