黄启星
- 作品数：37 被引量：84H指数：5
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 木薯苹果酸脱氢酶基因克隆和表达分析被引量：4
- 2013年
- 为从木薯块根中获得苹果酸脱氢酶(MDH)基因,并研究其在转录水平的表达变化规律,利用RACE技术从木薯"华南8号"块根中克隆得到了苹果酸脱氢酶基因,其cDNA全长1 175 bp,包含999 bp的开放阅读框,共编码332个氨基酸。从木薯"华南8号"中获得的MDH氨基酸序列,与其它物种的该序列相似度达84%-94%,包含细胞质苹果酸脱氢酶中高度保守的NAD结合基元"TGAAGQI"和催化基元"IWGNH"。木薯MDH基因与块根淀粉合成相关,在块根发育前期表达量较低,膨大期表达量较高,膨大后期表达量逐渐降低。
- 尹奇仝征贺庭琪王力敏黄启星郭运玲孔华王旭初郭安平
- 关键词：木薯块根苹果酸脱氢酶淀粉合成
- 不同品种木薯叶绿体比较蛋白质组学初步研究被引量：5
- 2013年
- 以"华南8号"木薯(SC8)和"华南124号"木薯(SC124)的叶绿体作为研究材料,采用改进酚抽提法提取蛋白,通过单向SDS-PAGE电泳和双向SDS-PAGE电泳,比较不同木薯品种叶绿体的蛋白表达谱,并对表达的差异蛋白进行MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得15个差异蛋白,其中有6个蛋白在SC124木薯叶绿体中表达较高,9个蛋白表达很低。对蛋白进行功能分析,发现差异蛋白主要参与蛋白翻译后修饰、周转、分子伴侣、碳水化合物运输等过程。通过RT-PCR验证了木薯核酮糖1,5-二磷酸羧化酶、ATP合酶β亚基的基因表达情况,结果表明,ATP合酶β亚基基因表达与蛋白质的表达比较一致,而核酮糖1,5-二磷酸羧化酶基因与蛋白质表达变化不一致。
- 贺庭琪徐兵强郭安平王力敏王丹黄启星仝征尹奇王旭初
- 关键词：木薯叶绿体比较蛋白质组学质谱RT-PCR
- 木薯淀粉分支酶活性测定方法比较研究被引量：2
- 2016年
- 旨在找到木薯淀粉分支酶活性有效测定方法。以成熟期的木薯块根为材料,对现有的淀粉分支酶活性测定方法从酶液提取液、酶液浓度、反应体系、反应时间和酶反应终止方式作了比较和改进。木薯淀粉分支酶活性测定的有效方法:取0.5 g成熟木薯块根,加入提取液研磨成浆,离心后上清为粗酶液,粗酶液稀释后加0.5%可溶性淀粉,37℃恒温水浴中保温10 min后置沸水浴中终止反应,再加碘液显色反应10 min后测定波长660 nm处吸光度值,每降低一个百分率的碘蓝值即为木薯淀粉分支酶SBE的一个活性单位(U)。改良后的淀粉分支酶活性测定方法能很好的区分木薯不同株系淀粉分支酶活性差异,实验重复性好,操作简单、快捷。
- 郭运玲孔华左娇黄启星贾瑞宗郭静远周霞郭安平
- 关键词：木薯淀粉分支酶活性
- 南繁区水稻病毒病调查与鉴定被引量：2
- 2016年
- 南繁区是中国传统的冬季育制种基地,其中水稻是主要的育制种作物之一。2014年1月至2015年11月,连续两年对南繁区三亚、陵水、乐东等地水稻病毒病的发生情况进行6批次调查。分子检测结果显示,为害南繁区水稻的RNA病毒主要有3种,分别为水稻齿叶矮缩病毒(RRSV)、水稻南方黑条矮缩病毒(SRBSDV)和水稻草状矮缩病毒(RGSV),检出率分别为30.46%,7.61%和0.51%。RRSV为害最为严重,在个别田块发病率达到60%,造成绝收。结果显示在南繁育制种区域水稻病毒病冬、春季的发生率高于夏、秋季;三亚、陵水、乐东等地稻田的病毒病发病率大于其它地区。该研究使我们对海南南繁区水稻病毒病的发生形成初步的认识,为将来进一步探究该地区水稻病毒病的发生规律打下基础。
- 赖丁王黄启星张雨良孔华罗英平林钰刘志昕郭安平
- 关键词：水稻病毒RT-PCR南繁
- 双波长法测定木薯的直链和支链淀粉含量被引量：15
- 2016年
- 直链淀粉和支链淀粉含量及其比例是木薯淀粉品质的重要指标。采用双波长法对30个木薯株系的直、支链淀粉的含量进行了测定,根据碘分别与直链和支链淀粉反应生成复合物的吸收光谱,我们最后确定了直链淀粉的和支链淀粉的参比波长和测定波长分别是609和469.5 nm、542和721 nm。根据回归方程得到了30个木薯株系的直链淀粉和支链淀粉的含量。本实验中用于测定木薯的直链淀粉浓度在0～26μg/m L,支链淀粉浓度在0～100μg/m L范围内符合比耳定律。结果表明：SC8不同株系的直链淀粉含量变化范围：14.879%～21.905%,支链淀粉含量变化范围：47.864%～56.955%;SC6不同株系的直链淀粉含量变化范围：15.494%～24.726%,支链淀粉含量变化范围44.292%～57.465%。该方法准确性高、重复性好、效率高,工作量小,适于批量木薯样品分析。
- 郭运玲孔华左娇贾瑞宗黄启星郭静远周霞郭安平
- 关键词：木薯双波长法直链淀粉支链淀粉
- 甘蔗EST-SSR标记的开发和多样性分析被引量：2
- 2012年
