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200亿芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的研制被引量：37: 2010年; 以枯草芽孢杆菌B99-2为研究对象,通过对填料、润湿剂、分散剂、稳定剂、UV保护剂的筛选,确定了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的最佳配方。最佳配方为填料硅藻土10%,分散剂PVA7.2%,润湿剂D4254.8%,稳定剂CMC-Na2.0%,保护剂FWA0.1%。测定结果表明:枯草芽孢杆菌可湿性粉剂芽孢含量达2.0×1010cfu/g,悬浮率79%,润湿时间48s,热贮分解率23.6%,产品各项指标均达到国家标准。; 王剑王楠高观朋尹丹韩王伟; 关键词：枯草芽孢杆菌可湿性粉剂稳定性

利用传统和分子生物学方法相结合探索生防菌对黄瓜根围土壤真菌群落的影响: 真菌在土壤的生态环境中具有十分重要的作用,例如降解植物残体、抑制病原菌等等。真菌群落的多样性和丰富性甚至可以作为评价植物根围土壤微生态健康与否的重要指标。微生物农药具有十分广阔的应用前景,但是关于微生物农药对土壤微生物群...; 高观朋; 关键词：荧光假单胞菌枯草芽孢杆菌 DGGE T-RFLP; 文献传递

三重PCR检测草莓灰霉病菌、炭疽病菌和黄萎病菌被引量：18: 2010年; 【目的】探索和优化检测条件,建立同时检测草莓灰霉病菌Botrytiscinerea,炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides和黄萎病菌Verticillium dahliae的三重PCR检测体系,为3种病害的早期快速诊断和鉴定提供技术和方法。【方法】选择可以组合的3种病原菌特异引物,研究多重PCR的影响因素,优化PCR退火温度,采用正交试验方法,以3个引物组、TaqDNA聚合酶、dNTP和Mg2+六因素三水平优化多重PCR体系。【结果】建立并验证适合上述草莓主要病原菌的三重PCR最佳检测体系,可分别扩增出729、539和450bp的特异条带,最适退火温度为50℃,25μL的反应体系中含有0.32μmol·L-1C729+/-、0.032μmol·L-1DB19/DB22、0.32μmol·L-1CgInt/ITS4、1.5UTaq聚合酶、0.15mmol·L-1dNTP、1.6mmol·L-1MgCl2。【结论】利用上述引物组合和反应体系进行三重PCR检测,能够快速从田间发病植株和土壤中将草莓灰霉病菌、草莓炭疽病菌和草莓黄萎病菌检测出来,灵敏度可以达到10pg菌丝DNA。; 王楠王剑尹丹韩高观朋王伟; 关键词：草莓灰霉病菌炭疽病菌黄萎病菌分子检测三重PCR

影响土壤微生态的因素及分子生物学技术在其研究中的应用: 土壤中包含了数以亿计的细菌、真菌、放线菌、藻类等,这些微生物在土壤生态循环的各个环节中扮演着重要的角色.但是土壤本身所处的环境并不是一成不变的,内在和外在条件的变化会对土壤微生物造成一定的影响.随着科学技术的发展,人们对...; 高观朋尹丹韩王伟; 关键词：土壤微生态微生物群落分子生物学技术生物多样性; 文献传递

生防木霉菌Th2和T4对甜瓜根围土壤微生态的影响被引量：8: 2009年; 利用平板计数、微生物量碳和末端标记限制性片段长度多态性分析(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)相结合的方法研究了2株生防菌哈茨木霉Th2和T4对甜瓜根围土壤微生态的影响。结果表明,生防菌Th2和T4对根围土壤细菌有明显的促生作用,而对真菌和放线菌有明显的抑制作用。T-RFLP数据统计学分析表明,Th2和T4的引入可以增加土壤细菌的多样性。其中对开花期土壤细菌菌群影响最显著,Th2对TRF251和TRF513菌群有显著的促生作用,含量是对照的3.7倍和4.5倍,T4对TRF251和TRF513菌群含量也比对照高4倍和5.6倍,而2株生防菌对TRF60菌群均有显著的抑制作用,其含量分别为对照的51.6%和64.3%。在果熟期生防菌对土壤细菌菌群的影响减弱,表明土壤的缓冲功能发挥了作用。研究结果还表明,Th2和T4对土壤细菌菌群有着相似的促生和抑制作用,且不会破坏土壤微生态的稳定性。; 郁雪平朱伟杰高观朋王伟; 关键词：生防木霉菌土壤微生物土壤微生物量碳

