俞晓峰
- 作品数：21 被引量：57H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗细菌脂多糖核心糖脂域McAb免疫反应特性的研究被引量：4
- 1995年
- 应用ＥＬＩＳＡ、免疫印迹及加成指数等方法对我们制备的３株（ＥＬ１、ＥＬ２和ＥＬ３）抗Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株和１株（３Ｈ４）抗Ｓ．ｍｉｎｎｅｓｏｔａＲ５９５株核心糖脂域ＭｃＡｂ进行了研究。结果表明，４株ＭｃＡｂ与不同类型的ＬＰＳ均有不同程度的交叉反应，其中以ＥＬ２、ＥＬ３和３Ｈ４３株ＭｃＡｂ的交叉反应更为广泛，且可与类脂Ａ结合。常见的革兰氏阴性菌（ＧＮＢ）及其ＬＰＳ均有较强的抑制ＥＬ３和３Ｈ４结合抗原的作用，ＥＬ１和ＥＬ２的结合抗原反应也可明显被Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株和Ｓ．ｍｉｎｎｅｓｏｔａＲ５９５株或ＬＰＳ（Ｒｅ－及Ｒｅ－ＬＰＳ）所抑制；且４株ＭｃＡｂ间与两突变菌株结合反应的加成指数（Ａ．Ｉ）均较低。提示４株抗核心糖脂域ＭｃＡｂ识别ＬＰＳ抗原的表位相似或相距较近。ＭｃＡｂ表现出的与ＬＰＳ较广泛的交叉反应性，可能与其作用位点位于ＬＰＳ内核及类脂Ａ结构中具有共同抗原表位区域有关。
- 俞晓峰黄策李成文
- 关键词：革兰氏阴性菌脂多糖单克隆抗体抗体
- 抗核心糖脂域MAb对脓毒症小鼠存活及其血中LPS、TNF-a和IL-6水平的影响
- 1997年
- 为进一步探讨抗核心糖脂域单克隆抗体（ＭＡｂ）的免疫保护效果及其可能的作用机制，以小鼠脓毒症为模型，用产色鲎试验法和细胞因子活性检测等方法，研究了抗核心糖脂域ＭＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对实验性脓毒症小鼠的存活及其血中ＬＰＳ、ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平的影响。结果表明，这三株ＭＡｂ均能显著提高受ＬＰＳ及Ｅ．ｃｏｌｉ攻击小鼠的存活率（Ｐ＜０．０５）；且有明显降低小鼠血中ＬＰＳ、ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平的作用，提示抗核心糖脂域ＭＡｂ的保护作用与其中和ＬＰＳ的活性，从而达到降低ＬＰＳ诱导小鼠效应细胞释放炎性细胞因子的作用有关。
- 俞晓峰黄策彭善云凌世淦凌世淦何君
- 关键词：脓毒症
- 人源抗肿瘤坏死因子-α噬菌体抗体的基因结构分析被引量：2
- 2000年
- 从混合的噬菌体抗体库中筛选到了抗人TNFα的人源单克隆抗体 ,并对筛选到的抗体基因进行了序列测定和分析。结果表明 ,筛选到的 4个特异性抗TNFα噬菌体抗体克隆的重链基因序列相同 ,该重链基因长 6 81bp ,编码 2 2 7个氨基酸残基 ,属于人免疫球蛋白第Ⅲ家族 ,其中 1～ 119位氨基酸残基为重链可变区 (VH) ,12 0～ 2 2 7位为重链恒定区 1(CH1)。 4个噬菌体抗体克隆的轻链均缺失 ,因此实际上筛选到的是单重链抗体。
- 袁斌何君俞晓峰王慧刘怀田周育森黄策
- 关键词：TNFΑ噬菌体抗体库技术人源抗体
- 通过构建轻链二级库对人源抗TNF-α抗体进行亲和力成熟
- 2000年
- 通过构建轻链二级库的方法 ,对人源抗 TNF-α单抗 Fab进行轻链置换 ,并筛选出具有更高亲和力的人源抗 TNF- α单抗的 Fab.首先用 RT- PCR技术扩增正常人全套抗体轻链基因 ,并与已获得的人源抗 TNF- α单抗的重链基因配对 ,构建人源抗 TNF- α噬菌体抗体轻链二级库 ,然后筛选与 TNF- α具有更高亲和力的克隆 .经过三轮的生物淘筛 ( biopanning) ,获得了比原来的人源抗 TNF-α单抗 Fab具有更高亲和力的人源抗体 Fab.轻链二级库筛选法能够有效使抗体的亲和力提高 ,为解决噬菌体抗体库法制备的人源抗体的亲和力较低这一难题提供了一种有效的方法 .
