刘卫东 作品数:16 被引量:84 H指数:5 供职机构: 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
哺乳动物胚胎发生发育与表观遗传修饰 被引量:2 2010年 哺乳动物受精过程中染色体构象发生剧烈的变化.来自精子高度凝缩的染色质在卵母细胞胞质环境中解凝缩,与雌性染色质融合,发生基因组重编程共同构建合子基因组,激活胚胎基因组转录,获得发育的全能性,并进一步发育成完整的胚胎.表观遗传调节机制在这一过程中起重要作用,其中主要包括DNA甲基化、组蛋白甲基化、组蛋白乙酰化及组蛋白替代,这些修饰形式改变了染色体的空间构象以及与转录调节因子的结合模式,调控染色体的活性,进而调节胚胎的发生发育. 刘春梅 蒋星军 刘卫东 祝斌 黄伟 任彩萍关键词:表观遗传修饰 DNA甲基化 组蛋白修饰 蛋白酶活化受体1在不同肿瘤中的研究进展 被引量:1 2012年 人蛋白酶活化受体1(PAR-1)是蛋白酶活化受体家族的成员之一.它活化方式特殊,生物学功能广泛.已经证实PAR-1在黑色素瘤、乳腺癌、胃癌、鼻咽癌、前列腺癌癌旁间质、肝癌、结肠癌等组织中表达上调,在肿瘤细胞的增殖和转移过程中发挥重要作用,可作为患者临床病理分期及预后的标志物. 张立华 蒋星军 冯湘玲 刘卫东 张树菊 任彩萍关键词:上调 预后 试析影响国家自然科学基金中标率的两大因素 被引量:5 2002年 对中南大学湘雅医学院基础学科的两个三级单位 (基础医学院和肿瘤研究所 )在 1995年~ 2 0 0 0年国家自然科学基金课题的投标及中标情况进行了统计分析 ,发现在基础研究领域明显领先优势的部门 ,进而通过探讨认识到创新性选题和现代化科研管理是提高国家自然科学基金中标率的主要因素 。 杨玉文 胡隆菊 刘卫东 姚开泰关键词:国家自然科学基金 中标率 信息管理 影响因素 甲基转移酶对鼻咽癌细胞中DLC-1基因表达的影响 被引量:4 2014年 肝癌缺失基因-1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)在多种肿瘤中呈现表达缺失或表达下调,这种异常表达主要与由DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)参与的启动子区异常甲基化有关。RT-PCR结果显示DLC-1在永生化鼻咽上皮细胞NP69和干扰DNMTs的5-8F细胞中的表达水平较未干扰的鼻咽癌细胞明显升高。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSPCR)结果则表明DLC-1启动子区在表达下调或缺失的鼻咽癌细胞中均存在异常高甲基化,而干扰DNMTs后5-8F细胞中DLC-1启动子区甲基化状态被逆转,其中特异性干扰DNMT1后效果略为显著,提示DNA甲基转移酶活性对于鼻咽癌中DLC-1启动子区甲基化水平具有重要的调控作用,而DNMT1的调控作用更为突出。 冯湘玲 陈欢 刘卫东 张畅 祝斌 王磊 李敏 周文 姚开泰 任彩萍关键词:RNA干扰 一种快速检测启动子特异性的方法 被引量:6 2001年 非洲爪蟾的受精卵体积大 ,易于操作 ,与转基因鼠比较 ,转基因爪蟾操作更是快速、经济、简便 ,是一种深受欢迎的脊椎动物模型 .利用绿色荧光蛋白 (GFP)的特性 ,与不同的基因启动子连接 ,并运用显微注射技术制备转基因蟾 .根据 GFP表达情况 。 冯湘玲 蓝轲 张玲 周文 史剑凌 刘卫东 姚开泰关键词:启动子 绿色荧光蛋白 非洲爪蟾 显微注射 特异性 原位鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白质组学的研究 2010年 利用我室建立的原位鼻咽癌裸鼠模型,建立了稳定性较好的鼻咽癌裸鼠血清蛋白质2-DE方法,并比较了原位鼻咽癌裸鼠血清与对照组裸鼠血清蛋白质2-DE图谱之间的差异.与正常裸鼠血清比较,原位鼻咽癌裸鼠模型组血清增加了4个蛋白质点.