何秀霞
- 作品数:46 被引量:124H指数:5
- 供职机构:长春理工大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金:吉林省教育厅科研项目国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生理学更多>>
- 有效提取病毒诱导基因沉默植株中DNA的方法
- 2008年
- 根据PCR反应的要求,用改良的CTAB法,以番茄植株为材料,实现了微量番茄叶片基因组DNA的快速提取。提取基因组DNA所用的组织量少,所得的DNA经过电泳检测虽有降解,但足以用于PCR检测,以其作模板扩增中国番茄黄化曲叶病毒诱导的硫黄素酶(Su)基因沉默植株中病毒组分中的DNAmβ和1.7A,片段大小分别为1300、500bp。测序结果证明是相应基因的部分片段。该方法的材料不需要使用液氮,可以单人大批量提取,并在基因沉默的番茄植株中能稳定而准确的规模化PCR检测。
- 何秀霞于源华果洪宇张淑华
- 关键词:PCR番茄
- 以PCR鉴定转基因番茄植株的微量DNA提取方法
- 2003年
- 微量DNA提取法是目前以PCR法鉴定转基因番茄植株T1代单株幼苗的一种简便、快速、有效的方法.该方法需约1 h即可完成植物DNA的提取,样品用量仅为30-100mg,产量可达30-80μg/g,粗提DNA(溶于10μlTE缓冲液)不必经过纯化,用TE缓冲液稀释5-10倍即可直接用于PCR分析.
- 何秀霞陆一鸣任永霞白杰英李彦舫陆水木
- 关键词:转基因番茄单株DNA提取方法缓冲液
- 烯丙孕素缓释片的制备及其含量测定
- 2024年
- 制备烯丙孕素缓释片,对其进行质量评价并建立含量测定方法。以烯丙孕素缓释片的亲水凝胶骨架种类,用量以及片芯厚度作为考察因素,以缓释片的释放度为考察指标,对烯丙孕素缓释片的处方工艺进行单因素筛选和中心组合设计响应面法优化并进行质量评价,建立体外释药模型及建立烯丙孕素缓释片的高效液相色谱检测方法。烯丙孕素缓释片的最佳处方为:烯丙孕素2%,羟丙基-β-环糊精70%,硬酯酸镁0.5%,微晶纤维素19.1%,卡波姆B 8.4%,片厚3.8 mm。体外释药符合Higuchi模型,烯丙孕素在10~80 mg/L之间呈现良好线性关系R2=0.99998。优化所得烯丙孕素缓释片工艺稳定,具有显著缓释效果。所建立高效液相色谱法准确可靠,可用于检测缓释片中烯丙孕素含量。
- 霍雨柔赵琪赵琪王凯徐诗瑶张嘉斌杨玉洁顾海泉李乾学何秀霞
- 关键词:缓释片
- HBsAg/截短型HCV核心蛋白融合基因植物表达载体的构建及对番茄的遗传转化被引量:1
- 2008年
- 探索乙肝病毒表面抗原/截短型HCV核心蛋白融合基因在植物中表达乙肝丙肝双价抗原的可能性.以期为进一步研制植物乙肝丙肝双价口服疫苗打下基础。利用重组PCR技术将乙肝病毒(HBV)S基因连接在丙肝病毒(HCV)截短型核心蛋白序列的5′端,二者通过柔性肽(Gly4Ser)2序列相连,构建成-融合基因BC,测序结果正确。将融合基因BC克降到植物表达载体pBin438上,获得pBin438BC,然后用冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105中,采用叶盘法转化番茄。获得了15株抗卡那霉素的番茄植株。对抗性植株进行PCR及Southern检测,8株获得阳性信号,表明目的基因已整合到了番茄基因组中。提取阳性植株的总蛋白.经透析后.将适当浓度蛋白质点在PVDF膜上,用Dot-ELISA方法验证番茄中表达蛋白的活性。结果表明,转基因番茄中有重组蛋白的表达。
- 何秀霞于源华于鹏张晓张振明
- 关键词:融合基因农杆菌转基因番茄
- 适应创新性人才培养的生物化学教学改革被引量:2
- 2012年
- 为了更好地培养适合社会需求的创新性人才,对生物化学教学师资队伍、所用教材、教学方法、实验教学、课程考核及创新能力的培养等进行了探讨,旨在寻求一套崭新的生物化学的教学模式,提高学生的动手能力,更好地满足社会对现代应用型人才的需求。
- 何秀霞于源华
- 关键词:生物化学教学改革创新性人才
- 三倍体毛白杨茎段遗传转化系统的建立被引量:6
- 2003年
- 建立了三倍体毛白杨遗传转化系统 :以茎段为外植体 ,基本培养基是MS +IBA 0 .2 5mg/L +ZT 0 .2 5mg/L +TDZ 0 .0 5mg/L ,农杆菌菌株用EHA10 5 ,菌液浓度OD6 0 0 值为 0 .3 ,浸染 3 0min ,在共培培养基中加入乙酰丁香酮 2 0 0 μmol/L .
