陈素丽
- 作品数:17 被引量:99H指数:6
- 供职机构:厦门大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 长毛对虾酸性磷酸酶的纯化与性质被引量:58
- 1997年
- 分别从健康和患病长毛对虾(Penaeuspenicilatus)肌肉提取一种酸性磷酸酶(AC-Pae,EC.3.1.3.2.),进一步用硫酸铵分级分离,SephadexG-200柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,并于BeckmanDU-8B紫外分光光度计扫描为单一区带酶液。该酶紫外吸峰在280nm处,荧光激发峰在284nm处,发射峰在347nm处。酶的分子量为73000道尔顿,等电点为4.7酶水解对硝基苯磷酸二钠(PUPP)最适pH为4.5,最适温度40℃。健康虾与病虾酶的活化能分别为41.03kJ/mol·L和45.78kJ/mol·L,米多常数km值分别为0.80×10-4mol/L和1.43×10-4mol/L。重金属离子Cu2+,Hg2+,有机溶剂甲醇,乙醇,乙二醇等对ACPase有明显的抑制作用。
- 陈素丽陈清西胡天惠公磊颜思旭
- 关键词:长毛对虾酸性磷酸酶提纯虾病
- 乙二醇对长毛对虾酸性磷酸酶活力与构象的影响被引量:8
- 1999年
- 应用荧光光谱、紫外差示光谱及园二色性光谱等生物物理技术研究长毛对虾酸性磷酸酶经乙二醇微扰后的分子构象变化情况,结果表明乙二醇对酶分子构象有显著的影响。酶的内源荧光强度随乙二醇浓度增大而增强,Tyr、 Trp残基的微环境发生明显的变化;紫外差示光谱在 220和 275um出现2个负峰,而 236um出现正峰, 220和236 um的差吸收与酶分子主链去折叠有关,而 275 um主要与 Trp残基微环境变化有关;乙二醇变性后,酶的园二色性光谱变化说明酶分子二级结构也发生了明显的变化。比较酶在乙二醇溶液中失活与去折叠的关系,结果表明:酶在乙二醇溶液中的失活作用明显快于构象的变化,说明酶活性中心处于对变性剂乙二醇较为敏感的区域。
- 陈清西周兴旺杨佩真陈素丽
- 关键词:长毛对虾酸性磷酸酶乙二醇
- 在胍溶液中文昌鱼酸性磷酸酶活性部位的构象变化与活力变化的关系被引量:1
- 1997年
- 盐酸胍中酸性磷酸酶活性部位构象变化与活力变化的关系,酶于0.6mol/LGu-HCl中,其相对活力提高20%,当GU-HCl浓度增加到1.2~2.4mol/L时,酶的相对活力,其活性部位紫外-可见光谱500mm处吸收峰及荧光发射光谱515mm处的发射峰值下降,同时测定了酶的变性与失活常数。
- 陈素丽力政军符乃阳颜思旭
- 关键词:文昌鱼酸性磷酸酶酶活
- 文昌鱼酸性磷酸酶在变性剂变性时的构象及活力变化的研究被引量:1
- 1993年
- 十二烷基硫酸锂(LDS),脲(Urea)等变性剂作用于ACPase,以荧光法跟踪该酶的构象变化,随着LDS浓度提高荧光强度下降但发射峰没有位移,而在Urea中,荧光强度随着变性剂浓度上升而下降,发射峰明星红移,由330~350nm,分别测定其变性及失活的动力学常数,比较酶构象及催化活力的关系,结果表明:变性与失活为快相和慢相的一级反应,在LDS作用下,失活速度大于变性速度,属于快活力慢构象变化的模式,Urea的作用为变性速度大于失活速度,属于快构象慢活力变化的另一种模式,Urea作用后的变性酶,在测定其活力的10min内,没有观察到底物对变性酶的修复作用,以及稀释对变性酶的复活效应。
- 陈素丽陈灿和丁焱
- 关键词:文昌鱼酸性磷酸酶构象
- 长毛对虾酸性磷酸酶不可逆失活过程中的底物保护研究被引量:2
- 1998年
- 根据酶活性不可逆改变的动力学方法,研究了长毛对虾(Penaeuspenicilatus)酸性磷酸酶在变性剂胍,脲作用下的不可逆失活.结果表明,酶在不同变性剂中的失活行为不尽相同.测得该酶在1.2mol/L盐酸胍,3mol/L脲中的k0/k0′分别为5.0和4.3.k0>k0′的事实说明游离酶比酶底物复合物具有更大的失活速度常数,底物的结合对酶的失活有明显的保护作用.酶底物复合物较大的抗失活能力也从一侧面证实了活性中心的柔曲性理论.
- 杨佩真陈素丽陈清西
- 关键词:对虾长毛对虾酸性磷酸酶失活
- 养殖环境污染对长毛对虾磷酸酯酶活力的影响
- 陈素丽陈清西周海梦杨佩真颜思旭
- 该项目是生命科学的水产养殖学领域中一项基础性研究,研究成果在海洋环境污染监测与防患及在人工养殖对虾方面有指导作用。从健康对虾肌肉分离纯化酸性磷酸酶(ACPase)和碱性磷酸酶(ALP)。测定酶的理化性质、动力学性质、功能...
