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Mmu-miR-34c慢病毒表达载体构建及在奶山羊雄性生殖干细胞的表达: 2012年; 【目的】用两种方法构建miR-34c的慢病毒表达载体,并包装成慢病毒颗粒,为经济、高效的进行miR-34c超表达提供方案,为进一步研究miR-34c的作用奠定基础。【方法】从小鼠基因组中扩增miR-34c前体,分别插入pLL3.7的CMV启动子起始的GFP之后或U6启动子后,构建成载体pLL3.7-CMV-34c及pLL3.7-U6-34c。将重组慢病毒载体和包装质粒混合物转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,测定病毒滴度。感染293T细胞与关中奶山羊雄性生殖干细胞,用293T细胞与奶山羊雄性生殖干细胞的GFP表达程度测定转染效率,用定量PCR方法测定miR-34c的表达效率。【结果】重组质粒酶切及PCR分析及转化菌液测序,证明插入序列正确,qPCR检测显示:miR-34c的表达在慢病毒载体感染的293T细胞与关中奶山羊雄性生殖干细胞均显著上调。【结论】用pLL3.7慢病毒载体中的CMV和U6两种启动子均可经济高效地进行miR-34c超表达,且由U6启动子启动的miR-34c慢病毒表达载体可以成功高效感染关中奶山羊雄性生殖干细胞。; 刘超于萌朱海鲸李明昭华进联; 关键词：慢病毒载体奶山羊

Nanos2与生殖细胞发育分化被引量：2: 2012年; Nanos在果蝇巾是最先被鉴定的一个母源效应基因，位于早期胚胎的后极^[1]。它编码一种RNA结合蛋白，这种蛋白与Pumilio RNA结合蛋白相互作用形成一种核糖核蛋白复合物一起抑制母源mRNA hunchback的翻译，从而调控果蝇胚胎后腹部细胞的分化^[2-3]。Nanos对果蝇生殖细胞的发育是必需的，此基因缺失的果蝇的生殖细胞产生异常，; 廉智敏于萌华进联; 关键词：生殖细胞发育分化 RNA结合蛋白蛋白相互作用早期胚胎蛋白复合物

小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染被引量：1: 2013年; 根据NCBI数据库上公布的小鼠Dazl基因的mRNA序列设计引物,以小鼠睾丸组织RNA为模板,RT-PCR扩增小鼠Dazl基因编码区片段,并将其克隆到增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1中,构建重组融合蛋白表达载体pEGFP-C1-Dazl,单双酶切和测序验证正确。将pEGFP-C1-Dazl质粒转染293和NIH-3T3细胞,荧光显微镜下观察到融合表达的绿色荧光蛋白,且呈胞质表达;对照组转染pEGFP-C1,绿色荧光遍布整个细胞。Dazl蛋白的免疫荧光试验也证明重组载体转染后,Dazl基因和GFP共同定位于胞质部分。pEGFP-C1-Dazl融合蛋白表达载体的成功构建为进一步研究生殖特异性基因Dazl在小鼠和大型动物的表达特性奠定了一定的基础。; 王龙周莹胡玥于萌白耀富华进联; 关键词：小鼠生殖细胞绿色荧光蛋白

miR-34c在小鼠精原干细胞体外分化过程中的作用: 在动物体内，干细胞持续更新分化产生的各类型终末分化细胞对维持组织器官的功能有着至关重要的作用。哺乳动物睾丸中的精原干细胞(SSCs)持续分化产生精子这一过程贯穿于雄性个体生长发育的整个时期，可以说SSCs是种系维持和遗传...; 于萌; 关键词：精原干细胞精子发生分化; 文献传递

microRNA-34c在不同发育时期雄性小鼠脑组织中的表达分析: 2014年; 【目的】研究microRNA-34c(简称miR-34c)在出生后不同发育时期小鼠嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的表达情况,并分析其与小鼠行为活动之间的相关性。【方法】以出生后0,3,7,14,21,28,60和90d的雄性昆明小白鼠为试验动物,以5SrRNA为内参基因,运用荧光实时定量PCR技术,检测miR-34c在小鼠出生后8个不同发育时期嗅球、大脑皮质、小脑皮质和海马中的相对表达量以及在成年鼠脑组织中4个不同部位的相对表达量。【结果】随着小鼠的发育,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的相对表达量均呈现不同程度的递增趋势。在成年鼠中,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质、海马中的相对表达量差异显著,其中海马中最高,小脑皮质次之,嗅球最低。【结论】miR-34c在出生后不同发育时期小鼠嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的表达趋势,与小鼠各种行为活动的出现具有一定的相关性。; 刘笙腩于萌颜润川张伟段明慧胡新德华进联陈树林赵善廷; 关键词：小鼠脑组织实时定量PCR

Nanos3与生殖细胞发育分化被引量：3: 2012年; 小鼠Nanos3基因是果蝇Nanos的同源基因,是Nanos基因家族的一员.Nanos3是一种RNA结合蛋白,靠近其C端有两个非常保守且连续的Cys-Cys-His-Cys特异锌指结构域.研究显示,Nanos3在小鼠生殖细胞中特异表达,不仅在原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的维持方面发挥重要作用,而且是一种启动雄性生殖细胞分化程序的内源性因子,其在精子发生中的重要作用已引起越来越多的关注.探讨Nanos3的生物学功能,有助于了解生殖细胞发育过程中的部分重要机制.本文就Nanos3维持生殖细胞更新和原始生殖细胞的维持等作用作一综述.; 于萌廉智敏华进联; 关键词：自我更新生殖细胞

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于萌