包福祥
- 作品数：20 被引量：8H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 用于检测猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体、制备方法及应用
- 本发明公开了一种用于检测猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体、制备方法及应用。本发明采用猪流行性腹泻病毒免疫阿拉善双峰驼，利用其外周血淋巴细胞建立针对猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体库,将表达纯化的猪流行性腹泻病毒S蛋白偶联在酶...
- 包福祥王莉鑫杜雅楠芦婷阿米娜赵鑫鑫关平原
- 文献传递
- 抗呼吸道合胞病毒融合蛋白单链抗体的筛选及初步鉴定
- 2009年
- 目的:从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗呼吸道合胞病毒F蛋白的单链抗体。方法:以RSV F蛋白为靶抗原,通过"吸附-洗涤-洗脱-扩增"过程从天然人源性噬菌体抗体库中筛选特异性抗F蛋白单链抗体。5轮筛选后,单克隆经ELISA检测,阳性克隆进行核酸序列分析,并将阳性克隆噬菌体感染E.coliHB2151,经IPTG诱导,制备抗RSV F蛋白的可溶性单链抗体,并进行Western blot及Dot blot分析。结果:经过筛选,获得了18株能与F蛋白特异性结合的阳性克隆,取OD值最高的克隆E4经测序并检索Kabat数据库分析,显示其基因与人免疫球蛋白可变区基因具有高度同源性,Western blot及Dot blot分析表明为单链抗体。结论:利用天然人源性噬菌体抗体库技术制备出高特异性的人源性抗RSV F蛋白单链抗体。
- 魏薇包福祥何金生付远辉王小波郑娴娴张莹
- 关键词：人呼吸道合胞病毒F蛋白噬菌体抗体库单链抗体
- 阿尔茨海默病的疫苗研究进展被引量：4
- 2009年
- 王鑫张莹何金生包福祥洪涛
- 关键词：阿尔茨海默病Β-淀粉样蛋白疫苗
- 抗人B淋巴细胞表面抗原CD20的单域抗体及其应用
- 本发明涉及抗人B淋巴细胞表面抗原CD20的单域抗体及其应用。公开了其VHH链的框架区FR和互补决定区CDR的氨基酸序列，同时还公布了编码该单域抗体的核苷酸序列以及能够表达该单域抗体的宿主细胞。此外，本发明还公开了一种含有...
- 包福祥刘艳龙敖可心付山郝彦霞程艺张慧敏张磊
- 一种抗大肠杆菌性腹泻病蒙兽药及其制备方法
- 本发明公开了一种抗大肠杆菌性腹泻病蒙兽药及其制备方法，该包括草乌叶、诃子、多叶棘豆、茜草、黑云香、甘松、大黄，上述7味药的质量比为2∶1∶1∶1∶1∶2∶2，本发明通过改善动物肠道菌群结构等，调节腹泻模型动物及靶动物的抗...
- 王纯洁高瑞娟敖日格乐刘佳乐田艳萍高钰思付鹤杭盖巴特尔包福祥徐进张琨任书男吕文亭高欣
- 文献传递
- 人源性天然抗体库的构建及淀粉样蛋白Aβ_(1-42)寡聚体单链抗体的筛选和鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在利用噬菌体展示技术构建人源性天然抗体库,以可溶性Aβ1-42寡聚体对抗体库进行筛选获得针对低分子量Aβ1-42寡聚体的特异性单链抗体。利用RT-PCR法从10个健康人外周血淋巴细胞中得到全套人抗体VH和VL基因,经过重叠延伸PCR将VH和VL连接得到scFv片段,将scFv片段酶切后克隆至pCANTAB5E噬菌体载体,电转化TG1感受态菌,获得库容为2.5×109单链抗体库。经辅助噬菌体M13K07拯救,以可溶性Aβ1-42寡聚体为抗原,对抗体库进行4轮筛选,ELISA法筛选特异性识别Aβ1-42寡聚体的阳性克隆,将筛选到的阳性克隆B19转化至E.coli HB2151菌,诱导表达可溶性scFv抗体。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示可溶性scFv抗体获得了正确表达,且能够与Aβ1-42三聚体及纤维特异性结合,亲和力(Kd)为9×10-6 mol/L。Aβ1-42寡聚体特异性单链抗体的获得为老年性痴呆(AD)的治疗研究奠定了基础。
- 包福祥何金生曹贵方尹凡王鑫庞思媛张莹洪涛
- 关键词：单链抗体老年性痴呆
- Aβ/_（1-42）寡聚体特异性scFv的筛选、鉴定和亲和力成熟的初步研究
- 老年性痴呆/(Alzheimer’s disease,AD/)是一种渐进性神经退行性疾病,其病理特征是渐进性的老年斑沉积,神经突触丢失和神经纤维缠结,临床表现为记忆功能衰减及识别能力障碍,同时伴有各种神经症状和行为障碍。...
