郭宇聪
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划更多>>
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- 柽柳液泡膜H+-ATPasec"亚基(ThVHAc"1)基因面耐盐功能分析
- 植物液泡膜H+-ATPase(V-ATPase)是一个多亚基复合蛋白，在植物中最基本的功能是维持细胞质内的酸碱性内平衡状态（pH值内稳态）和建立跨膜电化学梯度、为相关的代谢提供能量。当植物处于逆境条件下，V-ATPase...
- 郭宇聪
- 关键词：柽柳液泡膜
- 柽柳液泡膜微囊蛋白的分离
- 2016年
- 采用差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心法分离和纯化柽柳液泡膜微囊，通过western杂交对获得的微囊蛋白进行检测，获得ThVHAcl蛋白目的条带，表明分离的液泡膜微囊中含有有效的V-ATPase成分，进一步测定液泡膜微囊对NaNO3、Na3VO3、NaN3的敏感性及V-ATPase的水解活性和翻转比例。结果表明：液泡膜微囊主要分布在0-25％蔗糖梯度界面上，且研磨法提取液泡膜微囊具有较高的水解活性和较大的原位比例，表明液氮研磨结合差速离心及不连续蔗糖密度梯度离心法能有效提取柽柳液泡膜微囊。
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- 关键词：刚毛柽柳液泡膜V-ATPASE
- 甲基紫精胁迫下转TheIF1A基因烟草的活性氧代谢被引量：1
- 2016年
- 真核翻译起始因子e IF1家族基因具有一定的抗逆调节能力。前期研究表明柽柳The IF1A基因能提高转基因植物的抗旱耐盐胁迫能力。本研究旨在对该基因的抗氧化能力进行分析,探讨The IF1A基因是否具有抗氧化能力。组织化学染色结果显示,甲基紫精胁迫下转The IF1A基因烟草叶片、保卫细胞、根尖积累的活性氧明显少于野生型烟草(WT),H2O2含量测定结果也表明转基因株系的H_2O_2含量显著低于非转基因株系。此外,甲基紫精胁迫下转The IF1A基因烟草的CAT活性、POD活性显著高于WT株系,表明过表达The IF1A可能通过提高保护酶活性来调节体内活性氧清除能力进而改善植株活性氧积累,提高抗氧化能力。
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- 关键词：刚毛柽柳活性氧代谢
- 柽柳液泡膜H+-ATPasec"亚基（ThVHAc" 1）基因耐盐功能分析
- 植物液泡膜H+-ATPase (V-ATPase)是一个多亚基复合蛋白,在植物中最基本的功能是维持细胞质内的酸碱性内平衡状态(pH值内稳态)和建立跨膜电化学梯度、为相关的代谢提供能量。当植物处于逆境条件下,V-ATPas...
- 郭宇聪
- 关键词：刚毛柽柳非生物胁迫耐盐启动子
- 文献传递
- 不同长度ThVHAc1基因启动子片段分离及活性分析被引量：2
- 2016年
- [目的]VHAc基因(V-ATPase c亚基)是V-ATPase的重要亚基,能响应盐、重金属等胁迫,过表达刚毛柽柳ThVHAc1基因的酵母能提高抗CdCl_2耐NaCl能力。本研究拟通过分离ThVHAc1基因不同长度启动子片段并对其胁迫后活性进行分析,以进一步探讨ThVHAc1基因响应CdCl_2和NaCl胁迫的机制。[方法]根据ThVHAc1基因启动子中含有的Dof顺式作用元件的分布,将ThVHAc1基因上游启动子分为205 bp(-1—-205),504 bp(-1—-504)和781 bp(-1—-781)3个不同长度片段。将这些不同长度启动子片段分别替换p CAMBIA1301载体上的CaMV35S启动子,以驱动GUS基因表达,构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥。对4周龄的T4代转基因拟南芥分别进行H_2O(非胁迫处理,对照)、100 mmol·L^(-1)NaCl和150μmol·L^(-1)CdCl_2胁迫处理,比较不同转基因株系的GUS染色和GUS酶活性。