代瑞霞
- 作品数：114 被引量：241H指数：9
- 供职机构：青海省地方病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 青海省海西州鼠疫自然疫源地分离鼠疫菌株CRISPR基因分型研究
- 2023年
- 目的利用DNA规律聚集簇间隔短回文重复序列(Clustered regularlyinter-spaced short palindromic repeats CRISPR)分型方法,全面探索海西地区分离鼠疫菌株是否存在新的基因型,为鼠疫菌溯源鉴定及流行病学分析提供理论依据。方法分离培养海西地区1961-2009年间取自鼠疫患者、媒介昆虫及中间宿主的50株鼠疫菌后提取其DNA,利用PCR技术,对鼠疫菌CRISPR分型中的YPa、YPb、YPc 3个位点进行扩增,测定其扩增产物核酸序列并进行分析,将测得CRISPR序列与文献最新报道的CRISPR Dictionary和NCBI数据库进行比对,找出新的CRISPR spacer阵列,基因型别,分析其进化关系,最终确定青海省海西州喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫菌株的CRISPR基因库。结果50株鼠疫菌在3个CRISPR位点上共有24种spacer,其中YPa位点上有13种、YPb位点8种、YPc位点3种,b51是新发现的spacer。50株鼠疫菌可被分为16个基因型,共归为6大CRISPR类群。Ca35′是该地区主要流行类群;Ca7是流行最为广泛的类群;Cb4和Cb4′仅存在于格尔木唐古拉地区。结论青海省海西州地区鼠疫菌种群结构复杂,Ca35′、Ca7、Cb4′是流行最普遍的种群,G26-a1′型、G22型、G9型、G26-a1′a4-为主要基因型,呈现显著的地区分布特征,今后可以利用CRISPR基因分型技术加强该地区鼠疫溯源检测和防控工作。
- 张琪张琪代瑞霞何建靳娟李胜施昊旻艾丽孜热·艾尼瓦尔廖星豪张雪飞
- 关键词：鼠疫菌基因分型
- 鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度测定方法的建立与应用被引量：3
- 2020年
- 目的测定11种抗菌药物对鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),建立鼠疫菌MIC测定方法,掌握常用抗生素对鼠疫菌的抑菌范围,为鼠疫的临床治疗提供基线数据。方法根据美国临床和实验室标准协会(Clinical Labor Standard Institution,CLSI)药敏试验方法中的琼脂稀释法,分别测定氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明(甲氧苄啶-磺胺甲恶唑)、硫酸卡那霉素、硫酸链霉素、头孢曲松钠、氨苄青霉素钠、氯霉素、盐酸壮观霉素、头孢呋辛钠、盐酸四环素共11种抗菌药物对118株鼠疫菌的MIC,并计算MIC50、MIC90(能抑制50%、90%细菌生长的最低药物浓度)。以纸片扩散法的检测结果作为对照观察两者的一致性。118株鼠疫菌分离自青海省鼠疫自然疫源地,由青海省地方病预防控制所保存。结果检测的118株鼠疫菌,未发现具有单个或多个抗菌药物抗性的菌株,与纸片扩散法结果一致,并获得11种抗菌药物对118株菌的MIC50、MIC90。结论成功建立了鼠疫菌MIC测定方法,该方法能高通量测定抗菌药物对鼠疫菌的MIC,评价鼠疫菌对抗生素的敏感性,是一种高效、经济、实用的实验手段。
- 何建杨晓艳辛有全靳娟李胜张琪柏吉祥吴海莲金泳张雪飞代瑞霞魏柏青
- 关键词：最低抑菌浓度
- 左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的疗效报告被引量：1
- 2022年
- 通过观察左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的疗效,为鼠疫的防治用药提供参考依据。根据《中华人民共和国国家药典》成人剂量和常用实验动物及人的体表面积比例剂量换算,豚鼠所用药物的剂量为40 mg/kg/d,用生理盐水制成水剂,于攻毒24 h后进行皮下注射给药。连续用药9 d后停药,医学观察9 d后将动物处死并取肝、脾做鼠疫细菌学检验。结果显示,左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的治愈率为100%,对照组均特异性死亡。说明左氧氟沙星对人工感染鼠疫动物的治疗效果显著,对今后鼠疫预防和治疗用药的选择提供有力的佐证。
- 辛有全何建杨晓艳李胜靳娟张琪辛文媛张丽李广辉代瑞霞
- 关键词：左氧氟沙星鼠疫疗效
- 青海省海西州鼠疫自然疫源地鼠疫菌病原学及耐药、耐消毒剂基因特征分析被引量：5
- 2019年