- 袁斌张广育王慧何君刘怀田俞晓峰黄策
- 关键词：人源抗体肿瘤坏死因子
- 抗大肠杆菌J5株人源噬菌体抗体重链可变区基因的序列分析
- 1997年
- 噬菌体抗体库技术是近年来发展起来的在体外制备人源抗体的新技术。我们曾用该项技术筛选出能与大肠杆菌Ｊ５株结合的人源噬菌体抗体（ＰｈＡｂ）。本文将两株能与大肠杆菌Ｊ５株结合的噬菌体抗体重链基因，经亚克隆Ｍ１３ｍｐ１８噬菌体载体后，测定其重组噬菌体中插入基因的ＤＮＡ序列。结果证实，Ｊ８和Ｂ１１两克隆重链可变区（ＶＨ）基因序列与已报道的人免疫球蛋白ＶＨ基因序列的同源性达９７％以上；且与人免疫球蛋白第Ⅲ家族的框架区基因序列同源性高达９９％，表明此两株能与大肠杆菌Ｊ５株结合的阳性克隆均含有人抗体ＶＨ基因片段。
- 俞晓峰黄策王海涛刘怀田
- 关键词：人源抗体基因克隆基因序列噬菌体大肠杆菌
- 细菌内毒素及其诱导的细胞因子在革兰氏阴性菌败血症休克中的作用被引量：13
- 1996年
- 细菌内毒素（ＬＰＳ）是引起革兰氏阴性菌（ＧＮＢ）败血症休克的重要始动因素，ＬＰＳ通过与宿主体内相应受体结合，诱导效应细胞释放多种炎性细胞因子，如ＴＮＦ－α、ＩＬ－１和ＩＬ－６等。动物模型和临床研究表明，ＬＰＳ攻击动物或ＧＮＢ感染患者的血循环中炎性细胞因子均可明显增加，且与预后的关系密切。因此，针对ＬＰＳ致病过程特点以及细胞因子在ＧＮＢ败血症休克中的作用，寻找有效降低败血症休克病死率的方法已成为当今抗感染免疫研究领域的重点。
- 俞晓峰黄策
- 关键词：败血症革兰氏阴性菌细菌内毒素休克细胞因子
- 抗细菌脂多糖核心糖脂域单克隆抗体在实验性菌血症中的保护作用
- 1995年
- 以小鼠菌血症模型对抗核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）的免疫保护的效果进行了研究。结果表明，（１）３株ＭｃＡｂ能显著提高受Ｅ．ｃｏｌｉ攻击小鼠的存活率（Ｐ＜０．０５）；（２）ＥＬ３和３Ｈ４还分别有降低３ＬＤ５０绿脓杆菌和５ＬＤ５０鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠病死率的作用（Ｐ＜０．０５）；（３）ＥＬ３与３Ｈ４对受５ＬＤ５０Ｅ．ｃｏｌｉ和１０ＬＤ５０绿脓杆菌攻击小鼠有一定的协同保护作用；（４）在ＥＬ１预防性保护试验中发现，提前４周注入ＥＬ１，并于攻菌前１周加强一次，ＥＬ１可明显提高５ＬＤ５０Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株攻击小鼠的存活率（Ｐ＜０．０５）。提示ＥＬ３和３Ｈ４对细菌感染小鼠具有一定的交叉保护作用。
- 俞晓峰黄策何君李云
- 关键词：菌血症革兰氏阴性菌单克隆抗体免疫保护
- 抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响
- 1997年
- 采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。
- 俞晓峰黄策彭善云
- 关键词：白细胞介素1
- 基因工程抗体：单克隆抗体技术发展的新时代被引量：2
- 1995年
- 基因工程抗体：单克隆抗体技术发展的新时代俞晓峰，黄策（军事医学科学院微生物与流行病研究所，北京１０００７１）关键词基因工程抗体，单克隆抗体Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ于１９７５年创立的用杂交瘤技术制备单克隆抗体（ＭＡｂ）的新方法标志着细胞工程抗体时...
- 俞晓峰黄策
- 关键词：基因工程抗体单克隆抗体
- 人抗E．coliJ5噬菌体抗体制备的初步研究被引量：3
- 1996年
- 以Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株对合人Ｉｇ基因的噬菌体抗体库进行淘筛富集，免疫印迹筛选，以及ＥＬＩＳＡ检测，结果获得４株能与Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株结合的阳性克隆，且阳性克隆结合抗原的活性可分．别被ＥｃｏｌｉＪ５株、Ｅ．ｃｏｌｉＲｃ－ＬＰＳ和抗Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株核心糖脂域ＭＡｂ抑制．ＰＣＲ检测表明，４株阳性克隆均分别带有约６６０ｂｐ大小的重链和轻链基因片段．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ与蛋白质印迹的结果显示，经ＩＰＴＧ诱导的阳性克隆能表达分子量约为５００００大小的蛋白，提示该４株阳性克隆能够表达具有一定抗原结合活性的人源Ｆａｂ片段．
- 俞晓峰王海涛黄策
- 关键词：噬菌体抗体库人源抗体
