陈永昌
- 作品数：73 被引量：224H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- 微课的发展现状及其在生理学教学中的应用被引量：4
- 2016年
- 在移动学习、远程学习和在线学习日益盛行的趋势下,微课作为一种新的学习理念,迅速成为高校教育教学改革的新路径,并受到国内教育领域的关注。通过对微课的特点、发展历程、应用现状以及发展趋势等方面进行分析,发现微课在国内教学实践中尚处于起步阶段,其不足显而易见。针对目前高校教学课时精简,医学基础课程内容复杂抽象的现状,因此需要重视对微课的研究,加强建议对微课理论、教学模式的学习,进而提高微课利用率,开展个性化学习、交互式教学的新型教学模式,逐步建立健全的微课资源开发平台。
- 吴燕陈永昌金雯
- 关键词：教学改革生理学
- Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶重组腺病毒载体的构建、鉴定及初步应用被引量：1
- 2010年
- 目的:构建携带Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(PKGⅡ)基因的重组腺病毒载体,并以此初步研究PKGⅡ对增殖相关的MAPK信号转导的影响。方法:将PKGⅡcDNA片段自载体pRC/CMV-GKⅡ(wt)中切出,克隆至穿梭质粒pENTR 1A,用ClonaseⅡ将pENTR-PKGⅡ中的PKGⅡcDNA片段定向克隆到pAd/CMV/V5-DEST中构建pAd/CMV/V5-DEST-PKGⅡ(Ad-PKGⅡ)。重组质粒Ad-PKGⅡ用PacⅠ酶酶切,使其线性化,再用脂质体转染法转染HEK293A细胞进行包装和扩增,微量全细胞病变法检测病毒滴度,蛋白质印迹法检测重组腺病毒Ad-PKGⅡ感染细胞后PKGⅡ的表达以及MAPK通路关键成分胞外信号调节激酶(ERK)活性的变化。结果:重组腺病毒滴度达5×109pfu/ml,蛋白质印迹法检测显示重组腺病毒感染CS54细胞后使其PKGⅡ表达明显增高;在BGC-823胃癌细胞株,PKGⅡ对EGF导致的ERK的激活有明显抑制作用。结论:成功构建了携带PKGⅡ基因的重组腺病毒,初步证明PKGⅡ对细胞增殖相关信号转导有抑制作用,为进一步研究PKGⅡ与肿瘤细胞发生发展的关系提供了基础。
- 屈睿刘加宝桑建荣任峰赵爽陈永昌
- 关键词：腺病毒载体DNA重组胞外信号调节激酶
- PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的建立PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)的方法,并探讨标记MSCs的基本生物学活性。方法大鼠MSCs按PKH26标记程序进行标记后培养,采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析仪等观察细胞生长状态和荧光标记活性变化;应用RT-PCR检测标记后MSCs的GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因的表达;选用碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色及骨形成蛋白3(BMP3)基因表达分析等技术,观察标记后MSCs体外分化成骨细胞的特性。结果PKH26标记后细胞呈红色荧光,荧光的强度随着PKH26浓度的增加而递增,并与传代时间和代数相关;标记后细胞生长状态良好,基本生长特性如传代培养和生长曲线无明显改变;细胞GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因表达未见改变;标记MSCs诱导后ALP、Von Kossa染色阳性,呈现典型的成骨细胞形态和生物学特征,并表达BMP3基因。结论PKH26可稳定标记大鼠骨髓MSCs并能传代培养,标记后细胞形态、生长活力及多向分化潜能等无明显影响,该技术可用于追踪MSCs转归、可塑性及干细胞移植方面的实验研究。
- 杨欢许文荣朱伟王兴忠乔纯胡嘉波钱晖陈永昌
- 关键词：骨髓间质干细胞PKH26成骨细胞RT-PCR
- 磷酸化TrkA受体在与其核转位相关的运输膜泡内的定位
- 2007年
- 大量的跨膜受体能靶向并定位于细胞核内,但细胞表面的受体是如何转运到细胞核内尚不清楚.报道了磷酸化的TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251中的定位.利用免疫细胞化学和免疫荧光技术,发现磷酸化的TrkA主要定位于一系列的运输泡和细胞核内,这些膜泡包括:细胞膜侧的环状泡、核周的大核心泡和小核心泡;同时还观察到大核心泡出芽成小核心泡,以及小核心泡与核膜相互作用.基于上述结果认为这些膜泡可能与跨膜受体TrkA转位到核的通路相关.