- 包福祥
- 关键词：老年性痴呆单链抗体可溶性表达
- 文献传递
- EGFRvⅢ胞外区基因重组腺病毒的构建及单域抗体的制备
- 2022年
- 本研究旨在构建能够表达人表皮生长因子EGFRvⅢ胞外区基因的重组腺病毒,并通过免疫骆驼构建噬菌体单域抗体库,筛选和制备EGFRvⅢ胞外区特异性单域抗体并对其进行鉴定。从人前列腺癌细胞系PC-3细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增EGFRvⅢ胞外区基因,并连接pAdTrack-CMV质粒载体,转化含有pAdEasy-1的大肠杆菌(Escherichia coli)BJ5183感受态细胞,获得同源重组质粒转染HEK293A细胞,得到表达EGFRvⅢ胞外区蛋白的重组腺病毒。利用重组腺病毒免疫双峰驼,构建EGFRvⅢ胞外区特异性噬菌体单域抗体库,并以EGFRvⅢ蛋白为筛选抗原,对其进行筛选,对筛选得到的单域抗体进行诱导表达、纯化及鉴定。结果表明获得了表达EGFRvⅢ胞外区基因的重组腺病毒。构建得到的EGFRvⅢ特异性噬菌体单域抗体库的库容为1.4×109;经过3轮富集和筛选,通过噬菌体ELISA筛选出31个与EGFRvⅢ胞外区蛋白结合的阳性克隆,并对OD450值较高的重组单域抗体E14进行了表达和纯化。经ELISA鉴定,重组单域抗体E14可与EGFRvⅢ胞外区蛋白产生抗原抗体结合反应,具有较高的亲和力。说明制备的EGFRvⅢ特异性噬菌体单域抗体库具有较高的库容和多样性,且筛选得到的单域抗体具有较高的抗原活性和免疫学反应性,为今后以EGFRvⅢ为靶点的恶性肿瘤的诊断和治疗提供新的实验依据。
- 张慧敏徐嘉奇程艺付山刘艳龙胡宇靖杜雅楠包福祥
- 关键词：重组腺病毒单域抗体抗体库
- 用于检测牛CRP蛋白的重组单链抗体及其应用
- 本发明涉及用于检测牛CRP蛋白的重组单链抗体及其应用。用于检测牛CRP蛋白的重组单链抗体包括C2抗体和/或C5抗体，C2抗体、C5抗体均分别包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，VH和VL通过柔性连接肽(G<Sub...
- 包福祥吴玘瑶王志蒋强付山刘艳龙程艺张慧敏
- 反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响
- 2009年
- [目的]探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1mRNA表达的影响。[方法]试验分为4组:I组,空白对照组;II组,脂质体组;III组(SCON),20μmol/L正义寡核苷酸组;IV组(ASCON),20μmol/L反义寡核苷酸组。上述各组均在培养24、36、48h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1mRNA表达情况的变化。[结果]VEGFmRNA在I、II组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长无明显变化;在III组VEGFmRNA表达略有降低,但与I和II组间无显著性差异(P>0.05);IV组(反义寡核苷酸组)的VEGFmRNA表达量显著下降(P<0.05),并且随着时间延长逐渐下降。VEGF受体FLT-1mR-NA的表达与VEGF相似。[结论]反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用。
- 姜丽萍祝啸先游存厚乌日古木拉王芳张文娟刘德斌杜晨光李海军包福祥赵鹏伟鲍庆江曹贵方
- 关键词：生长素受体寡核苷酸类反义
