黄琨 作品数:7 被引量:7 H指数:2 供职机构: 河南大学生命科学学院 更多>> 相关领域: 理学 化学工程 一般工业技术 生物学 更多>>
镍离子增强辣根过氧化物酶法合成联苯研究 2011年 通过2 mM Ni2+孵化辣根过氧化物酶,可制备活化辣根过氧化物酶(Ni2+-HRP),实验验证了Ni2+-HRP的活性和稳定性,并对Ni2+-HRP催化2-二叔丁基苯酚反应的生成物进行了GC/MS,HPLC和核磁共振鉴定,确定为2,4,2',4'-四羟基-5,5'-二叔丁基联苯,是一种几乎无毒的化合物,可作为制药前体的使用。 肖保林 洪军 王玮 黄琨 杨卫云 赵莹雪 穆萨维姆瓦赫迪关键词:镍离子 辣根过氧化物酶 联苯 无金属卟啉置换辣根过氧化物酶辅基研究 被引量:1 2011年 不同结构的卟啉插入去辅基辣根过氧化物酶(apo-HRP)所得重构酶具有类过氧化物酶的催化活性。采用紫外分光光度法和荧光光度法对这些重构酶进行研究。结果表明TPyP-apo-HRP比其他卟啉类插入重构蛋白具有的类过氧化物酶催化活性高。 黄琨 王玮 杨卫云 赵莹雪 肖保林 洪军 穆萨维姆瓦赫迪关键词:卟啉 辣根过氧化物酶 氢供体组与辣根过氧化酶活性光谱研究 2011年 对邻苯二酚-苯胺和苯酚-氨基安替吡啉构成的两组测定HRP酶活性的体系进行了研究和比较。紫外可见光光谱和高效液相色谱分析表明,在HRP催化过程中,邻苯二酚-苯胺氢供体对会生成为一种粉红色产物,该产物最大吸收波长在510 nm,可用于HRP的活性测量。且与常规使用的苯酚-氨基安替吡啉氢供体对的情况相比,具有更高的灵敏度、更低的检测限值和很好的重复性,在对HRP分别进行20次酶活测量,所得相对标准偏差仅为2.9%。使用邻苯二酚-苯胺氢供体对的方法可计算得到酶动力学参数Km(12.5 mM)和Vmax(12.2 mM min-1mg-1)。 王玮 黄琨 杨卫云 赵莹雪 肖保林 洪军 穆萨维姆瓦赫迪关键词:辣根过氧化物酶 邻苯二酚 苯胺 酶活测定 血红蛋白变性与保护 被引量:2 2011年 应用紫外-可见光分光光度法,研究了十二烷基硫酸钠(SDS)导致的牛血红蛋白变性及β-环糊精对血红蛋白与SDS变性过程的影响。研究表明,在蛋白质等电点以下不同pH的PBS缓冲液中,蛋白变性一半所添加的SDS浓度即Cm呈一定的规律性;β-环糊精对蛋白质与SDS相互作用的变性过程有很大的影响,使得牛血红蛋白的Cm值增大,说明β-环糊精对于牛血红蛋白稳定性有一定的保护作用,并且β-环糊精浓度越大,保护作用越强。 李晓静 霍冠南 王玮 黄琨 肖保林 洪军 穆萨维姆瓦赫迪A.A关键词:十二烷基硫酸钠 牛血红蛋白 光谱和电化学方法研究自组装纳米簇模拟过氧化物酶 被引量:4 2012年 利用细胞色素c与Nafion,通过自组装方式,构建了纳米簇模拟过氧化物酶;利用电子透射显微镜、圆二色谱仪、紫外可见光分光光度仪及电化学工作站等设备测量模拟酶结构变化、酶促动力学参数以及电化学特性;在50 mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液(pH 10.0)中,测得模拟酶米氏常数Km、催化速率及催化效率分别为2.5μmol/L、0.069 s"1、0.028±0.005(μmol/L)"1s"1,其催化效率为天然辣根过氧化物酶的39%±5%,该模拟酶具有很好的稳定性和活性,能够替代辣根过氧化物酶。该模拟酶可以固定在功能化多壁纳米管与纳米金复合材料修饰玻碳电极上,在50 mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液(pH 7.0)中测得模拟酶与电极之间电子迁移速度常数ks为0.65 s"1。利用循环伏安法测量模拟酶催化浓度为0.02~10 nmol/L的H2O2,其阴极峰电流随H2O2浓度增加而增大,并且得出模拟酶催化H2O2检出限为0.05 nmol/L,电化学表观米氏常数Kmapp为2.3×10"10mol/L。 王玮 洪军 黄琨 肖保林 杨卫云 赵莹雪 高云飞关键词:自组装 纳米簇 模拟酶 光谱学 电化学 甜菜M14品系特异表达基因编码蛋白性质研究 <正>甜菜M14品系具有无融合生殖特性。研究甜菜M14品系特异表达基因M14-263和M14-341编码蛋白的性质,为进一步将两基因转化入模式植物,解开基因M14-263和M14-341的功能之谜奠定基础。本研究以pET... 黄琨 刘宇 李海英 洪军关键词:原核表达 无融合生殖 亲水性 文献传递 十二烷基磺酸钠纳米胶团-细胞色素c自组装高效纳米结构过氧化物酶 被引量:3 2012年 用阴离子表面活性剂十二烷基磺酸钠与细胞色素c自组装的方法构建了一种纳米超分子结构,观察到其具有显著的过氧化物酶活性,且在pH为10.5时达到最高。这种纳米结构过氧化物酶的催化效率为0.0219μmol/L.s。电化学方法测得其电子传递速率常数ks为0.586 s-1。这种以自组装方法构建的超分子结构不仅具有较高活性,可在天然过氧化物酶自杀性失活底物浓度较高时运用,且可固定化于电极上,实现与电极间的直接电子传递。 黄琨 洪军 王玮 肖保林 赵莹雪 杨卫云 高云飞关键词:细胞色素C 直接电化学