钱永海
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：昆明医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 羊膜间充质干细胞对异体外周血淋巴细胞转化的影响被引量：5
- 2010年
- [目的]研究羊膜间充质干细胞(MSCs)对成人外周血淋巴细胞的免疫调节作用。[方法]采用组织块培养法从羊膜分离、培养MSCs,通过细胞形态的均一性和流式细胞术检测细胞表面标志以鉴定其纯度。将分离培养的羊膜MSCs按不同浓度接种于96孔板中,72h待其贴壁后,用丝裂霉素处理。将外周血淋巴细胞接种于羊膜MSCs上,加入植物凝集素(PHA)以刺激淋巴细胞转化。以单纯淋巴细胞(不含MSCs)经PHA刺激转化者为对照组,设单纯淋巴细胞(不加PHA)作空白对照。各组细胞培养72h后,收集各孔悬浮细胞,用CCK-8法测定细胞增殖率,观察羊膜MSCs对异体外周血淋巴细胞转化的影响。[结果]羊膜MSCs的形态和骨髓MSCs类似,具有和骨髓MSCs相似的细胞表型,可以显著抑制异体外周血淋巴细胞转化。羊膜MSCs浓度为2×106/ml、1×106/ml、5×105/ml、2.5×105/ml、1.25×105/ml时的平均转化抑制率分别为88.92%、83.38%、62.10%、32.22%、17.35%。[结论]从羊膜中可以成功分离、培养出MSCs,为MSCs提供了新的来源。羊膜MSCs可以抑制PHA诱导的异体外周血淋巴细胞转化,对同种异体免疫反应具有负调节作用,且该作用具有剂量依赖性。
- 钱永海李维佳史明霞董坚梁波魏彩霞
- 关键词：间充质干细胞羊膜淋巴细胞免疫调节
- 人羊膜间充质干细胞支持造血的体外实验被引量：4
- 2010年
- 背景:骨髓是目前间充质干细胞的主要来源,但由于取材不便、细胞数量受年龄限制等原因,其应用具有一定局限性。近年来,羊膜作为间充质干细胞的新来源受到越来越广泛的关注。目的:探讨人羊膜来源间充质干细胞在体外对造血干细胞的扩增是否有支持作用,以及怎样提高羊膜间充质干细胞和造血干细胞共移植成功率。方法:利用组织块培养法,从足月分娩的人羊膜中分离培养羊膜间充质干细胞。密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,采用免疫磁珠分选技术分选其中CD34+细胞。分别用脐血单个核细胞和CD34+细胞与羊膜间充质干细胞共培养,连续4周,每周计悬浮细胞浓度,并以骨髓间充质干细胞组及无滋养层组作为对照。采用集落形成实验,把扩增的脐血单个核细胞和CD34+细胞分别接种至甲基纤维素半固体培养基中,14d后根据典型形态特征计数造血集落数。结果与结论:羊膜间充质干细胞可促进人脐血单个核细胞和CD34+细胞扩增,扩增后两者在甲基纤维素半固体培养基中能够形成造血祖细胞集落,其造血支持作用与骨髓间充质干细胞相似,两者对比无明显统计学差异。提示,羊膜间充质干细胞体外具有与骨髓间充质干细胞相似的造血支持作用,有可能为造血干细胞体外扩增及临床间充质干细胞与造血干细胞联合移植、提高造血干细胞移植成功率提供一种更加理想的间充质干细胞新来源。
- 章守琴李维佳史明霞钱永海
- 关键词：羊膜间充质干细胞造血干细胞
- 人羊膜间充质干细胞的多向分化、造血支持和免疫学特性研究
- 史明霞李维佳黄颖李云涛黎承平武坤魏彩霞钱永海章守琴梁波杨春
- 该项目于2007年在国内率先开展人羊膜间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSC)的系统研究，成立相关研究团队，经过四年不懈努力，建立和优化了人羊膜MSC的分离纯化方法，分析了其基本生物学特性和多向分...
- 关键词：
- 关键词：器官移植自身免疫性疾病