- 目的 分析青海省海西州鼠疫自然疫源地鼠疫菌株生物学特性,为鼠疫防治提供科学依据。 方法 对1957 - 2011年在青海省海西州分离的181株鼠疫菌进行生化试验、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(DFR)分型及耐药、耐消毒剂基因检测研究。从181株鼠疫菌中选取79株进行毒力测定,并按毒株判定标准[最小致死量(MLD)≤10 000为强毒菌,10 000 < MLD < 100 000为中等毒力菌,MLD≥100 000为弱毒菌]进行分类。 结果 181株鼠疫菌的生物型均为古典型,生态型均为青藏高原型。81.22%(147/181)的鼠疫菌株含有4个毒力因子(F1、PstⅠ、VW、Pgm);63.54%(115/181)的鼠疫菌株携带相对分子质量(Mr)为6 ×10^6、45 ×10^6、52 ×10^6的质粒,31.49%(57/181)的鼠疫菌株携带Mr为6 ×10^6、45 ×10^6、65 ×10^6的质粒。DFR分为8个基因组型,分别为8型(109株)、32型(33株)、5型(20株)、1b型(14株)、44型(2株)、7型(1株)、37型(1株)、49型(1株);未发现有耐链霉素、磺胺类药、β-内酰胺类抗菌药物及消毒剂等相关基因的菌株。79株进行小鼠毒力测定的鼠疫菌中,有75株菌的MLD≤10 000,即为强毒菌,占94.94%(75/79)。 结论 青海省海西州鼠疫自然疫源地分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特性,鼠疫菌的毒力强,且不具有耐药及耐消毒剂相关基因的特征。
- 李胜杨晓艳何建李存香熊浩明辛有全靳娟张琪柏吉祥魏柏青代瑞霞
- 关键词：病原学
- 左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果观察
- 2021年
- 目的观察左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果。方法选择SPF级豚鼠70只,雌性,体重为250~300 g,按体重采用随机数字表法分为7组,每组10只,分别为左氧氟沙星24、48、72 h组,莫西沙星24、48、72 h组(开始给药时间点分别为感染鼠疫菌24、48、72 h)和对照组(未进行治疗)。各组豚鼠皮下注射鼠疫菌141株[1×107菌落形成单位(CFU)菌悬液]制备实验感染鼠疫模型,参照《中华人民共和国国家药典》成人剂量,用动物折算系数法换算成豚鼠每日用药剂量进行治疗,每只豚鼠左氧氟沙星、莫西沙星给药量分别为12.0、9.6 mg/d,连续用药9 d。停药观察9 d后处死豚鼠,进行细菌学检验和病理学观察,并计算治愈率。结果左氧氟沙星24、48、72 h组治愈率分别为100.0%(10/10)、70.0%(7/10)、6/6,莫西沙星24、48、72 h组治愈率分别为100.0%(10/10)、100.0%(10/10)、5/7,对照组治愈率为0(0/10)。与对照组比较,左氧氟沙星24、48、72 h组和莫西沙星24、48、72 h组治愈率均明显较高(P均<0.05);相同开始给药时间点的两种药品间治愈率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果理想,特殊情况下可用于鼠疫治疗。
- 何建辛有全杨晓艳李胜张琪靳娟杨建国熊浩明代瑞霞
- 关键词：疗效观察
- 青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌遗传特征分析被引量：2
- 2018年
- 目的研究青藏高原喜马拉雅鼠疫疫源地那曲和比如地区鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株的分子分型特征,确定具有该分型特征的鼠疫菌在青藏高原鼠疫疫源地的分布情况。方法应用板块重排、差异区段分析、间区规律短回文重复、多位点可变数目串联重复序列分析方法对分离自青藏高原地区、四川省、云南省的98株鼠疫菌进行分析。结果那曲和比如地区的鼠疫菌菌株中第57~60板块的排列方式与测序菌株Z176003一致,在其他实验菌株中未发现该重排特征。结论分离自那曲和比如的鼠疫菌菌株具有独特的分子分型特征,该特征在本地区的菌株中普遍存在,且菌株多态性持续分化。
- 王宇萌梁莹张恩民马娜申小娜蔡虹张志凯夏连续梁未丽代瑞霞李伟
- 关键词：鼠疫耶尔森菌青藏高原
- 青海省果洛藏族自治州鼠疫耶尔森菌病原学分析及耐药相关基因检测被引量：2
- 2019年