[结果]正常生长条件下,CaMV35S株系在根、茎、叶中均有GUS染色;3个启动子片段转基因株系均能在不同组织观察到GUS染色,且在根、茎、叶中有一定差异,但整体上GUS酶活性表现为781>504>205。NaCl胁迫下,CaMV35S株系的GUS染色及酶活性与正常生长条件相比无明显变化,但3个启动子片段转基因株系的GUS染色及酶活性均显著降低,且781株系的GUS酶活性分别为205和504株系的2.73和2.07倍;同时,3个启动子片段转基因株系的组织表达特性发生了一些改变,如,504株系在老叶中表达明显增强,嫩叶中减弱,根中无明显变化。CdCl_2胁迫下各转基因株系的GUS染色和酶活性变化趋势与NaCl胁迫相似。CdCl_2胁迫下,205,504,781株系的GUS酶活性分别为非胁迫时的52.4%,57.9%和80.9%;胁迫后的组织表达活性也发生了一些改变,205株系的GUS染色在老叶较深、嫩叶较浅,504株系则在各部分的表达较均匀,781株系大多叶片的GUS表达减弱;但781株系的GUS酶活性仍然最高,分别为205和504株系的2.67和2.07倍。[结论]ThVHAc1基因启动�
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- 关键词：刚毛柽柳拟南芥启动子NACL胁迫
- 柽柳谷胱甘肽转移酶基因(ThGSTZ1)转入酵母的抗逆能力分析被引量：4
- 2013年
- [目的]研究盐、重金属、低温和高温胁迫下,柽柳GST基因(命名为ThGSTZ1)的抗性作用。[方法]将ThGSTZ1基因构建到酵母表达载体pYES2中,转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)获得重组型酵母,同时以转化空载体pYES2的重组酵母作为阴性对照;对2种重组酵母分别进行LiCl、NaCl、KCl、CdCl2、ZnCl2、MgCl2、-20和53℃胁迫处理,比较2种酵母的成活率。[结果]ThGSTZ1能有效的提高酵母的抗盐碱及极端温度的能力,表明ThGSTZ1可能参与柽柳的逆境胁迫应答过程。[结论]GST基因具有参与多种胁迫响应和调节的功能。
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- 关键词：刚毛柽柳谷胱甘肽S-转移酶酵母表达抗逆
- 盐胁迫下TheIF1A基因启动子表达特性分析
- 2015年
- 为探讨刚毛柽柳真核翻译起始因子1A(The IF1A)基因对植物逆境胁迫响应的调控作用,对The IF1A基因启动子盐胁迫下的应答表达情况进行分析,比较转The IF1A基因启动子拟南芥在不同浓度盐胁迫及不同时间后GUS染色和酶活差异。结果显示:The IF1A启动子在短时间内即对400 mmol/L Na Cl胁迫做出应答,主要表现为表达受抑制,各组织中老叶的GUS酶活性最高;100mmol/L Na Cl胁迫下,The IF1A启动子活性也被明显抑制,胁迫20 h后,GUS酶活性恢复到较高水平,各组织中,根中的活性最低。研究表明,The IF1A启动子的表达能对盐胁迫作出应答,但在低盐和高盐胁迫下的应答方式存在一定的差异性。
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- 关键词：刚毛柽柳盐胁迫
- 过表达ThVHAc1对拟南芥V-ATPase各亚基表达的影响被引量：1
- 2015年
- V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结果显示,盐胁迫下,过表达外源Th VHAc1拟南芥V-ATPase 28个亚基的表达发生了明显改变,且拟南芥5个c亚基的表达均不同程度的被抑制。表明外源Th VHAc1基因能影响拟南芥V-ATPase各亚基的表达以调节V-ATPase全酶的活性,但各亚基的表达模式与V-ATPase活性非简单对应关系,各亚基互相协调决定V-ATPase活性。
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- 关键词：刚毛柽柳C亚基V-ATPASE
