刘焱
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医科大学口腔医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 大鼠下颌下腺细胞与柞蚕丝素蛋白膜体外复合培养的实验研究
- 2012年
- 目的:通过大鼠下颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSMGs)与柞蚕丝素蛋白(antheraea pernyi silkfibroin,ApSF)膜的体外共培养,探讨RSMGs在支架上的形态特征、黏附、增殖及分泌功能。方法:将柞蚕丝素蛋白膜、桑蚕丝素蛋白(bombyx mori silk fibroin,BmSF)膜分别接种SD大鼠的RSMGs进行共培养,并以24孔培养板单独培养的RSMGs作为阴性对照组。免疫细胞化学抗角蛋白抗体(cytokratin 8,CK8)、淀粉酶抗体(amylase)染色鉴定细胞来源;扫描电镜、荧光显微镜观察细胞支架复合生长情况;检测细胞在支架上的黏附率;MTT比色法检测材料上细胞的增殖能力;Amano法测定上清液中淀粉酶含量,检测细胞支架共培养后下颌下腺细胞的功能。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:免疫细胞化学染色观察共培养后的细胞,上皮细胞特异性抗体CK8染色阳性,腺泡上皮细胞特异性抗体Amylase染色阳性。扫描电镜可见,共培养后ApSF膜上细胞增殖活跃,表面呈现出微绒毛等超微结构,并向支架材料伸出伪足。荧光显微镜下可见,随着共培养时间的延长,支架上锚定的种子细胞数量增多,形态规则。2组支架接种细胞1 h后,RSMGs开始附着于支架上且黏附率差异不显著(P>0.05);4～12 h 2组黏附率逐渐增大,ApSF组较BmSF组更显著(P<0.05);24 h时,95%细胞黏附于2种材料上,2组差异不显著(P>0.05)。MTT提示,RSMGs与ApSF复合培养3、5 d后增殖迅速,第7天时达到峰值;ApSF组的细胞在第3、5和7天增殖速度与BmSF组差异显著(P<0.05),2组细胞增殖均与阴性对照组差异显著(P<0.05)。Amano法提示,随着接种后培养时间的延长,2组淀粉酶含量均有不同程度的增加;ApSF组在第3、5、7天时唾液淀粉酶浓度与BmSF组相比有显著差异(P<0.05),2组酶浓度均与阴性对照组差异显著(P<0.05)。结论:RSMGs与ApSF复合培养后,可保持细胞表型、增殖分化能力及分泌功能。ApSF对于RSMGs�
- 刘焱谭学新李波易新刘丽萍
- 关键词：下颌下腺
- 代谢型谷氨酸受体5拮抗剂(MPEP)在大鼠颞下颌关节疼痛中的作用和可能机制
- 2013年
- 目的探讨应用代谢型谷氨酸受体5拮抗剂(MPEP)后,福尔马林致颞下颌关节疼痛大鼠三叉神经节内降钙素基因相关肽(CGRP)的表达变化,为临床颞下颌关节疼痛治疗提供实验依据。方法 SD大鼠36只,随机均分为4组,正常对照组(不做任何处理),阴性对照组(右侧颞下颌关节内注射50μl生理盐水),甲醛组(右侧颞下颌关节内注射50μl5%formalin),MPEP(2-甲基-6苯基乙炔嘧啶)组[25μlMPEP(5mmol/L)+50μl5%formalin]。将5%甲醛注入右侧颞下颌关节腔内,诱导大鼠颞下颌关节疼痛。计数各组大鼠60min内伤害性行为反应(包括刮擦头面部及缩头)。并利用免疫组织化学方法检测三叉神经节内CGRP的蛋白定位与表达。结果甲醛组大鼠搔刮头面部及缩头反应持续时间明显高于正常对照组及阴性对照组(P<0.05),MPEP组搔刮头面部及缩头等伤害性行为反应明显低于甲醛组(P<0.05)。免疫组化结果显示甲醛组、MPEP组三叉神经节内CGRP免疫反应阳性物质与正常对照组比较显著增加(P<0.05),生理盐水组与正常组比较无统计学差异(P>0.05),MPEP组与甲醛组比较CGRP免疫反应阳性物质明显降低(P<0.05)。结论代谢型谷氨酸受体5拮抗剂减轻福尔马林引起的大鼠颞下颌关节疼痛可能与其下调三叉神经节内CGRP的表达水平相关。
