刘成
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛛网膜下腔移植骨髓间充质干细胞对大鼠慢性神经病理性痛的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨蛛网膜下腔移植骨髓间充质干细胞（MSCs）对大鼠慢性神经病理性痛的影响。方法雌性SD大鼠140只，体重180～200g，采用坐骨神经分支选择损伤（SNI）法制备慢性神经病理性痛模型，术后2周，随机分为4组（n=35）：模型组（NP组）、MSCs组、PBS组和骨髓未贴壁单核细胞组（BNMCs组）。MSCs组、PBS组、BNMCs组蛛网膜下腔分别注射1×10 5／m的第3代MSCs悬液10ul、PBS10ul、1×10 5／ul的BNMCs悬液10ul。于术前、术后2周、移植后1、2、3、4、5周（T0-6）时测定机械痛阈。同时于T1～6时测定痛阈后随机选择5只大鼠取脊髓腰膨大组织，使用RT-PCR法测定脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA表达。结果与T0时比较，T1时各组机械痛阈降低，T2-6时NP组、PBS组、BNMCs组机械痛阈降低（P〈0．05）。与，T1时比较，MSCs组T2-6时机械痛阈升高，T2～4时BDNFmRNA表达上调（P〈0．05），PBS组和BNMCs组其余时点各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。与NP组比较，MSCs组机械痛阈升高，BDNFmRNA表达上调（P〈0．05），PBS组和BNMCs组各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论蛛网膜下腔移植MSCs可减轻大鼠慢性神经病理性痛，其机制可能与上调脊髓BDNFmRNA表达有关。
- 王萍田学愎罗婷刘成方岩杨凯田玉科
- 关键词：间质干细胞移植骨髓蛛网膜下腔神经痛
- 大鼠硫酸软骨素蛋白多糖基因shRNA慢病毒载体的构建及干扰效率鉴定
- 2011年
- 背景:最近研究发现硫酸软骨素蛋白多糖(NG2)在中枢神经系统中参与多种生理病理功能,慢病毒载体可感染分裂期细胞或非分裂期的细胞,并能在细胞内高效稳定的表达。目的:构建大鼠源性NG2基因shRNA慢病毒载体并检测其干扰效率。方法:选择大鼠NG2基因RNA干扰的靶序列,合成OligoDNA,退火形成双链DNA,与HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-RNAi载体连接产生pLV-NG2-RNAi,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将重组载体与pHelper1.0载体、pHelper2.0载体通过lipofectamineTM2000共转染293T细胞包装产生慢病毒LV-NG2-RNAi,收集病毒上清并浓缩。采用孔稀释滴度测定法计算病毒滴度。将LV-NG2-RNAi慢病毒感染C6细胞,于感染后96h提取细胞总蛋白,采用Westernblot检测NG2的表达。结果与结论:经PCR和测序证实构建片段大小及DNA序列与目的序列一致,实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体LV-NG2-RNAi。包装浓缩慢病毒的滴度为8×1011TU/L。Westernblot检测显示在感染复数为50时,感染LV-NG2-RNAi慢病毒的C6细胞较感染对照慢病毒及未感染细胞NG2的表达明显降低,干扰效率可达100%(P<0.05)。结果证实了实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体,且该载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。
- 王萍刘成方岩杨凯田学愎田玉科
- 关键词：硫酸软骨素蛋白多糖RNA干扰慢病毒细胞
- 携带磷脂酰肌醇激酶-3beta基因小干涉RNA的35型腺病毒载体的构建
- 2011年
- 目的构建磷脂酰肌醇激酶-3beta（P13Kcb）基因小干涉RNA（siRNA）的重组35型腺病毒载体（Ad5／F35）。方法在P13KebmRNA序列中选择1个特异性靶序列，体外合成对应发卡样DNA片段，经退火后，将其定向克隆入siRNA载体pDC316-EGFP—U6，获得重组质粒pDC316-P13KcbsiRNA—EGFP。骨架质粒pBHG—fiber5／35和穿梭质粒pDC316-P13KcbsiRNA—EGFP共转染293细胞，同源重组产生Ad5／F35．P13Kcb—siRNA。经聚合酶链反应（PCR）鉴定目的基因的表达。结果PCR表明Ad5／F35-P13Keb—siRNA质粒构建正确。结论获得的Ad5／F35-P13Keb—siRNA司以用于转基因疼痛治疗的实验研究。
- 戴少军杨少兵刘成李荣春项红兵
- 关键词：小干涉RNA腺病毒科
- 腺病毒介导的线粒体融合素基因-2感染促进大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及其信号通路研究
- 目的应用腺病毒介导的转基因技术,研究过表达线粒体融合素基因-2(Mitofusion-2,Mfn2)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(rVSMCs)凋亡的影响,并探讨其相关的信号通路,阐明其分子作用机制。方法体外培养rVSMC...
