黄静
- 作品数:13 被引量:61H指数:6
- 供职机构:天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:“十一五”国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- pta基因敲除对L-色氨酸发酵的影响被引量:9
- 2011年
- 【目的】探究pta基因缺失对大肠杆菌发酵生产L-色氨酸的影响。【方法】运用Red重组技术敲除pta基因,构建pta缺失株E.coli TRTHΔpta。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,考察重组菌E.coliTRTHΔpta发酵生产L-色氨酸过程中生物量、L-色氨酸产量、有机酸含量、发酵液中NH 4+浓度及变化。建立了大肠杆菌合成L-色氨酸的代谢流平衡模型,应用MATLAB软件计算出E.coli TRTH及其pta缺失株发酵中后期代谢网络的代谢流分布。【结果】发酵结果显示,pta缺失株能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了52.7%和46.8%。有机酸含量分析结果表明,pta缺失株乙酸含量显著降低,只有2.5 g/L,仅为亲株的19.5%;丙酮酸和乳酸的含量有一定增加。多参数分析结果显示,pta缺失株发酵过程中NH 4+浓度较亲株降低33.2%。pta缺失株发酵生产L-色氨酸的代谢流量分析结果表明,EMP途径的代谢流量降低7.4%,PP途径的代谢流量增加8.4%,TCA循环的代谢流量降低32.2%。【结论】pta基因的缺失导致在发酵生产L-色氨酸过程中代谢流发生变化,乙酸含量的显著降低解除了乙酸对菌体生长和产物生成的抑制,使得菌体生物量和L-色氨酸产量大幅提高。
- 黄静史建明刘倩徐庆阳谢希贤温廷益陈宁
- 关键词:基因敲除乙酸L-色氨酸
- IPTG诱导浓度、温度及时间对重组苏氨酸脱水酶基因表达的影响
- 以重组苏氨酸脱水酶工程菌E.coliBL21 (DE3)/pETilvA作为研究对象.利用IPTG作为诱导剂,分析比较不同诱导条件对表达产物的影响,以确定最佳诱导条件.结果表明:最佳诱导温度为30℃:IPTG浓度为0.0...
- 史建明徐兰兰黄静徐庆阳谢希贤
- 关键词:苏氨酸合成工艺脱水酶基因表达诱导剂
- 包结富集-光催化型空气净化纸
- 包结富集-光催化型空气净化纸,发明属于空气净化领域。其是由纳米二氧化钛和环糊精作为涂料组分添加到涂料中,并将该涂料涂布在纸质基材上,干燥固化即得包结富集-光催化型空气净化纸。这种包结富集-光催化型空气净化纸用作室内装饰壁...
- 刘泽华黄静高玉杰
- 文献传递
- NH_4^+对L-色氨酸发酵的影响被引量:6
- 2011年
- 目的:探究NH4+浓度对大肠杆菌E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸的影响。方法:通过外源添加试验,利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,考察E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸过程中生物量、L-色氨酸产量、有机酸含量、耗糖速率、发酵液中NH4+浓度及质粒稳定性变化。建立了大肠杆菌合成L-色氨酸的代谢流平衡模型,应用MATLAB软件计算出E.coli TRTH发酵中后期代谢网络的代谢流分布。结果:发酵结果显示,利用NaOH和氨水混合补料,控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,菌体能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了12.16%和19.80%。随着NH4+浓度的增加,发酵液中丙酮酸、乳酸及乙酸浓度均略有增加,细胞质粒稳定性下降。控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸的代谢流量分析结果表明,EMP途径的代谢流量降低7.31%,PP途径的代谢流量增加7.14%,TCA循环的代谢流量降低22.04%。结论:高浓度的NH4+导致菌体生长提前结束,耗糖速率降低,产酸受阻,控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,解除了NH4+对菌体生长和产物生成的抑制,使得菌体生物量和L-色氨酸产量大幅提高,实现了高密度发酵培养的目的。
