冯莉 作品数:21 被引量:54 H指数:4 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
肾脏热缺血再灌注早期损伤及益生注射液的干预机理研究 目的 由免疫学或非免疫学因素引起的移植物早期损伤可影响移植物短期和长期有功能存活。肾脏缺血再灌注损伤(ischemiareperfusioninjury,IRI)在肾移植中不可避免,作为主要的非抗原依赖性因素,严重时可引... 冯莉关键词:肾脏缺血再灌注损伤 益生注射液 过氧化损伤 炎症损伤 肾移植 一种栽培川贝母的新型多功能大棚 本实用新型涉及一种栽培川贝母的新型多功能大棚,它包括独立基础、砖基础、立柱、支撑架、顶棚以及在大棚两侧、两端和顶棚上的塑料覆盖材料;其中,独立基础位于大棚四角,砖基础位于大棚四周,与独立基础相连,立柱固定于独立基础上,支... 王曙 王冬冬 冯莉文献传递 益生注射液对肾脏热缺血再灌注氧化应激损伤的作用研究 2005年 目的 观察益生注射液 (YM)能否减轻小鼠肾脏热缺血再灌注 (I/ R)损伤。方法 C5 7BL/ 6小鼠肾脏热缺血 5 0 m in,再灌注 2 4 h取血和组织。术前 12 h和 30 m in分别腹腔给予不同剂量的 YM。观察 YM对 I/ R引起的氧化应激、炎症介质的影响。结果 I/ R导致小鼠肾脏严重损伤。给予 YM(5、15、2 5 m g/ kg) ,肾脏丙二醛(MDA)水平分别降低 16 .6 %、2 5 .0 %和 35 .5 % ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性分别增加约 38.7%、4 8.3%和76 .1%。YM(2 5 m g/ kg)可明显抑制 ICAM- 1的表达上调。结论 YM至少部分通过降低活性氧的产生、减少粘附分子的表达来减轻小鼠肾脏 I/ 冯莉 程峰 李胜富 熊鹰 程惊秋 陆燕蓉 李幼平关键词:肾脏 热缺血 小鼠 益生注射液 异基因骨髓间充质干细胞逆向嵌合体诱导小鼠皮肤移植耐受研究 2013年 目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导移植免疫耐受的可行性,建立小鼠异种逆向嵌合皮肤移植模型。方法以GFP-C57BL/10雄鼠为BMSCs供者,选择免疫缺陷型BALB/C-nu/nu雌鼠为BMSCs受者,移植BMSCs,建立骨髓嵌合模型;通过RT-PCR检测Y染色体性别决定区基因(SRY)、免疫组化检测GFP蛋白表达量,确定嵌合产生的最佳时间。实验共分3组:将接受BMSCs移植一定时间后的BALB/C-nu/nu雌鼠的皮肤移植给C57BL/10雄鼠(实验组),将未接受BMSCs移植的BALB/C-nu/nu雌鼠的皮肤移植给C57BL/10雄鼠(排斥组),C57BL/10小鼠间进行同种异体皮肤移植(对照组)。观察移植皮肤存活情况,检测存活皮肤的血管形成情况,以此探讨逆向嵌合皮肤移植的可行性。结果成功建立骨髓嵌合模型,用1×106 BMSCs移植后4周,SRY基因和GFP蛋白的表达量最高,分别为1.22±0.10、458.0±3.4,与移植后1周、2周和6周比较差异均有统计学意义(P<0.05),说明嵌合产生的最佳时间为移植后4周。实验组小鼠供者来源皮肤移植物存活>14d,排斥组平均为5d。结论 BMSCs移植后可形成嵌合体,并可逆向嵌合移植诱导异种小鼠皮肤移植耐受。 龙丹 吴文桥 卢俊 冯莉 李幼平 李胜富关键词:骨髓 干细胞移植 嵌合体 免疫荧光检测p53与线粒体共定位的实验方法探索 2020年 目的探索研究p53与线粒体共定位的最佳免疫荧光条件,为检测蛋白质与线粒体共定位的研究提供参考。方法低氧处理HeLa细胞,免疫印迹检测p53表达;分别使用甲醇固定HeLa细胞、甲醇:丙酮混合液(体积比1∶1)固定HeLa细胞、4%多聚甲醛固定HeLa细胞,前二者不作通透处理,后者用0.1%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton-X 100)通透,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,降低Triton-X 100浓度至0.05%、0.025%、0.01%和0.005%,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,Triton-X 100浓度降至0.01%和0.005%,通透标记p53后再次使用0.1%Triton-X 100重新通透细胞器膜染色线粒体。结果低氧后p53表达上调(P<0.01),可用于后续免疫荧光实验。使用甲醇和混合液固定组均可同时在细胞核及细胞质内观察到明显的p53信号,并可观测到其与线粒体的共定位,混合液组共定位更明显。