龚中贵
- 作品数：14 被引量：29H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技攻关计划广东省科技厅农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新城疫强、弱毒株分子生物学鉴别诊断方法的建立被引量：2
- 2009年
- 为了快速、敏感、特异地鉴别区分新城疫强、弱毒株,根据新城疫病毒F基因序列设计出并合成两对特异性引物,XsXq、XrXa,用来区分新城疫强毒株和弱毒株,其中XsXa可组合用来扩增新城疫所有毒株,利用这三对引物对新城疫病毒的F基因片段进行多联RT-PCR扩增,并对该多联RT-PCR检测方法进行敏感性及特异性试验。结果表明:这三对引物能特异性地扩增出新城疫强、弱毒株及NDV毒株的F基因片段,大小分别为259bpNDV(F48E9)、522bpNDV(LaSota)、757bp(NDV),该检测方法敏感性高,特异性强,初步建立起快速、敏感、特异的鉴别诊断新城疫强、弱毒株的分子诊断方法。
- 黄淑坚龚中贵黄兴国吴志新蔡丽丽梁小英
- 关键词：新城疫强毒株弱毒株
- 抗禽流感iRNA提取及其部分免疫活性的研究被引量：1
- 2007年
- 为了比较不同方法抽提抗禽流感iRNA的含量、纯度,以及了解iRNA对小鼠的免疫活性,本研究就抗禽流感iRNA提取及其部分免疫活性进行了研究。结果表明:酚-氯仿抽提与Trizol reagent试剂盒抽提的效果差异不显著,所得到的iRNA含量和纯度较高,而冷热酚法抽提的效果则明显不及酚-氯仿法与Trizol reagent试剂盒;小白鼠腹腔注射提取的iRNA制剂,小白鼠生长良好,10 d内未见小白鼠有死亡,由此说明iRNA对小白鼠是安全的;禽流感HI试验及ELISA试剂盒检测iRNA免疫小白鼠血清抗体,结果为阴性,由此说明抽提的iRNA不能诱导机体产生体液免疫。
- 黄淑坚龚中贵冼琼珍顾万军
- 关键词：禽流感IRNA免疫活性抽提
- 新城疫流行株GX-08全基因序列分析及其对鸭的致病性研究被引量：1
- 2011年
- 2008年从患病免疫鸡群中分离到1株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行株,经致病指数测定为强毒株,编号为GX-08。致病性试验表明,GX-08株对鸭具有感染性和致病性。参照GenBank发表的NDV基因序列设计10对特异性引物,采用RT-PCR方法对GX-08株全基因组序列分段进行扩增。拼接后序列分析表明GX-08株的全基因组序列总长为15192 nt,包含6个开放阅读框,分别编码6种蛋白质NP、P、M、F、HN和L。F基因裂解位点处的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株氨基酸序列特点。F基因第47—420位片段基因分型分析结果表明,该流行株属于基因Ⅶ型。
- 王俊峰蔡丽丽吴志新龚中贵黄兴国曹伟胜黄淑坚
- 关键词：新城疫病毒致病性试验遗传进化分析
- 鸭健康养殖的生物安全措施被引量：1
- 2007年
- 生物安全是近年来国外提出的有关集约化生产过程中保护和提高畜禽群体健康状况的新理论,是指将会引起禽病或人畜共患传染病的病原微生物排除(拒绝)在场区外的安全管理措施,是一种以切断传播途径为主要内容的预防疾病发生的生产体系,是保护家禽健康生长,免受致病因子侵袭的综合防御系统。广义的生物安全是指家禽生命的安全,包括家禽的舒适、安宁、福利、健康。生物安全针对所有病原体,核心是预防病原对禽群体造成危害,是疾病综合防治措施的重要环节。在鸭场应用,可以减少病毒、细菌、真菌、原虫、寄生虫、昆虫、啮齿类动物、野生鸟类等致病因子和带有鸭病病原的人群进入养鸭场,有效避免鸭疫病在场与场、户与户之间的传播,最大限度地减少养鸭场(户)的经济损失,从而实现最大的经济效益。所以建立生物安全措施对鸭的健康养殖是非常重要的,这一观念正日益被广大的畜牧生产者接受和重视。
- 黄淑坚蔡丽丽吴志新王政富龚中贵张莹梁家桥陈燕萍
- 关键词：生物安全健康养殖养鸭场养禽场疫病传播番鸭细小病毒
- H5、H9亚型禽流感病毒快速鉴别诊断方法的建立被引量：3
- 2007年
- 为了快速、敏感、特异地鉴别诊断我国目前流行的禽流感,根据H5、H9亚型禽流感病毒HA基因序列的保守区域设计并合成2对特异性引物,利用这2对引物对H5、H9亚型禽流感病毒的HA基因片段进行二联RT-PCR扩增,并对二联RT-PCR检测方法进行了敏感性及特异性试验。结果表明,这2对引物能特异地扩增H5、H9亚型禽流感病毒HA基因片段,大小分别为490bp和686bp;该检测方法敏感性高,特异性强;初步建立起快速、敏感、特异地鉴别检测H5、H9亚型禽流感病毒的分子诊断方法。
- 黄淑坚龚中贵陈秀玲梁小英冼琼珍马春全王林川辛朝安
- 关键词：禽流感病毒H5亚型H9亚型
- 呼吸道病型H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定被引量：5
