于冬冬
- 作品数：9 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CDK1 siRNA干扰在Taxol诱导细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究转染细胞周期依赖性蛋白激酶1（cyclin．dependent kinase1，CDK1）siRNA、以及转染后进行凋亡刺激对细胞周期和凋亡的影响，探讨CDK1在细胞凋亡中的确切作用，揭示细胞周期与细胞凋亡协调的分子机制。方法以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象，脂质体转染CDK1siRNA，转染后48h加紫杉醇（Tax01）（20μg／m1）刺激凋亡，Western印迹检测CDK1和抗凋亡蛋白BCL2表达，AnnexinV／PI法检测细胞的凋亡，流式细胞仪分析DNA含量检测细胞周期。结果转染CDK1 siRNA后，CDK1蛋白的表达下降，细胞周期G2／M期比例增加，细胞凋亡率与对照相比没有明显升高。只加Taxol刺激12h后细胞凋亡率增加并伴有S期和G2／M期比例增加。转染CDKlsiRNA后再用Taxol刺激，其细胞凋亡率没有明显改变，G2／M期阻滞效应也没有叠加。BCL2蛋白只在加Taxol刺激组表达下降，与CDK1表达减少没有相关性。结论siRNA沉默导致的CDK1表达降低只导致细胞周期G2／M期阻滞，没有引起细胞凋亡；CDK1的表达降低对紫杉醇所诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡效应没有明显影响。
- 肖徽王尊于冬冬曹金鹏龚万军葛君娜陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：紫杉醇细胞周期细胞凋亡
- 四环素诱导可控表达细胞周期素B1单克隆的筛选被引量：2
- 2009年
- 目的筛选四环素诱导细胞周期素B1（CyclinB1）可控表达的293单克隆细胞株（tetracycline-regulated expression 293 cells，T-REx^TM-293）。方法从人胎肝cDNA文库中PCR带有酶切位点的CyclinB1基因全长，将其酶切后插入到pcDNA4／TO／myc-HisB载体中。然后用测序正确的质粒转染T-RExTM-293细胞，加杀稻瘟菌素（Blasticidin）和腐草霉素（Zeocirt）双药物筛选两周后，传96孔板，等单个细胞扩增出单克隆。然后用Western印迹和流式细胞仪检测CyclinB1的诱导表达情况。结果构建好的pcDNA4／TO／myc-HisB—CyclinB1载体，经鉴定序列正确。筛选出的单克隆细胞株，在未加四环素时没有外源性的CyclinB1表达，在加入四环素后，3h就有表达，随时间的增加，CyclinB1表达量也增加，48h最多。结论筛选出的T-REx^TM-293单克隆细胞株能可控表达CyclinB1。
- 何乐亚魏欣左学良田铭张永红于冬冬董硕陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：细胞周期素B1四环素单克隆
- 结直肠癌CD133的表达与细胞周期蛋白水平及血清癌胚抗原含量的关系
- 2010年
- 目的探讨结直肠癌肿瘤干细胞标志物CD133分子的表达与细胞周期蛋白表达有无关系,分析肿瘤CD133分子的表达变化是否影响血清肿瘤标志物癌胚抗原的水平。方法应用流式细胞术检测41例结直肠癌肿瘤组织的CD133,cyclin D1,cyclin E,cyclin A和cyclin B1的表达水平,血清癌胚抗原的含量常规由检验科用放免法检测,数据采集自检验报告单。结果 41例结直肠癌肿瘤组织CD133分子的表达率是0.3%-47.07%,cyclin D1为2.94%-36.93%,cyclin E为0.49%-9.28%,cyclin A为0.42%-22.33%,cyclin B1为1.24%-22.96%。相关分析表明,CD133的表达水平与cyclinD1相关r=0.405 P=0.047,与其它几种细胞周期蛋白的表达水平无关,均为P>0.05。CD133的表达水平和血清癌胚抗原的表达呈正相关r=0.601P=0.009。结论结直肠癌CD133分子的表达与细胞周期蛋白cyclin D1的表达正相关,两者一定程度上共同反映了癌细胞的增殖状态。CD133高表达的结直肠癌,常伴有患者血清癌胚抗原的高表达,两者密切相关。
- 于冬冬张永红邹游陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：CD133肿瘤干细胞细胞周期蛋白癌胚抗原
- 大肠癌细胞周期状态与临床病理因素及细胞周期蛋白水平的相关性被引量：3
- 2011年
