郭洪年
- 作品数：19 被引量：98H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划山西省青年科技研究基金新疆维吾尔自治区科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转两类抗虫基因棉花优良纯合品系的选育被引量：12
- 2003年
- 用含合成的Cry1Ac杀虫蛋白嵌合基因 (Bt2 9K)及慈菇蛋白酶抑制剂B(API B)基因表达框的双抗虫基因植物表达载体 ,通过根癌农杆菌介导转化棉花生产品种冀合 32 1,获得了一批抗卡那霉素的转化再生植株。在对转化再生植株进行PCR、卡那霉素抗性和抗虫性测定的基础上 ,经 6代筛选培育出棉铃虫抗性 90 %以上且农艺性状优良的 9个转双抗虫基因棉纯合品系。各纯合株系子代植株的抗虫性及部分序列检测结果进一步表明上述Cry1Ac嵌合蛋白基因是能稳定遗传的。这些品系具有很好的农艺性状 ,其结铃性和纤维比强度明显高于转化受体冀合 32 1,这些纯合系可直接用于生产或作为双抗虫棉种质利用。
- 吴家和田颖川罗晓丽郭洪年石跃进陈晓英贾燕涛肖娟丽张献龙
- 关键词：抗虫基因棉花选育根癌农杆菌棉铃虫抗性
- 表达千穗谷Ah-AMP基因的转基因烟草抗病性研究被引量：8
- 2003年
- 通过PCR从苋属植物千穗谷(Amarathus hypochondriacus)的总DNA中扩增出苋菜抗菌肽(Ah-AMP)的核基因片段,序列分析结果表明该基因长 261 bp,编码一个由86个氨基酸组成的Ah-AMP前体多肽。在构建Ah-AMP基因的植物表达载体pBinAH916后,通过根癌土壤杆菌介导方法转化了烟草。转化再生植株和T_1代转基因烟草的PCR和Southern blot分析表明,Ah-AMP基因已整合到烟草的染色体中,并为单拷贝整合。T_1代转基因烟草的Northern blot分析结果表明,Ah-AMP基因在转基因烟草中至少在mRNA水平上能正常表达。对T_0代转基因烟草进行烟草青枯病的抗病性试验,筛选出两株抗性较强的植株。对T_1代抗青枯病的统计分析发现,其抗病性比起始品种SR1分别提高了2.24和1.62个级别;其病情指数比起始品种降低49.6％和37.3％。对黑胫病也表现一定的抗性,主要表现在推迟发病时间,减缓发病速度上。这些结果表明Ah-AMP基因在植物抗病基因工程研究中可能是一个有潜在应用价值的基因。
- 陈艳郭洪年姜瑛李常青赵文明田颖川
- 关键词：转基因烟草抗病性抗菌肽基因表达
- NPP2基因启动子及抗虫转基因植物的研究
- 该实验室首次克隆了南瓜韧皮部特异性表达的NPP2基因启动子,该文通过缺失分析对该启动子的主要功能区进行了初步的研究,在此基础上对NPP2启动子进行了改造,获得了韧皮部特异性表达的高效启动子,并用韧皮部特异性启动子对一个新...
- 郭洪年
- 关键词：CDNA转基因烟草
- 文献传递
- 一种可使其产物分泌到细胞外的嵌合杀虫蛋白基因
- 本发明提供一种人工合成的苏云金芽孢杆菌(Bt)的嵌合杀虫蛋白基因Btlm，适于在高等植物中高效表达；在该基因的5′端加上一个编码分泌信号肽的核苷酸序列形成一个融合蛋白基因BtSlm，该基因在植物中表达的Bt杀虫蛋白可分泌...
- 田颖川秦红敏郭洪年
- 文献传递
- 一种可使其产物分泌到细胞外的嵌合杀虫蛋白基因
- 本发明提供一种人工合成的苏云金芽孢杆菌(Bt)的嵌合杀虫蛋白基因Btlm，适于在高等植物中高效表达；在该基因的5′端加上一个编码分泌信号肽的核苷酸序列形成一个融合蛋白基因BtSlm，该基因在植物中表达的Bt杀虫蛋白可分泌...