- 关键词:
- 关键词:长毛对虾磷酸酯酶水产养殖海洋污染
- 长毛对虾磷酸酯酶的研究被引量:11
- 2000年
- 从长毛对虾 (Penaeuspenicillatus)头胸部、肌肉分别提取纯化碱性磷酸酶ALPase(EC 3 1 3 1)和酸性磷酸酶ACPase (EC 3 1 3 2 ) ,经快速蛋白液相色谱 (FPLC)检测AL Pase ,聚丙烯酰胺凝胶电泳以及等电聚焦电泳检测ACPase ,得到单一纯酶 .ALPase紫外特征吸收峰在 2 78nm处 ,荧光激发峰在 2 82nm处 ,发射光谱特征峰在 340nm处 .ACPase在 2 80nm处有紫外吸收特征峰 ,荧光激发峰在 2 84nm处 ,发射峰在 347nm处 .分别测定了酶的相对分子质量、亚基数、氨基酸组成、等电点、酶水解对硝基苯磷酸二钠 (pNPP)的最适温度 ,最适pH ,米氏常数Km 值 ,金属离子Mg2 +、Cu2 +、Hg2 +,有机溶剂甲醇、乙醇、乙二醇 ,化学修饰剂BrAe、NBS、pCMB等以及蛋白质变性剂胍、脲等对酶活力的影响 .比较研究健康虾和病虾ACPase酶活力及酶动力学特征常数的变化 (健康虾酶Km=0 0 8mmol/L ,病虾酶Km=0 143mmol/L) .病虾酶Km 值明显增大 ,表现对底物亲和力下降 .活化能明显增大 (健康虾酶 4 1 0 3kJ·mol- 1 ·L- 1 ,病虾酶 4 5 7kJ·mol- 1 ·L- 1 )表明酶的催化能力下降 .
- 陈素丽陈清西杨佩真
- 关键词:磷酸酯酶
- 乙醇对文昌鱼酸性磷酸酶活力与构象的影响被引量:2
- 1996年
- 文昌鱼酸性磷酸酶(ACPase,E.C.3.1.3.2)是一种含有铁离子的金属酶,酶的紫外-可见光谱(200~600nm)扫描,280nm,500nm有最大吸收峰,320nm有肩峰。荧光扫描:在281nm激发下,330nm有发射峰,在480nm激发下,515nm有一发射峰。可见光谱500nm;的吸收峰以及荧光515nm的发射峰为酶分子含铁的特征峰,与酶活力关系密切。不同浓度的乙醇对酶活力有明显的抑制作用,表现为反竞争抑制类型,其抑制常数为16%,测定酶随时间的变化的失活程度。可见光谱500nm吸收值随酶体系中乙醇含量增加而增加,当乙醇浓度达40%时,吸收值明显下降。在乙醇作用下,监测荧光330nm及515nm处的强度随时间变化的过程作为酶构象变化的指标,酶的330nm荧光发射峰值随乙醇浓度的增强而下降,515nm的荧光发射峰值随着乙醇浓度的增强而下降,峰位不变。在不同浓度乙醇作用下,酶的构象变化快于活力变化。
- 薛雄志符乃阳李筱泉陈素丽
- 关键词:文昌鱼酸性磷酸酶乙醇光谱分析
- 福寿螺β-葡萄糖苷酶催化功能基团被引量:3
- 1999年
- 应用化学修饰法研究福寿螺β-葡萄糖苷酶活性功能基团的性质.用5,5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸)和对-氯汞苯甲酸为修饰剂修饰酶分子中的巯基,酶活力基本不受影响,说明该酶不是“巯基酶”.用N-溴代琥珀酰亚胺在pH6.0下修饰酶后,可使酶活力完全丧失,被修饰后的酶分子在278nm处的紫外吸收峰逐渐下降至完全消失,338nm处的荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭,说明色氨酸残基是酶活性必需基团之一.用碳二亚胺、溴代乙酸或甲醛修饰酶,可以使酶活力完全丧失,说明羧基、组氨酸的咪唑基及赖氨酸的氨基也与酶活性有密切的关系.用乙酰丙酮、苯甲磺酰氟修饰酶,酶活力不受影响,表明精氨酸残基和羟基与酶活性无关.
- 赵红张喆周兴旺黄建设陈素丽陈清西
- 关键词:福寿螺Β-葡萄糖苷酶功能基团活化催化
- 长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅰ)被引量:9
- 1997年
- 采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾(Penaeuspenicillatus)酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明,精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团,当酶活力下降时,伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化,显示酶活力与构系密切相关健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。
- 陈素丽陈清西林达挺李昀杨佩真丘文杰颜思旭
- 关键词:长毛对虾酸性磷酸酶功能基因对虾
- 全文增补中