瓜黑星病菌、枯萎病菌和蔓枯病菌的三重PCR检测被引量：10: 2010年; 通过测定黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)rDNA的ITS序列,比对近缘种及瓜类几种重要病原菌的ITS序列,设计出特异性引物HX-1/HX-2,经过对引物HX-1/HX-2PCR条件的优化,可以扩增出1条190bp的黄瓜黑星病菌特异性DNA条带,灵敏度达到1pg/μL。进一步将引物HX-1/HX-2和瓜类枯萎病菌、瓜类蔓枯病菌特异检测引物Fn-1/Fn-2、Mn-1/Mn-2组合,建立三重PCR体系,可一次检测出瓜类黑星病菌、瓜类枯萎病菌、瓜类蔓枯病菌3种瓜类植物重要的病原菌。建立了可以应用于田间瓜类黑星病菌PCR检测技术和瓜类主要病害三重PCR检测技术,对瓜类病害的诊断和防治具有重要的指导作用。; 高永洋王楠高观朋王伟; 关键词：分子检测三重PCR

生防菌哈茨木霉T4对黄瓜根围土壤细菌群落的影响被引量：21: 2012年; 【目的】评价生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T4对根围土壤细菌群落的影响,为生防菌田间应用的生态安全提供依据。【方法】结合DGGE技术与T-RFLP方法,综合考察引入生防菌哈茨木霉T4后黄瓜根围土壤细菌群落变化。【结果】在引入生防菌的14—56 d内(黄瓜整个生育期),木霉对根围土壤细菌群落可产生显著影响,并持续一段的时间,随后逐渐减弱。表现为对蓝细菌、β-变形细菌、葡萄球菌、伯克霍尔德菌、沙雷氏菌、酸杆菌和一些不可培养细菌的有效抑制作用,对芽孢杆菌、土壤杆菌、芽单胞菌的明显促进作用。但到70 d时,即收获后2周,检测不到木霉对细菌群落影响。【结论】DGGE和T-RFLP序列分析技术相结合研究生防菌对土壤细菌群落的影响,既能全面描述土壤细菌群落结构变化,还可以初步定性描述变化细菌的种类信息。生防菌哈茨木霉T4的引入对土壤细菌群落产生短期影响,不会长期对土壤细菌群落稳定构成威胁。; 尹丹韩高观朋夏飞王伟; 关键词：土壤细菌群落 T-RFLP DGGE

黄瓜黑星病拮抗菌抑菌谱及产芽孢培养工艺研究被引量：5: 2011年; 以黄瓜根际土壤中分离到的1株对黄瓜黑星病有极强防效的生防菌株B99-2为研究对象,对其抑菌谱进行测定,并对其产芽孢的培养工艺进行了研究。首先利用平板对峙法测定了该菌株对常见的30种植物病原真菌的抑菌能力,随后对该菌产芽孢的营养条件进行了初步探索,获得了摇瓶条件下产芽孢的最佳培养基为:玉米粉24.24 g/L、KNO36.99 g/L、大豆粉26.09 g/L、MgSO45.00 g/L、MnSO418 mg/L、KH2PO40.3 g/L、K2HPO42.0 g/L、CaCO34.2 g/L;最后在150 L发酵罐上进行了放大试验,芽孢形成率达96%,芽孢量1.08×1010CFU/mL,为生防菌株B99-2的工业化生产提供技术和方法。; 王剑王楠高观朋尹丹韩王伟; 关键词：生防菌株抑菌特性

黄瓜黑星病菌核糖体基因ITS区段的克隆及序列分析被引量：3: 2009年; 为了探讨枝孢霉属的系统发育情况,采用真菌核糖体基因转录间隔区域(ITS)通用引物,PCR扩增3株来自不同地方的黄瓜黑星病菌核糖体基因的ITS序列,并对PCR产物进行测序和序列分析。结果表明:3株黄瓜黑星病菌之间同源性为100%,ITS全长463bp,其中ITS1长154bp,5.8S rDNA长159bp,ITS2长150bp,各碱基的个数分别为G 119个、C 118个、A 120个、T 106个,GC含量为51.2%。利用MEGA4软件中的NJ法和ME法,对3个样品序列以及GenBank中登陆的枝孢霉属其他25个种构建ITS聚类分析树状图,NJ法和ME法构建的结果基本相同,枝孢霉属可以分为5个聚类组,所测的3个样品和Cladosporium cucumerinum在一个聚类组中。; 高永洋高观朋王倩倩王伟; 关键词：黄瓜黑星病菌

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