- 石超何秀霞李彦舫
- 关键词:三倍体毛白杨茎段
- 中国番茄黄化曲叶病毒利用根吸收法诱导基因沉默(VIGS)的初步研究被引量:4
- 2014年
- 以含硫黄素酶Su基因的中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNA作为载体,通过冻融法将其转化到农杆菌中,利用根部吸收法进行农杆菌侵染,对农杆菌介导的病毒诱导基因沉默体系进行了优化,探讨对病毒诱导基因沉默效率的影响。结果显示以OD600值为1.5的含质粒pBinPLUS-2mβ-Su,pBinPLUS-1.7A的农杆菌菌液1∶1混合进行根部吸收法侵染22-25 d的番茄幼苗,目的基因Su沉默导致番茄幼苗出现光漂白现象,半定量RT-PCR检测目的基因Su mRNA被显著降解,该体系的建立有利于对植物基因进行高通量功能分析。
- 张召军王晓彬王慧刘林张心阁何秀霞
- 生物技术特色专业人才培养体系的构建与探讨——以长春理工大学为例被引量:3
- 2022年
- 为培养高质量应用型技术人才,以长春理工大学生物技术专业为例,该文从人才培养目标及专业特色的确定、课程体系优化、实践教学体系及实践基地建设、“双师型”人才培养、教学团队建设五个方面,系统阐述了生物技术专业人才培养体系的构建与实践,为相同或相关专业人才培养体系的建设提供思路。
- 张淑华葛淑敏何秀霞陈玉娟王清爽
- 关键词:应用型技术人才
- 番茄组织培养体系的建立及其影响因素的研究被引量:55
- 2003年
- 以 11种番茄 (lylopersiconesculentum Mill)栽培品种为实验材料 ,以 10~ 12天的无菌苗的子叶、下胚轴段、叶片、茎段为外植体 ,通过对供体基因型、激素浓度及培养条件的研究 ,建立了一套优化的适于番茄遗传转化的组织培养与再生体系 .
- 何秀霞陆一鸣白杰英李彦舫
- 关键词:番茄影响因素
- 微囊藻毒素-LR降解菌的筛选被引量:2
- 2009年
- [目的]为生物降解微囊藻毒素-LR(Microcystins,MC-LR)选择生物除污的方法。[方法]对长春南湖表层和深层水体中的微生物菌群降解MC-LR的能力进行初步比较,并对具有较强MC-LR降解能力的微生物进行分离纯化及降解能力的比较。[结果]无论是深层水体还是表层水体中都存在能够降解MC-LR的微生物菌群,但表层水体中的微生物菌群降解MC-LR的延迟期较长,约为3.5 d;而深层水体中微生物菌群降解MC-LR的延迟期较短,约为1.5 d,降解速率更大,说明其能够降解MC-LR的微生物菌种活性较强。成功筛选出了4种降解MC-LR能力不同的单克隆菌落,其中菌种A和菌种B降解能力比较强。[结论]为纯菌种的定性研究、环境污染治理及生态环境的保护奠定了良好的基础。
- 葛淑敏张淑华李巧于源华何秀霞
- 关键词:微囊藻毒素-LR