- 龚爱华张志坚肖德生杨勇王永忠陈永昌
- 关键词：TRKA核转位
- 医学留学生培养中存在问题的探讨和分析被引量：3
- 2020年
- 随着我国国际影响力的不断提升和教育事业的国际化发展,留学生的教学已成为我国高等教育的重要组成部分。然而,目前留学生的各个培养环节中也存在诸多问题。因此,如何规范留学生管理与教学,提高教学质量,也是许多高校面临的难题。本文梳理并分析近几年医学留学生培养环节中出现的一些问题,并且提出了相应的建议和对策。
- 吴燕金雯李月英王瑛陈永昌
- 关键词：医学留学生教学
- PKGⅡ对乳腺癌MCF-7细胞株中抑癌基因蛋白表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:研究乳腺癌MCF-7细胞株中PKGⅡ对抑癌基因PTEN、p21、p53、BRCA1以及BRCA2蛋白表达的影响。方法:用编码PKGⅡc DNA的腺病毒载体感染MCF-7细胞,使其高表达PKGⅡ并以相应激活剂8-p CPT-cGMP激活;蛋白质印迹法检测MCF-7细胞p53、p21、PTEN、BRCA1以及BRCA2因子表达量。结果:PKGⅡ表达增高并激活后可使乳腺癌MCF-7细胞株中抑癌基因的蛋白表达降低。结论:PKGⅡ通过降低癌细胞的活动水平从而降低抑癌基因蛋白的表达。
- 蓝婷吴燕陈永昌
- 关键词：MCF-7细胞抑癌基因
- 人参皂苷Rb-2对肠道病毒71型的体外抑制效应被引量：9
- 2016年
- 目的:观察人参皂苷Rb-2对肠道病毒71型(EV71)的抑制作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人参皂苷Rb-2对人横纹肌肉瘤细胞(RD)的毒性作用;应用细胞病变法观察人参皂苷Rb-2浓度为6.25、12.5、25、50、75和100μg/m L时对EV71的抑制效应,通过检测病毒滴度观察药物对病毒的作用。结果:人参皂苷Rb-2(≤100μg/m L)对RD细胞无明显细胞毒性。人参皂苷Rb-2对EV71的抑制率呈浓度依赖性,50%抑制浓度(IC50)为20.8μg/m L。当人参皂苷Rb-2(≤100μg/m L)与EV71混合后处理RD细胞,未见药物对病毒的直接灭活作用。另外,人参皂苷Rb-2(75μg/m L)与EV71同时作用于RD细胞,或先将EV71加入到RD细胞,1 h后再加入人参皂苷,这两种方式对病毒滴度的影响无统计学意义。结论:人参皂苷Rb-2能有效抑制EV71复制。
- 季云陈永昌马锦洪蒋丽娟史伟峰
- 关键词：肠道病毒71型
- 纤维蛋白支架促进神经干细胞向神经元分化并抑制星形胶质细胞增生被引量：2
- 2010年
- 目的探讨纤维蛋白支架对神经干细胞和星形胶质细胞分化及增殖的影响。方法分别培养胚胎大鼠脊髓来源的神经干细胞和新生鼠脊髓神经胶质细胞,接种于纤维蛋白支架上,同时用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照。于体外培养不同时间后,用神经丝蛋白(NF200)对神经细胞进行免疫荧光染色,测量各复孔(n=4)内NF阳性细胞的突起长度,计算其平均值;用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对胶质细胞进行染色,各复孔(n=4)内统计5个不同视野的胶质细胞总数和GFAP阳性细胞数,计算GFAP阳性细胞相对数量的平均值。比较在纤维蛋白支架和玻片上神经干细胞分化、神经纤维延伸及神经胶质细胞增殖的差异。同时用免疫印迹技术对荧光染色结果进行验证。上述实验各重复3次。结果纤维蛋白支架组的NF阳性纤维明显长于对照组,GFAP阳性星形胶质细胞相对数量明显少于对照组,GFAP的表达水平明显低于对照组。结论纤维蛋白支架可促进神经干细胞向神经细胞分化,并有利于神经纤维的延伸而抑制星形胶质细胞的增殖和成熟。
- 崔颜宏王穆彬陈静陈谦孙湘兰龚爱华张志坚陈永昌姜平
- 关键词：纤维蛋白神经元星形胶质细胞免疫印迹法
- 幽门螺杆菌调控胃上皮细胞基因表达的机制被引量：4
- 2006年
- 目的:在基因转录调节水平上研究幽门螺杆菌生物活性物质调控胃上皮细胞基因表达的机制。方法:人胃上皮癌细胞株SGC-7901采用常规方法培养,幽门螺杆菌菌株NCTC11637采用马血清琼脂培养基培养,收获后用超声粉碎法提取生物活性物质,基因转录采用报告基因方法分析。结果:幽门螺杆菌提取物使SRE反式激活的基因转录增加(P<0.01),而对CRE反式激活的基因转录没有明显影响(P>0.01)。结论:幽门螺杆菌生物活性物质通过顺式转录调控元件SRE调控细胞基因表达。
- 李璟妍汤燕王瑛王华陈永昌
- 关键词：幽门螺杆菌胃上皮细胞基因表达
- 心肌缺血再灌注时氧化亚氮与氧化亚氮合酶的变化及L-精氨酸对其的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:观察大鼠心肌缺血再灌注时氧化亚氮(n itric oxide,NO)和氧化亚氮合酶(n itric oxide synthase,NOS)的变化及L-精氨酸对其的影响,探讨心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法:大鼠80只,分为假手术对照(sham)组,心肌缺血再灌注组,肾脏缺血预处理+心肌缺血再灌注组和L-精氨酸治疗+心肌缺血再灌注组,检测血清NO及NOS水平,光镜下进行中性粒细胞计数。结果:缺血再灌注(M IR)组缺血30 m in时相点与对照组相比NO,NOS无差异,再灌注后NO,NOS开始下降,随时间延长,NO,NOS逐渐减少。与M IR组再灌注对应时相比较,肾脏缺血预处理+M IR组及精氨酸治疗+M IR组NO及NOS均显著增加。缺血后再灌注时随时间延长,中性粒细胞数量逐渐增加,给予精氨酸干预或肾脏缺血预处理后中性粒细胞数量显著下降。结论:心肌缺血后再灌注时有大量中性粒细胞浸润,与心肌损伤关系密切。缺血预处理可通过增加NO水平减轻随后的缺血再灌注损伤,L-精氨酸可通过增加NO,减少中性粒细胞浸润起心肌保护作用。
- 贾俊海陈素仙陈永昌
- 关键词：心肌缺血再灌注缺血预处理氧化亚氮中性粒细胞