- 田颖川秦红敏郭洪年
- 文献传递
- 一个在植物中高效表达的载体
- 利用烟草花叶病毒(TMV)RNA的非翻译区序列(UTR)构建植物高效表达载体pBin440，包含所述的UTR序列与GUS报告基因的融合基因构建体，用所说的构建体转化植物外植体所产生的高效表达外源基因(GUS)的转基因植株...
- 田颖川秦红敏郭洪年
- 文献传递
- 转Cry1Ac活性杀虫蛋白及慈菇蛋白酶抑制剂B基因的棉花(英文)被引量：13
- 2003年
- 根据植物基因的结构特征,合成了CrylAc活性杀虫蛋白的编码序列并与内质网定位肽编码序列组成嵌合杀虫蛋白基因Bt29K。构建了含Bt29K基因及慈菇蛋白酶抑制剂B(API-B)基因表达框的双抗虫基因植物表达载体。通过根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens (Smith et Townsend )Conn LBA4404)介导转化了棉花(Gossypium hirsu-tum L.)的两个生产品种(系)。根据抗棉铃虫(Heliothis armigera )试验及农艺性状的观察调查结果,经6代筛选,获得了抗棉铃虫90.0％-99.7％且农艺性状优良的9个双价抗虫棉纯合品系。分子生物学分析结果表明,两个抗虫基因在棉花基因组中的插入拷贝数为1个或2个。活性CrylAc和API-B蛋白在转基因抗虫棉株系中的表达量分别约占总可溶性蛋白的0.17％和0.09％。对双抗纯合系植株及仅转Bt基因的棉花纯合系抗虫性检测结果表明前者的抗虫性明显高于后者,因此推断本研究采用的双抗虫基因表达载体构建策略是合理的。
- 郭洪年吴家和陈晓英罗晓丽卢睿石跃进秦红敏肖娟丽田颖川
- 一个具有双抗虫基因的植物表达载体及其应用
- 本发明提供一个人工合成的融合蛋白基因BtS29K。该基因在植物内表达后产生完全活化的定位于内质网的活性杀虫蛋白CrylAc，适于与有抗虫作用的蛋白酶抑制剂基因一起构建双抗虫基因的植物表达载体以获得抗虫性更高，杀虫谱更广，...
- 田颖川郭洪年秦红敏芦睿李常青
- 文献传递
- 选择标记可去除的植物高效表达载体的构建被引量：4
- 2007年
- 在常用的植物组成型表达载体pBI121的选择标记基因NPTII两侧插入同向的lox位点并用多克隆位点(MCS)取代了GUS基因序列,构建了NPTII基因可被去除的和可插入目的基因的通用植物表达载体pBI121-lox-MCS。替换pBI121-lox-MCS中驱动目的基因表达的35S启动子,可构建成一系列具有其他表达特性的植物表达载体,如本文描述的韧皮部特异表达载体pBdENP-lox-MCS。为方便地筛选去除选择标记基因的转基因植物,还构建了绿色荧光蛋白(GFP)表达框与NPTII表达框连锁的pBI121-gfp-lox-MCS载体。上述植物表达载体可广泛应用于培育选择标记可去除的转基因植物。
- 高尚苏鸓贾洪革郭洪年田颖川方荣祥陈晓英
- ACA基因启动子的克隆及功能初探被引量：17
- 2005年
- 根据已知的ACA基因的 5 '端序列设计三个基因特异的反向引物 (GSP_1,GSP_2 ,GSP_3)分别与 11个简并引物 (AD1_AD11)配对 ,进行热不对称嵌套PCR(ThermalasymmetricinterlacedPCR ,TAIL_PCR)扩增 ,获得了ACA基因起始密码子上游约70 0bp的片段。为检测其表达特性 ,构建了该片段与Gus嵌合基因的表达载体pBpAG ,在真空条件下通过农杆菌介导 ,转化了植物的叶、果实、种子三种不同组织 ,Gus瞬时表达染色结果显示 ,该DNA片段具有种子特异的启动子活性。对该启动子的一些顺式元件进行了讨论。
- 刘召华郭洪年郑光宇田颖川
- 关键词：TAIL-PCRGUS
