高飞
- 作品数:7 被引量:16H指数:3
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- Smac/DIABLO过表达对人结肠癌细胞凋亡的影响被引量:3
- 2007年
- 背景:Smac/DIABLO是一种线粒体促凋亡蛋白,研究表明其在结肠癌细胞中表达降低。目的:研究Smac/DIABLO对人结肠癌细胞生长的影响及其可能的促凋亡机制。方法:将pcDNA3.1-Smac质粒或pcDNA3.1空质粒以脂质体转染入人结肠癌细胞株LoVo,以未转染细胞作为空白对照。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Smac mRNA表达,蛋白质印迹法检测Smac蛋白表达,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态学变化,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪分析检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞仪分析检测细胞周期,Caspase-3分光光度法检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果:pcDNA3.1-Smac质粒转染12h后,LoVo细胞SmacmRNA表达增加;转染48h后,Smac蛋白表达增加。转染48h后,Smac组LoVo细胞呈现明显凋亡细胞核形态学特征,凋亡率显著高于LoVo细胞组和空质粒组,G0/G1期细胞增多,Caspase-3活性亦显著高于空质粒组(P<0.05)。结论:Smac/DIABLO可激活caspase-3途径,抑制人结肠癌细胞生长,促进细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期。
- 高飞郭文王继德
- 关键词:SMAC/DIABLO结肠肿瘤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞凋亡细胞周期
- 线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO及其与肿瘤的关系
- Smac/DIABLO即第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI的IAP直接结合蛋白,是最新发现的一种线粒体促凋亡蛋白,存在于线粒体并通过拮抗凋亡抑制蛋白(LAPs)的作用激活caspase-9和caspase-3...
- 高飞郭文
- 关键词:肿瘤凋亡抑制蛋白
- 文献传递
- 线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO及其与肿瘤的关系被引量:8
- 2007年
- Smac/DIABLO即第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI的IAP直接结合蛋白,是近年发现的一种线粒体促凋亡蛋白,存在于线粒体并通过拮抗凋亡抑制蛋白(IAPs)的作用激活caspase-9和caspase-3而诱导细胞凋亡,并可促进肿瘤坏死因子相关的凋亡促使配体(TRAIL)诱导的凋亡。Smac/DIABLO还可以通过其N-或C-末端促进肿瘤细胞凋亡、增强肿瘤免疫及影响肿瘤细胞周期等机制抗肿瘤,并且增加肿瘤对放化疗的敏感性。本文主要就Smac/DIABLO的结构功能、作用机制及与肿瘤发生和治疗的关系作一综述。
- 高飞郭文
- 关键词:肿瘤SMAC/DIABLO线粒体蛋白质类凋亡抑制蛋白类
- Smac/DIABLO和Survivin shRNA联合转染对大肠癌Lovo细胞凋亡的影响被引量:5
- 2008年
- 背景与目的:Smac/DIABLO是一种新发现的促凋亡蛋白,通过阻滞凋亡抑制蛋白(包括Survivin),激活caspase-9和caspase-3而发挥作用。本实验研究线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和沉默凋亡抑制基因Survivin联合应用对大肠癌细胞凋亡的影响及其促凋亡机制。方法:构建Survivin的shRNA-EGFP质粒和Smac-pcDNA3.1质粒,将其用脂质体单、共转染至大肠癌Lovo细胞;Western blot检测survivin基因和Smac基因的蛋白表达;Ho-chest33258染色观察凋亡核形态学变化,并粗略计数凋亡率;流式细胞仪PI单染测凋亡周期;caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3活性。结果:转染48h后单、共转染组的Smac蛋白水平增加而Survivin蛋白水平下降;单、共转染组Hochest33258染色可见明显的凋亡核形态学变化,凋亡率高于各对照组,且共转染组凋亡率(18.5±1.7)%高于单转染组(9.6±1.8)%、(15.0±0.3)%;Smac组G0/G1期增多为(51.0±6.2)%,而Survivin shRNA组S期细胞增多为(53.3±1.3)%(P<0.05);caspase-3活性比Smac和Survivin shRNA共转组为(169±3)%,高于Smac组(143±5)%、Survivin shRNA组(152±6)%,且都高于各对照组(P<0.05)。结论:Smac/DIABLO和Sur-vivin shRNA协同作用激活caspase-3途径,抑制大肠癌Lovo细胞生长而促进细胞凋亡,Smac阻滞细胞周期于G0/G1期而RNA干扰Survivin后细胞周期阻滞于S期。
- 高飞郭文王继德熊英
- 关键词:SMAC/DIABLOSURVIVINSHRNA大肠癌凋亡
- Smac/DIABLO过表达对人结肠癌细胞凋亡的影响
- 背景:Smac/DIABLO是一种线粒体促凋亡蛋白,研究表明其在结肠癌细胞中表达降低。
目的:研究Smac/DIABLO对人结肠癌细胞生长的影响及其可能的促凋亡机制。
方法:将pcDNA3.1-Sma...
- 高飞郭文王继德
- 关键词:结肠肿瘤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞凋亡细胞周期
- 文献传递
- Smac/DIABLO和Survivin shRNA联合转染对大肠癌Lovo细胞凋亡的影响
- 背景和目的:Smac/DIABLO是一种新发现的促凋亡蛋白,通过阻滞凋亡抑制蛋白(包括Survivn),激活caspase-9和caspase-3而发挥作用。本实验研究线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和沉默凋亡抑制...
- 高飞郭文王继德熊英
- 关键词:大肠癌CASPASE-3
- 文献传递
- 线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO及其与肿瘤的关系
- Smac/DIABLO即第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI的IAP直接结合蛋白,是最新发现的一种线粒体促凋亡蛋白,存在于线粒体并通过拮抗凋亡抑制蛋白(IAPs)的作用激活caspase-9和caspase-3...
- 高飞郭文
- 关键词:SMAC/DIABLO凋亡IAPS肿瘤
- 文献传递