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郭向荣

作品数:12 被引量:25H指数:2
供职机构:湖南师范大学生命科学学院更多>>
发文基金:湖南省自然科学基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 7篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇单克隆
  • 3篇单克隆抗体
  • 3篇酶联免疫吸附
  • 3篇免疫
  • 3篇免疫吸附
  • 3篇活细胞
  • 3篇RAC1
  • 3篇CDC42
  • 3篇FRET
  • 3篇RAC
  • 2篇蛋白
  • 2篇酶联
  • 2篇酶联免疫
  • 2篇抗体
  • 2篇克隆
  • 1篇单克隆抗体制...
  • 1篇动力学
  • 1篇动力学过程
  • 1篇信号

机构

  • 10篇湖南师范大学
  • 2篇中南大学
  • 1篇中南大学湘雅...
  • 1篇中南林业科技...

作者

  • 10篇郭向荣
  • 7篇邱义兰
  • 7篇刘如石
  • 3篇张青岩
  • 3篇任道全
  • 3篇孙斌
  • 3篇廖旻晶
  • 2篇梁湘辉
  • 2篇罗孝勇
  • 2篇何赛
  • 2篇郑姣
  • 2篇唐娜
  • 2篇吴意
  • 2篇李晓丹
  • 1篇刘胜姿
  • 1篇徐甜
  • 1篇孙一兵
  • 1篇李友军
  • 1篇李桑
  • 1篇颜亨梅

传媒

  • 3篇生命科学研究
  • 3篇激光生物学报
  • 2篇湖南师范大学...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇分子细胞生物...