- 黄静史建明霍文婷徐庆阳谢希贤温廷益陈宁
- 关键词:大肠杆菌NH4+L-色氨酸高密度发酵
- 枯草芽孢杆菌cdd基因敲除及对胞苷发酵的影响被引量:8
- 2010年
- 目的:通过敲除出发菌株上的胞苷脱氨酶基因,阻断嘧啶代谢通量由胞苷流向尿苷和尿嘧啶,选育胞苷产生菌。方法:采用同源重组的方法敲除枯草芽孢杆菌TS8的胞苷脱氨酶基因cdd,并通过遗传稳定性实验验证其缺失标记和胞苷产量,通过摇瓶发酵实验对比出发菌株和缺失株的产苷水平。结果:cdd基因缺失菌株TSb发酵72h,发酵液中胞苷产量达到1.72g/L,与原始菌株相比提高了44.19%,且遗传性状稳定。结论:cdd基因的缺失可有效阻断嘧啶代谢通量由胞苷流向尿苷和尿嘧啶,提高胞苷产量。
- 苏静黄静谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词:枯草芽孢杆菌胞苷脱氨酶同源重组胞苷
- 葡萄糖浓度对大肠杆菌发酵L-色氨酸的影响被引量:12
- 2010年
- 利用30L自控发酵罐研究了大肠杆菌TRJTH0709产L-色氨酸的发酵工艺。考察了初始葡萄糖浓度和发酵过程中葡萄糖维持浓度对菌体比生长速率、质粒稳定性、乙酸含量、菌体生物量及L-色氨酸产量的影响。最终确定:初始葡萄糖浓度为20g/L,葡萄糖维持浓度采用葡萄糖限制流加培养方式。根据溶氧响应信号的特征反馈控制葡萄糖的流加速率,可将菌体比生长速率控制在较低水平,有效地减少了发酵过程中乙酸的产生及提高了质粒稳定性,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,菌体生物量和L-色氨酸分别为50.21g/L和33.50g/L。
- 程立坤赵春光黄静徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词:大肠杆菌L-色氨酸
- 氮源对L-色氨酸发酵的影响被引量:12
- 2011年
- 以L-色氨酸生产菌E.coli TRTH为供试菌株,研究了氮源对L-色氨酸发酵的影响。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,确定了最佳有机氮源和无机氮源分别为酵母粉和硫酸铵,进一步确定酵母粉和硫酸铵的最佳用量为1 g/L和10 g/L,最后采用NaOH和氨水混合补料控制发酵液中NH4+浓度在120 mmol/L以下,发酵38 h,菌体生物量和L-色氨酸产量分别达到53.42 g/L和32.6 g/L,实现了大肠杆菌的高密度培养。
- 黄静史建明霍文婷徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词:L-色氨酸氮源分批补料发酵
- 代谢副产物乙酸对L-色氨酸发酵的影响被引量:22
- 2010年
- 分析了重组大肠杆菌(E.coli TRTH/pSV-709)发酵生产L-色氨酸的发酵过程,检测结果表明发酵液中有大量代谢副产物乙酸的积累。利用外源添加试验研究了乙酸对L-色氨酸发酵的影响,结果表明乙酸浓度高于2g/L时对L-色氨酸生产菌的生长和产酸均有抑制作用。分析了乙酸的产生机制,并采取了调节溶氧水平、确定合适初始葡萄糖浓度、限制葡萄糖流加及控制菌体比生长速率等措施来减少乙酸的生成。在优化条件下,乙酸含量与原工艺相比降低了51.35%,菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了51.07%和46.54%,实现了高密度发酵培养的目的。
- 程立坤黄静秦永锋徐庆阳谢希贤温廷益陈宁
- 关键词:大肠杆菌乙酸L-色氨酸
- L-色氨酸生产菌质粒稳定性工艺研究被引量:2
- 2011年
- 从工程应用的角度研究L-色氨酸生产菌E.coliTRJH的质粒稳定性,采用30L自动控制发酵罐观察选择压力、温度、溶氧、酵母抽提物和葡萄糖浓度等条件对质粒稳定性的影响。结果表明,该菌具有分裂不稳定性,上述培养条件的变化均会对该菌的质粒稳定性产生较大影响。
- 黄静程立坤刘倩徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词:L-色氨酸发酵质粒稳定性
- 纳米二氧化钛的制备及其在造纸工业中的应用
- 介绍了纳米二氧化钛的制备方法(气相法、固相法和液相法)及其在造纸工业中的应用,并对各个制备方法进行了优劣分析,最后提出纳米二氧化钛的发展方向及其在特种纸中的应用前景。
- 严安刘泽华黄静
- 关键词:纳米二氧化钛造纸工业光催化特性