- 刘成陈光慧郭小梅
- 文献传递
- 脑网络神经核团新亚区的精准定位及其应用创新
- 项红兵陈明熊新高何志刚叶达伟蒋伟刘成田学愎周志强孙星星刘纯钢
- 脑部疾病和外周脏器功能性疾病(非器质性疾病)严重影响患者生存质量。挖掘脑网络重要核团中新型亚区神经环路的精准定位信息，研发其临床应用新策略，确实提高部分脑部疾病和外周脏器功能性疾病患者治疗质量是亟待解决的重大临床问题。 ...
- 关键词：
- 关键词：脑部疾病疾病治疗
- 下调TPH2重组慢病毒载体的构建及鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的构建色氨酸羟化酶（TPH）-2基因小干涉RNA的重组慢病毒载体。方法在TPH-2mRNA序列中选择1个特异性靶序列，体外合成对应发卡样DNA片段，经退火后，将其定向克隆入siRNA载体，获得重组质粒pU6-MCS—CMV—rrPH2-shRNA，后者与慢病毒试剂共转染293细胞，同源重组产生Lentivirus—TPH2-siRNA。经聚合酶链反应（PCR）鉴定目的基因的表达并测定病毒滴度。结果PCR表明Lentivirus—TPH2-siRNA构建正确，病毒滴度为3×10^8TU／ml。结论获得的Lentivirus—TPH2-siRNA可以用于转基因瘙痒治疗的实验研究。
- 戴少军杨少兵刘成李荣春项红兵
- 关键词：色氨酸羟化酶小干涉RNA慢病毒
- 硬膜外麻醉对快通道结肠外科手术患者罗库溴铵药效的影响被引量：11
- 2015年
- 目的观察硬膜外麻醉对快通道结肠外科患者罗库溴铵药效的影响。方法将40例择期行快速康复腹腔镜结肠手术的患者随机分成两组：A组（全凭静脉麻醉组，术后给予静脉镇痛）和B组（静脉复合硬膜外麻醉组，于19～T10硬膜外穿刺置管，注射0．375％的罗哌卡因10ml后每小时注射6ml上述溶液直至手术结束并用于术后镇痛）。静脉注射0．5μg／kg舒芬太尼后，以3．5mg／L为起始血浆药物浓度靶控输注丙泊酚，以0．1μg／（kg·min）为起始剂量持续输注瑞芬太尼，患者意识消失后注射0．9mg／kg罗库溴铵，当1Hz的单刺激达到最大阻滞时行气管插管。根据Nacotrend指数调整丙泊酚的靶控输注浓度。调整瑞芬太尼的输注剂量，使平均动脉压（MAP）维持在基础值的80％～120％。根据肌松监测结果追加罗库溴铵0．3mg／kg，记录肌松剂的起效时间、作用时间和追加次数。手术结束时停止输注丙泊酚、瑞芬太尼，记录拔管时间。患者于麻醉复苏室（PACU）行肌松监测了解肌松残余情况。结果罗库溴铵的起效时间在两组中差异无统计学意义（P〉0．05）。B组每次追加肌松剂的间隔时间均长于A组，差异有统计学意义（P〈0．05），加药次数少于A组（P〈0．05），拔管时间明显短于A组（P〈0．05）。肌松残余的发生率和持续时间A组均高于B组（P〈0．05）。结论全身麻醉联合硬膜外阻滞在快通道结肠外科麻醉中可延长肌松剂罗库溴铵的作用时间，减少其使用次数；减少肌松残余的发生率和持续时间；提高术后恢复质量。
- 冯丽逄坤芳韩爱迪刘成杨柳韩冰郭心怡杨辉
- 关键词：快通道硬膜外麻醉硬膜外术后镇痛肌松监测