- 2007年
- 广东省某鸡场发生一起以严重呼吸困难症状、急性死亡为特征的病例,5 000羽122日龄清远麻鸡在一周内连续死亡400多羽。剖检后几乎所有病死鸡支气管充满干酪样物质,导致支气管严重阻塞,气管及支气管黏膜严重出血。病料接种SPF鸡胚绒毛尿囊膜获得一株病毒。通过AGP试验,该病毒能与禽流感标准阳性血清形成明显沉淀线;通过HA试验,该病毒能够凝集鸡红细胞,但此血凝现象不能被抗NDV血清、抗EDSV-76血清、抗H5亚型流感单因子血清、抗H7亚型流感单因子血清所抑制,而能被抗H9亚型禽流感单因子血清所抑制;进而通过RT-PCR方法,最终确诊该病毒为H9亚型禽流感病毒。动物回归试验,攻毒鸡表现与临床发病鸡一致的症状及病理变化,并能再次分离到该病毒。
- 黄淑坚龚中贵陈秀玲梁小英冼琼珍顾万军王林川辛朝安
- 关键词：呼吸道病H9亚型禽流感病毒
- 禽流感、新城疫、传染性支气管炎病毒多联RT-PCR诊断方法的建立被引量：5
- 2006年
- 利用分子生物学方法,选择禽流感病毒的M基因、新城疫病毒的F基因以及传染性支气管炎病毒的N基因,分别在基因序列的保守区域设计1对特异性引物,利用所合成的3对引物对相应靶基因进行RT-PCR扩增,在优化单项RT-PCR条件的基础上,建立禽流感、新城疫、传染性支气管炎病毒多联RT-PCR的检测方法,同时对该检测方法进行敏感性及特异性试验。结果表明:这3对引物分别能特异性地扩增出禽流感病毒的M基因片段、新城疫病毒的F基因片段及传染性支气管炎病毒的N基因片段,大小分别为385 bp、520 bp和748 bp,初步建立了快速、敏感、特异鉴别检测禽流感、新城疫、传染性支气管炎病毒的分子诊断方法。
- 黄淑坚龚中贵陈秀玲梁小英冼琼珍顾万军王林川辛朝安
- 关键词：禽流感新城疫传染性支气管炎
- 支气管炎型H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定被引量：5
- 2006年
- 广东省某鸡场发生一起以严重呼吸困难、急性死亡为特征的病例,5000只鸡在1周内连续死亡400多只。通过病理剖检,几乎所有病死鸡支气管都充满干酪样物质,导致支气管严重阻塞,气管及支气管黏膜严重出血。采集病死鸡的肝脏、脾、肺和气管干酪样物质,病料经处理后通过SPF鸡胚绒毛尿囊膜接种获得一株病毒。通过琼脂凝胶免疫扩散(AGP)试验,该病毒能与禽流感标准阳性血清形成明显沉淀线,初步确定该病毒为禽流感病毒;通过血凝HA试验,该病毒能够凝集鸡红细胞,但此血凝现象不能被抗NDV血清、抗EDSV-76血清、抗H 5亚型流感单因子血清、抗H 7亚型流感单因子血清所抑制,而能被抗H 9亚型禽流感单因子血清所抑制,以及通过H 9亚型流感病毒的RT-PCR分子生物学诊断方法,最终确诊该病毒为H 9亚型禽流感病毒。动物回归试验,攻毒鸡表现与临床发病鸡一致的症状及典型病理变化,患鸡支气管被干酷样物严重阻塞,气管、支气管黏膜较严重出血,通过病料的病毒分离与鉴定,能再次分离到该病毒。
- 黄淑坚龚中贵陈秀玲梁小英冼琼珍顾万军王林川辛朝安
- 关键词：支气管炎H9亚型禽流感病毒
- H5、H7和H9亚型禽流感分子鉴别诊断方法的建立被引量：2
- 2007年
- 为快速、敏感、特异地鉴别诊断现较为重要的禽流感病毒亚型,根据H5、H7和H9亚型禽流感病毒HA基因序列的保守区域设计出并合成3对特异性引物,利用这3对引物对H5、H7和H9亚型禽流感病毒的HA基因片断进行多联RT-PCR扩增,并对多联RT-PCR检测方法进行敏感性及特异性实验。结果表明:3对引物能特异性地扩增出H5、H7和H9亚型禽流感病毒HA基因片段,大小分别为490bp,365bp和686bp;该检测方法敏感性高,特异性强;初步建立起快速、敏感、特异地鉴别检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的分子诊断方法。
- 黄淑坚龚中贵陈秀玲梁小英冼琼珍顾万军王林川辛朝安
- 关键词：H5亚型H7亚型H9亚型
- 繁殖障碍型H3亚型猪流感病毒的分离与鉴定被引量：6
- 2007年
- 于广东惠州市某猪场采集流产死胎的肺组织、胎衣及鼻棉拭子,病料处理后经SPF鸡胚绒毛尿囊腔接种获得1株有血凝(HA)活性的病毒,通过AGP试验初步确定为猪流感流感病毒;但此病毒的血凝现象不能被抗H1亚型猪流感单因子血清、抗H5亚型猪流感单因子血清、抗H7亚型猪流感单因子血清、抗H9亚型猪流感单因子血清抑制,而能被抗H3亚型猪流感单因子血清抑制;通过H3亚型猪流感病毒RT-PCR分子生物学诊断,最终确定该病毒为H3亚型猪流感病毒。动物回归试验结果显示,攻毒小鼠出现精神萎靡、厌食、嗜睡、被毛松乱、呼吸较急促,攻毒后7 d采集小鼠血清进行检测,HI效价为3log2～4log2;剖检发现病毒性肺炎,且能从病料中再次分离到H3亚型猪流感病毒。
- 黄淑坚龚中贵吴志新梁小英冼琼珍
- 关键词：繁殖障碍型H3亚型猪流感病毒