利用MALDI-TOF质谱技术对血清差异蛋白点进行鉴定,发现SAA-1前体(serumamyloidA-1 protein precursor)在鼻咽癌裸鼠模型组血清中明显高表达,为寻找鼻咽癌血清生物标志物提供了有利的线索. 吴丽莎 蒋星军 刘卫东 周文 冯湘玲 李雪华 祝斌 王磊 刘春梅 姚开泰 任彩萍关键词:血清蛋白质组学 一种简单、快速、高效的基因定点突变方法 被引量:5 2000年 小规模抽提含有编码小鼠补体Ⅱ型受体(mCR2)cDNA的质粒,体外合成两对寡核苷酸突变引物,利用PCR反应将突变引入mCR2cDNA中,即产生P15S和T68Y两种定点突变。然后用DpnI对消化PCR产物以去除模板DNA,取适量消化产物转化大肠杆菌XL1-Blue,随机挑选克隆进行测序筛选、鉴定所需突变株。结果表明这一新方法不仅操作简单、快速,而且突变率极高,几乎100%。 任彩萍 刘卫东 何志巍 姚开泰关键词:鼻咽癌 EBV 基因定点突变 小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒 2001年 通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1杂交结果显示 ,仅转染hCR2和突变型MCR2 (mtMCR2 )的SP2 / 0细胞感染了EB病毒 ,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。 任彩萍 蓝轲 刘卫东 何志巍 王慧 姚开泰关键词:EPSTEIN-BARR病毒 基因突变 鼻咽癌 原位杂交 小鼠 成人视网膜假定蛋白基因ARHP的克隆及生物信息学分析 被引量:5 2003年 从UniGene库中选取编号为BG2 2 2 62 4来自人鼻咽组织的表达序列标签 (EST )序列 ,联网到NCBI调用Blast服务器分析 ,发现该EST序列是一个代表新基因的未知序列 .利用Blast检索GenBank的nr数据库和EST数据库 ,构建EST重叠群 ,联网到NCBI的ORFfinder服务器 ,分析发现该EST重叠群具有完整的阅读框架 .分别在cDNA序列阅读框架的起始密码子和终止密码子的两侧设计引物 ,以人胎脑cDNA文库为模板 ,进行PCR扩增 ,测序确定该基因的cDNA全长序列 .该基因cDNA序列全长为 1672bp ,阅读框架位于第 3 0 4~ 1557位之间 ,编码由 417个氨基酸组成 ,分子质量为 46 58ku的蛋白质 ,其理论 pI为 4 2 1.将蛋白质序列通过NCBI的Blast服务器进行序列相似性分析 ,发现该基因编码的蛋白质和成年小鼠视网膜未知蛋白 (BAB3 2 2 14 )同源 .经与国际人类基因组命名委员会协商定名为成人视网膜假定蛋白 (adultretinahypotheticalprotein ,ARHP) ,GenBank登录号为AY174896.生物信息学分析表明 ,该蛋白质可能为一参与转录调控的核蛋白 .ARHP基因定位在染色体 5q3 5,跨越 3 5163bp ,含 4个外显子和 3个内含子 .在基因的 5′非翻译区有 李峰 蒋卫红 尹志华 杨旭宇 冯湘玲 刘卫东 姚开泰关键词:基因克隆 生物信息学分析 表达序列标签 采用原位杂交及电镜检测CR2转染小鼠细胞的EB病毒感染 2001年 EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同。通过对小鼠CR2受体进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系 (TMNE)进行表达 ,观察转染阳性细胞是否具有结合EB病毒的能力。EBER - 1杂交结果显示 ,只有转染hCR2和突变型MCR2(mtMCR2 )的TMNE细胞可以感染EB病毒 ,但是前者感染EB病毒的阳性率比后者的高得多。电镜结果也进一步证实EB病毒可以感染这两种细胞。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。 任彩萍 蓝轲 冯湘玲 许亮国 何志巍 刘卫东 王慧 姚开泰关键词:EPSTEIN-BARR病毒 原位杂交 电镜观察