- 运用生物信息学分析方法对甘蔗(Saccharum spp.)的282 809条表达序列标签(ESTs)进行分析,共获得Unigene 138 590条,发掘出分布于10 086条Unigene的10 505个微卫星(EST-SSR)位点,SSR发生频率为7.26%,平均9.22 kb出现1个SSR。在7个杂交甘蔗品种中,三核苷酸基元的SSR数量最多(74.95个/Mb),其次为二核苷酸基元的SSR(22.95个/Mb),二者占总数的90.27%。以CCG/CGG、AG/CT为重复基元的SSR是最常见的EST-SSR类型,富含G/C的EST-SSR占据极明显的优势。与拟南芥和水稻cDNA序列内SSR的比较表明,富含G/C的SSR可能是禾本科植物SSR的一个共同特点。研究发现,SSR在EST与基因组序列之间以及在不同甘蔗品种之间的分布存在差别,具有丰富的多样性。此外,从EST数据分析获得杂交甘蔗品种的16个保守基因,从中发掘了9个SSR位点。最后,利用Primer3和e-PCR软件设计了一批具有物种特异性和通用性的EST-SSR PCR引物,相关数据可以通过http://59.50.66.49/SSR/sugarcane/sugarcane.EST-SSR.tgz链接从因特网下载。该研究结果可为开展甘蔗遗传多样性分析、种质资源鉴定和分子辅助育种提供参考。
- 黄启星张雨良王俊刚伍苏然张树珍郭安平
- 关键词：甘蔗ESTSSR微卫星
- 高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证
- 2012年
- 采用同源克隆技术获得侵染甘蔗高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、CP、PIPO基因片段。将该基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定,证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导入Y2H Gold酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性。含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用。研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高粱花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供基础。
- 张雨良黄启星张树珍王健华余乃通刘志昕
- 关键词：CP酵母双杂交诱饵载体
- 硝酸银对根癌农杆菌介导的木薯遗传转化的影响
- 2013年
- 旨在提高木薯遗传转化效率,以成熟培养10-15 d的华南木薯SC8品种的胚状体子叶为外植体,研究硝酸银在根癌农杆菌介导的木薯遗传转化中的影响。结果表明,硝酸银对木薯SC8胚状体子叶愈伤形成有明显的抑制作用,对不定芽的分化有显著的促进作用。硝酸银的浓度在2-8 mg/L,对未经农杆菌处理的SC8胚状体子叶不定芽的分化率从58.5%提高到87.5%;愈伤组织形成率从92%下降到15.3%。对经农杆菌处理的SC8胚状体子叶不定芽的分化率从55.3%提高到85.3%;愈伤组织形成率从87.5%下降到8.5%。同时发现,经农杆菌转化后不定芽诱导所需硝酸银的最适浓度高于未经农杆菌处理的不定芽诱导所需硝酸银最适浓度,前者为8 mg/L,后者为6 mg/L。硝酸银对木薯SC8的遗传转化有促进作用。
- 郭运玲尹奇孔华黄启星左娇贺立卡郭安平
- 关键词：硝酸银木薯不定芽诱导
- 一种高效提取热带植物DNA的方法
- 本发明公开了一种高效提取热带植物DNA的方法，取热带植物的叶片、根、茎或果实，粉碎，置于无菌容器中，加入本发明的裂解缓冲液，混匀；调节温度为60-70℃进行水浴反应20-40min，取反应后混合溶液离心，取上清液，加入异...
- 黄启星王旭初孔华郭运玲郭安平
- 文献传递
- 海南地区番木瓜花叶病病原的分子鉴定与多样性分析被引量：1
- 2014年
- 番木瓜环斑病毒(Papaya ring spot virus,PRSV)和番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf-distortion mosaic virus,PLDMV)是热带、亚热带地区严重威胁番木瓜农业生产的主要病害。本研究对27份疑似番木瓜花叶病病叶样品进行分子鉴定,提取病叶总RNA,反转录获得对应的cDNA,根据PRSV病毒的CP、P1、Hc-Pro和NIb基因序列和PLDMV病毒的CP基因序列设计特异性引物进行PCR检测和测序分析。研究发现PRSV感染20例(74.1%),PLDMV感染3例(11.1%),PRSV和PLDMV交叉感染的样品1例(3.7%)。多样性分析结果表明,海南地区PRSV病毒存在3个株系,株系之间出现明显分化;海南地区PLDMV病毒与日本和台湾地区报道的PLDMV病毒株系有共同的起源。研究结果表明PRSV和PLDMV是海南地区番木瓜花叶病的主要病原,其中PRSV病毒3个株系之间P1基因同源性在95%以下,这可为后续研究构建抗PRSV和PLDMV的双价表达载体提供数据支持。
- 张雨良黄启星朱丽娣孔华曾会才姜浩元刘志昕
- 关键词：番木瓜PRSV