- 目的对青海省果洛藏族自治州(果洛州)鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)进行病原学分析及耐药相关基因检测,为该地区的鼠疫防治提供科学依据。方法对1978-2016年间青海省果洛州分离的13株鼠疫菌进行糖醇类酵解试验、毒力测定、毒力因子检测、质粒分析及鼠疫菌基因差异区段(DFR)分型等研究,并根据美国国立生物信息中心(NCBI)公布的耐氨基糖苷类链霉素strA、strB基因、耐β-内酰胺类抗菌药物tem、ctx-m基因和耐磺胺类药物sul1、sul2基因序列,在每个基因上设计1对引物,以该13株鼠疫菌DNA为模板分别进行上述6个耐药基因的PCR扩增,以检测其是否携带耐药相关基因。结果根据生化分型指标,13株被试菌株中9株为青藏高原型,4株为祁连山型。毒力测定结果显示,13株被试菌株均为强毒级别的鼠疫菌,13株菌中有11株具备鼠疫菌特有的4个毒力因子,被试菌株携带相对分子质量分别为6×106、45×106、65×106和6×106、45×106、52×106的2种质粒谱。DFR分为4个基因组型,5型(7株)、8型(4株)、36型和01b型(各1株)。耐药基因检测结果显示,阴性对照和阳性对照均成立的情况下,所测13株鼠疫菌的PCR检测结果均为阴性,未发现耐链霉素、耐β-内酰胺类抗菌药物及耐磺胺类药物的菌株。结论青海省果洛州分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特征,鼠疫菌的毒力强,但尚未出现耐抗菌药物菌株,但仍需加强鼠疫监测和鼠疫防治知识宣传力度,严防动物间鼠疫波及人间。
- 吴海莲吴海生何建杨晓艳辛有全李存香靳娟李胜张琪代瑞霞祁芝珍
- 关键词：鼠疫菌病原学耐药基因
- 青藏高原鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因分型研究被引量：6
- 2022年
- 目的探讨青藏高原鼠疫自然疫源地鼠疫菌规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)的基因型及其地区分布。方法选取青海省地方病预防控制所保存的1954-2011年在不同地区宿主、媒介体内分离的1004株鼠疫菌作为实验对象,采用传统的苯酚-氯仿混合抽提法提取鼠疫菌DNA。分别对3个CRISPR位点(YPa、YPb和YPc)进行PCR扩增、测序,将所测得CRISPR序列与文献最新报道的CRISPRDictionary数据库进行检索比对,以鉴定间区序列(spacer);对CRISPR各位点新发现的spacer,在美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库进行Blast序列比对,推测基因序列来源。根据CRISPR spacer阵列的多态性对青藏高原鼠疫菌进行基因分型。结果1004株鼠疫菌共发现53种spacer,其中新发现6种,分别为a105、a106、a107、b51、b52、c14;1004株鼠疫菌被分成44个不同的CRISPR基因型,10大类群,新发现基因型15种,喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因型以G26-a1′、G7、G22、G24-a1′、G22-a1′、G9、G26-a1′a60型为主,青海田鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因型为G37-a6′型。结论青藏高原鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因型具有高度多样性,且地区分布特征显著。
- 何建靳娟辛有全杨晓艳李胜张琪柏吉祥李广辉代瑞霞李伟
- 关键词：鼠疫菌青藏高原鼠疫自然疫源地
- 鼠疫耶尔森菌F1抗原的纯化方法改进及其免疫原性的评价被引量：4
- 2009年
- 目的建立从减毒鼠疫菌培养物中提取天然F1抗原的方法，评价F1抗原对鼠疫的免疫保护效果。方法通过用玻璃珠裂解菌体替代有机溶剂的方法，结合饱和硫酸铵沉淀和凝胶过滤的方法从鼠疫菌培养物中纯化出天然F1抗原。将F1抗原吸附到25％氢氧化铝佐剂中，肌肉注射免疫BALB／c小鼠，于初次免疫后第18周皮下攻毒10^4 CFU活鼠疫菌141强毒株。结果一次免疫的两个剂量组之间产生的抗体滴度差异无统计学意义，而加强免疫的两个剂量组中，F1-40μg剂量组产生的抗体滴度明显高于F1-20μg剂量组。F1抗原免疫的小鼠全部存活，而且健康状况良好，对照组小鼠全部死亡。结论本研究提供了一种简单、有效和便于大规模提取F1抗原的方法。提取的F1抗原具有较高的免疫原性，可作为鼠疫亚单位疫苗的重要抗原组分用于鼠疫亚单位疫苗的研制。
- 祁芝珍赵海红代瑞霞张青雯任玲玲杨永海李存香吴海莲何建魏荣杰王虎杨瑞馥王祖郧王效义
- 关键词：鼠疫耶尔森菌F1抗原免疫保护
- 莫西沙星治疗豚鼠感染鼠疫的效果
- 2021年
- 目的观察莫西沙星治疗豚鼠感染鼠疫的疗效。方法豚鼠感染鼠疫后,采用莫西沙星9.6 mg/d进行治疗,观察治疗效果。结果治疗组豚鼠感染鼠疫24和48 h后采用莫西沙星治疗的,治愈率为100%。未治疗组全部死亡。治疗组动物处死后解剖,各主要脏器肉眼观无明显病理改变,均未检到鼠疫菌。未治疗组动物尸体解剖,各主要脏器可见充血、肿大及大片坏死灶,均检到鼠疫菌。结论莫西沙星可用于鼠疫的临床治疗。
- 靳娟何建李胜杨晓艳辛有全张琪魏柏青代瑞霞
- 关键词：莫西沙星鼠疫疗效