- 李波卢利易新刘焱
- 关键词：疼痛颞下颌关节紊乱病降钙素基因相关肽
- 代谢型谷氨酸受体5在大鼠颞下颌关节疼痛中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨代谢型谷氨酸受体5在甲醛诱导大鼠颞下颌关节疼痛中的作用。方法 SD大鼠36只,随机均分为6组:正常对照组(不做任何处理)、生理盐水组(右侧颞下颌关节内注射50μL生理盐水)、甲醛组(右侧颞下颌关节内注射50μL5%甲醛)、MPEP-1组[25μL MPEP(1 mmoL/L)+50μL 5%甲醛]、MPEP-2组[25μL MPEP(2.5 mmoL/L)+50μL 5%甲醛]、MPEP-3组[25μL MPEP(5 mmoL/L)+50μL 5%甲醛]。将5%甲醛注入右侧颞下颌关节腔内,诱导大鼠颞下颌关节疼痛,计数各组大鼠60 min内伤害性行为反应(包括刮擦头面部及缩头),分光光度计测量颞下颌关节内Evan′s蓝结合血浆蛋白渗出量的变化。结果甲醛组大鼠搔刮头面部及缩头反应持续时间明显高于正常对照组及生理盐水组(P<0.05),MPEP-3组大鼠搔刮头面部及缩头等伤害性行为反应明显低于甲醛组,差异有统计学意义(P<0.05)。甲醛组颞下颌关节内Evan′s蓝结合血浆蛋白渗出量明显高于正常对照组及生理盐水组(P<0.001),MPEP-3组大鼠颞下颌关节内Evan′s蓝结合血浆蛋白渗出量明显低于甲醛组(P<0.05)。结论代谢型谷氨酸受体5介导甲醛诱导大鼠颞下颌关节痛,其拮抗剂能减轻甲醛引起的颞下颌关节疼痛。
- 李波卢利谭学新刘纯义易新刘焱
- 关键词：代谢型谷氨酸受体5疼痛颞下颌关节
- 四种显微技术观测大鼠颌下腺细胞与丝素-壳聚糖体外共培养的形态学特点
- 2012年
- 目的采用倒置显微镜、扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜((laser scanning confocal microscopy,LSCM))技术对大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSMGs)与丝素-壳聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCs)的体外复合培养进行形态学观察。为观测、评估种子细胞在三维支架的内部生长情况提供技术支持。方法取0～8 d龄SD大鼠的颌下腺,对大鼠颌下腺细胞进行原代培养、分离纯化并传代;用抗细胞角蛋白单克隆抗体(CK8)及淀粉酶抗体的免疫细胞化学染色鉴定细胞来源。选取传至第二代的对数生长期的RSMGs作为种子细胞,选取SFCs共混膜(5×5×2)mm作为支架材料构建组织工程化涎腺样结构。将种子细胞与支架材料复合培养并分别于倒置显微镜、SEM、荧光显微镜和LSCM下观察二者复合生长情况。结果倒置显微镜可以直接观察活细胞与支架复合生长情况,方法简单易行。SEM可以较精确的展示细胞支架复合生长的表面超微结构。经过荧光染料的着色,荧光显微镜和LSCM都可以观察到支架上锚定的种子细胞。荧光显微镜可见细胞核的荧光信号均匀的分布在支架孔隙内。LSCM通过层扫描及三维重建技术对较厚的标本获取图像;并可以通过旋转图像,从不同角度观察细胞支架复合物的三维剖面或整体结构,得到更为准确的定位信息。结论四种显微技术均可应用于RSMGs与SFCs体外共培养的形态学观测。LSCM的三维重建技术结合荧光染料标记可以较好地获得RSMGs与SFCs复合生长的情况,有着较广泛的应用价值。
- 刘焱谭学新李波易新矫贞涛何洋洋
- 关键词：颌下腺显微技术
- PBL模式在口腔解剖生理教学中的进一步应用——医学成人教育口腔解剖生理教学初探被引量：2
- 2012年
- 医学成人教育是高等医学教育的重要组成部分,担负着提高在职卫生技术人员的重要任务。本文针对成人教育特点,从改革教学内容,首次尝试PBL教学模式,转变教学效果考核方法等几个方面初步探讨成人口腔解剖生理教学的一些教学经验和教学方法。
- 李波卢利谭学新易新何洋洋刘焱
- 关键词：成人教育口腔医学