多聚甲醛固定组用0.1%Triton-X 100通透后p53信号主要在细胞核内,未能观察到共定位;使用4%多聚甲醛固定后,降低Triton-X 100浓度至0.05%和0.025%在一定程度上削弱p53核内信号,增强共定位信号,但细胞核内信号仍强于细胞质,当降低至0.01%和0.005%,细胞质内检测到p53信号,细胞核内未检测到p53信号,提示此条件下核膜未被通透,但同样也未能通透线粒体膜,导致线粒体标记失败;二次通透完全规避p53核内信号,并成功标记线粒体,检测到p53与线粒体的共定位。结论使用甲醇或混合液固定可观察到p53与线粒体共定位,其中混合液效果更佳;使用4%多聚甲醛固定结合2次通透可有效避免核内信号,检测到p53和线粒体的共定位。 龙丹 冯莉 陈雪璐 李胜富 周彦妮关键词:P53 线粒体 共定位 免疫荧光 肾移植慢性失功机理及防治研究新进展 2006年 防治肾移植物慢失性功,进一步改善其长期存活是21世纪器官移植研究的一个焦点。针对慢性失功发生发展进程中不可忽视的免疫学因素及非免疫学因素,其机理研究和干预防治取得了系列进展。建立以近交系猪为例的大动物作为慢性失功动物模型,从我国现有天然药物中研发出高效、低毒、价廉,且能与现有免疫抑制剂相协同的新药,对慢性失功发生机制及防治进行更深入细致的研究,将是21世纪器官移植领域研究的重要方向。 冯莉 李幼平关键词:肾脏移植 慢性失功 机理及防治 HIF-3α在线粒体的表达及意义 2019年 目的探究低氧诱导因子-3α(HIF-3α)定位至线粒体的现象及其生理、病理意义。方法①低氧(1%O2)或脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)、氯化钴(CoCl2)模拟低氧处理人宫颈癌细胞系HeLa和人肾癌细胞系ACHN后,蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫荧光(IF)检测HIF-3α在细胞中的分布及其在线粒体中的表达;②通过酶敏感实验观察HIF-3α的线粒体亚结构定位;③采用Western blot检测HIF-3α在正常小鼠不同器官组织、人肝癌组织线粒体中的表达情况。结果①在检测的2种细胞系(HeLa和ACHN细胞)中,HIF-3α在常氧及缺氧条件下均可定位至线粒体,且缺氧组HIF-3α在线粒体中的表达高于常氧组;②HIF-3α的消化模式与线粒体外膜蛋白一致;③HIF-3α在小鼠多种器官组织中均可定位线粒体,HIF-3α在人肝癌组织线粒体中的表达高于正常及癌旁组织。结论 HIF-3α在常氧及缺氧条件下均可定位至线粒体外膜,低氧可促进其线粒体定位;该现象可能与肝癌的发生发展相关。 李露 周彦妮 李胜富 龙丹 李鸿生 冯莉 李幼平关键词:线粒体 低氧 常氧 川贝母生物碱类化合物的新用途 本发明公开了通式I所示的川贝母生物碱类化合物在制备镇咳、祛痰和/或抗炎药物中的用途,其中,<Image file="DDA0000074672090000011.GIF" he="7" imgContent="undef... 王曙 王冬冬 冯莉文献传递 异种移植免疫学研究进展 被引量:4 2002年 目的 论述异种移植排斥反应的发生机制和各种免疫细胞的相互作用。方法 结合基础研究相关资料对异种移植免疫学研究成果和新进展作一回顾。结果 转基因猪技术 ,新型免疫抑制剂等分别用以克服超急性排斥 ,急性血管性排斥 ;急性细胞性排斥的克服采用了针对 T细胞、抗原递呈细胞的策略以及诱导免疫耐受等方法。结论 转基因猪技术较为成熟而有效 ;急性血管性排斥 ,急性细胞性排斥的发生机制和克服仍有待进一步研究。 冯莉 李幼平关键词:异种移植 移植免疫 排斥反应 细胞和组织中两种线粒体标记方法的比较 被引量:1 2020年 目的比较探针和抗线粒体蛋白抗体标记细胞及组织中线粒体的效果,为相关研究选取适合的标记方法提供参考。方法在经体积分数4%多聚甲醛固定的HepG2细胞中,分别使用100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗葡萄糖调节蛋白75(Grp75)抗体标记线粒体;在经体积分数4%多聚甲醛固定的HeLa细胞中,分别使用75 nmol/L、100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗Grp75抗体标记线粒体;取人肝组织冰冻切片,经4%多聚甲醛固定后,分别使用150 nmol/L MitoTracker Deep Red和抗Grp75抗体标记线粒体。共聚焦显微镜下观察。结果MitoTracker Deep Red探针标记细胞线粒体的效果不如抗Grp75抗体标记清晰,且在HeLa细胞中有非特异性染色,抗体标记可更清楚地反映线粒体的点状和管状分布;在组织中MitoTracker Deep Red探针标记的单个细胞更均匀,标记线粒体的特异性更高,效果优于抗体染色。结论在细胞中使用抗Grp75抗体标记线粒体效果更好,能直观反映线粒体的分裂融合状态;在组织中使用MitoTracker Deep Red染色效果更佳。 龙丹 周彦妮 冯莉 李胜富关键词:线粒体 葡萄糖调节蛋白75 探针