- 目的研究大肠癌组织的细胞周期分布状态与临床病理因素的关系,以及和细胞周期调节蛋白的表达水平是否相关。方法应用流式细胞术检测45例大肠癌临床标本细胞周期中G0/G1、S、G2/M期所占的比例,并检测每例标本的细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinE、CyclinA、CyclinB1的表达水平。结合临床病理因素进行统计分析。结果肿瘤细胞G0/G1、S、G2/M期所占的比例和患者性别、年龄、肿瘤部位、病理分级、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期均无明显相关性,均P>0.05。G0/G1期的比例与CyclinD1、CyclinE,S期与CyclinE、CyclinA,G2/M期与CyclinA的表达水平均不相关,均P>0.05;但是G2/M期的比例与CyclinB1的表达水平正相关,r=0.335,P=0.035。结论大肠癌肿瘤细胞的周期分布和临床病理因素无关,肿瘤细胞周期蛋白的表达特点与体外培养的细胞系不同,表现得更加复杂多样。
- 于冬冬张永红邹游李小兰肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：大肠肿瘤细胞周期细胞周期蛋白
- 胃黏膜上皮细胞的分离及其质膜蛋白质的初步分析被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨分离胃黏膜上皮细胞的方法及对其细胞膜蛋白质的初步分析.方法 采用0.1%的胃蛋白酶溶液消化掉附在胃黏膜上的黏液,刮取黏膜,用机械法将黏膜剪碎,过滤,离心,从而获得胃黏膜上皮细胞 用Triton-114方法提取细胞质膜蛋白质,SDS-PAGE电泳,并对其中的几个条带质谱分析.结果 成功获得了胃黏膜上皮细胞 胃黏膜上皮细胞质膜蛋白质得到了较好的分离 SDS-PAGE电泳细胞膜蛋白质得到了清晰的条带 用质谱分析条带获得了一些细胞膜蛋白信息.结论 利用物理和化学相结合的方法可以分离得到胃黏膜上皮细胞,成功提取胃黏膜上皮细胞质膜蛋白质并进行了初步鉴定.
- 李小兰徐向上闵江邹游于冬冬张永红肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：胃黏液胃黏膜上皮细胞细胞质膜质谱
- 异时相Cyclin B1/CDK1表达有助于正常在体细胞进入细胞分裂周期
- 2009年
- 目的研究通常表达于G2/M期的Cyclin B1在G1期异时相表达的作用机制及意义。方法用丝裂原刺激因子(PHA)刺激人外周血淋巴细胞使之进入细胞周期,分别在刺激后0、36、48、60 h收集细胞,并分成两部分,一部分用流式Cyclins/DNA多参数技术分析,一部分用Post-sorting Western blot分析。结果处于G0期的淋巴细胞经PHA刺激进入细胞周期后,可以观察到Cyclin B1在G1期有异时相表达,相应的CDK1亦有异时相表达。结论异时相Cyc-lin B1/CDK1可能有助于正常在体细胞进入细胞分裂周期。
- 张永红于冬冬何乐亚魏欣冷彦陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：外周血淋巴细胞
- 中药金克通过G_1期阻滞和诱导凋亡抑制HL-60细胞增殖被引量：3
- 2010年
- 目的研究中药金克对体外HL-60细胞系细胞周期调控方面的影响。方法使用MTT比色法检测HL-60细胞活力,使用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,使用Western blot检测细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果金克能通过G1期阻滞和诱导凋亡使HL-60细胞活性降低。金克作用于HL-60细胞引起剂量和时间依赖性凋亡。金克阻滞HL-60细胞在G1期的原因是CDKI蛋白(p19INK4,p21Cip/waf1和p27Kip1)表达增高,同时CDK2,CDK4,CDK6,Cyclin D1和Cyclin E表达降低。金克也引起凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2和Caspase-3的表达。结论首次证明了金克通过G1期阻滞和诱导凋亡抑制HL-60细胞的增殖,这表明金克是一个细胞周期特异性的抗癌药物。
- 张永红李永翔于冬冬陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：细胞凋亡细胞周期阻滞HL-60
- 生长激素对MOLT-4细胞增殖的影响
- 2011年
- 生长激素（GH）是由脑垂体前叶嗜酸性细胞所分泌的生长刺激因子。我们通过研究rhGH是否对人T淋巴细胞型白血病细胞株（Moh-4）具有增殖作用以及观察生长激素受体（GHR）在Moh-4细胞中的表达，以期为rhGH的临床研究提供实验依据。
- 田铭龚万军李川于冬冬何乐亚肖薇陶德定龚建平
- 关键词：MOLT-4细胞增殖生长刺激因子RHGH嗜酸性细胞脑垂体前叶
- 结肠癌原发灶及肝转移灶中PTEN蛋白的表达研究被引量：1
- 2010年
- 目的检测结肠癌原发灶及淋巴结、肝转移灶中PTEN蛋白的表达情况及其作用。方法应用免疫组化方法和WesternBlot方法对38例结肠癌原发灶和淋巴结、肝转移灶中PTEN蛋白的表达情况进行检测。结果PTEN蛋白质原发灶中高表达,在淋巴结转移灶中表达降低,肝转移灶中不表达或表达极低。结论PTEN蛋白表达降低有助于结肠癌的转移,PTEN可望成为结肠癌预后指标和分子治疗的靶标。
- 张永红于冬冬何乐亚魏欣陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：PTEN蛋白原发灶肝转移