年份

  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 1篇2013
  • 1篇2009
  • 3篇2008
12 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化(英文)被引量:2
2008年
乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁,而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段,乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后,对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法,探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明,FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基,溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响,甲醇诱导最佳终浓度为1%(V/V),发酵的最适pH值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后,ELISA和SDS—PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达,最终菌体生物量达到310 OD600,表达量达到27mg/L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22nm类病毒颗粒,为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。
刘如石林亲录孙意邱义兰徐甜丁海郭向荣
关键词:发酵参数毕赤酵母重组乙肝表面抗原
定向迁移细胞前沿Rac局部化激活的分子调控
2013年
提出构想:当α4胞内区域磷酸化而抑制其与paxillin结合时,paxillin、GIT1与PIX、PAK形成信号分子复合物.由于PIX为Rac的转换分子,PAK为Rac的效应分子,构成了paxillin-GIT1-PIX-PAK信号转导通路,从而促使Rac在细胞前沿持续地局部化激活,导致片状足的形成,产生细胞向前扩展推动力.研究结果表明,GIT1与paxillin、PIX在活细胞中均存在强烈的相互作用,且这种相互作用可发生在细胞前沿.由于Rac的转换因子PIX(PAK-interacting exchange factor)在活细胞中往往与PAK相伴而行,因而,在细胞前沿,必定存在paxillin-GIT1-PIX-PAK的信号转导通路.在纤粘蛋白(fibronectin)刺激下,整合素α4诱导Rac蛋白处于激活状态(GTP-bound).
李友军罗孝勇郭向荣
Rac1、Cdc42单分子探针在活细胞中表达差异的比较
2009年
利用构建的Rac1、Cdc42单分子探针,探索其在NIH3T3、Hela、COS7等活细胞中的最佳表达效果.结果表明在胞浆中表达的探针其荧光值在诱导5~10 min达到最大值,随着时间的推移,其荧光强度逐渐减弱;在细胞膜上表达的探针也是相似的.DNA/转染试剂为1∶3时的表达效果最佳;每毫升转染培养基的质粒DNA含量为4或6μg时,其转染表达可达到最佳;在不同种类的细胞中表达时其差异不明显;在细胞的不同部位表达差异不明显.
任道全孙斌张青岩刘一舟郭向荣
关键词:RAC1CDC42FRET
Talin:细胞黏附动力学过程的关键蛋白被引量:2
2015年
持续、协调的细胞黏附的形成、解体过程,对细胞转移是必不可少的,Talin蛋白在其中起至关重要的作用.介绍了细胞黏附的类型、功能,重点阐述了Talin蛋白的结构、与其他黏附组成蛋白的相互作用,以及在黏附的形成、解体过程中的重要地位,从而明确了Talin蛋白为细胞黏附动力学过程的关键蛋白.
李思锐孙阳罗孝勇郭向荣
关键词:细胞黏附
乡村沼气池污泥微生物多样性的研究被引量:1
2015年
为了优化沼气池产气效率和开展污泥微生物多样性研究,通过对PCR-DGGE条件的优化,建立了农村户用沼气池污泥微生物16S r DNA V3区DGGE分析技术,通过DGGE技术分析了沼气池污泥中细菌和古细菌微生物多样性随沼气池深度的变化规律。同时通过构建污泥样品mcr A功能基因克隆文库,应用RFLP技术,开展了农村户用沼气池污泥样品中与次级代谢产物相关基因的功能基因多样性研究。结果显示,农村户用沼气池污泥中含有丰富的微生物资源,其中细菌群落受污泥深度因素影响小,而浅层污泥中古细菌群落与深层污泥中古菌群落却存在明显差异。所采集的沼气池污泥中含有较为丰富的产甲烷菌资源,其中可能存在类似功能或产生类似代谢物质的产甲烷菌。该结果为进一步优化群落结构、筛选功能基因提供了科学依据。
李桑张琳邱义兰刘胜姿孙一兵颜亨梅郭向荣刘如石
关键词:农村户用沼气池总DNA提取微生物多样性
监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42信号转导通路的FRET单分子探针被引量:3
2008年
Rho家族鸟苷三磷酸酶,包括Rac1和Cdc42等,参与调节细胞形态、细胞迁移、转录激活和基因表达等一系列细胞过程。根据FRET(Fluorescent resonance energy transfer)技术原理,构建了包含红色荧光蛋白dsRed1与青色荧光蛋白ECFP的全长cDNA,效应分子Pak1或N-WASP的GTP酶联结区域,信号分子Rac1或Cdc42的全长cDNA的几种单分子探针。转染NIH3T3或Hela细胞,以胰岛素、缓激肽为诱导剂,分别激活Rac1、Cdc42信号转导通路。离体荧光光谱检测表明,在两种转染动物细胞中均产生了FRET现象。不同信号转导通路的FRET效率,在诱导激活5min后,均达到最高值,但增加幅度有显著差异。随着诱导时间的延长,FRET效率下降,但下降速率在不同信号转导通路间差异显著。Rac1、Cdc42激活试验证实,诱导激活的转染细胞中,Rac1、Cdc42均处于激活状态(GTP-bound),其在不同诱导时间的相对激活程度与FRET效率表现相同。诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路,分别导致了转染活细胞中片状伪足、线状伪足的产生。这表明,采用这些单分子探针,可直接监测激活的信号转导通路,在活细胞中的3D时空分布变化图像及其产生的细胞学效应。采用这些单分子探针,分析、判断了一些调节蛋白对Rac1、Cdc42的GEF或GAP特性,从而提供一种可大大简化现有的鉴定待测蛋白分子的方法。
孙斌任道全张青岩邱义兰刘如石郭向荣
关键词:FRETRAC1CDC42
抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的制备
2018年
目的:制备分泌特异性抗人甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为建立高灵敏度的Tg检测方法做准备。方法:以天然人源甲状腺球蛋白为抗原经皮下免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体,并对其进行特异性鉴定,建立检测Tg的双抗体ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)夹心法。结果:获得7株可稳定分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经ELISA鉴定,筛选抗体可与Tg抗原有良好的特异性反应。建立的双抗体夹心ELISA方法敏感性可达1 ng/mL。结论:成功制备了抗人Tg单克隆抗体并建立了检测人Tg双抗体夹心ELISA方法,为进一步研发Tg快速诊断试剂盒提供了原料。
靳晓瑞吴意廖旻晶邱义兰唐娜曾林秀王平郭向荣刘如石
关键词:单克隆抗体甲状腺球蛋白纯化酶联免疫吸附实验
降钙素原的原核表达及单克隆抗体制备被引量:1
2016年
目的:高效表达与纯化可溶性重组人PCT蛋白,制备高灵敏度和高特异性的抗人PCT医用诊断单克隆抗体。方法:大肠杆菌表达重组人PCT蛋白后,利用饱和硫酸铵沉淀和亲和层析方法纯化PCT蛋白后,经质谱、Western blot和间接ELISA法进行性质鉴定和分析重组蛋白的表达与免疫反应性;重组蛋白免疫小鼠,经细胞融合及筛选制备抗PCT单克隆抗体(m Ab)。结果:在大肠杆菌中高效表达了人PCT蛋白;重组人PCT蛋白具有良好的免疫反应性与免疫原性;经筛选获得7株抗PCT单克隆抗体细胞株,经ELISA鉴定,筛选抗体可与PCT抗原有良好的特异性反应。结论:利用重组人PCT蛋白免疫制备了抗人PCT单克隆抗体,为进一步研发PCT快速诊断试剂提供了原料。
郑姣邱义兰廖旻晶李晓丹张坚松吴意何赛梁湘辉郭向荣刘如石
关键词:降钙素原原核表达
人巨细胞病毒包膜糖蛋白B主要中和表位单克隆抗体的制备被引量:1
2017年
人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)分布广泛,能够引发多种疾病,人群感染率极高,严重威胁到人类健康。现根据标准毒AD169基因序列,人工合成包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)AD13区段的主要中和抗原表位AD-1、AD-2、AD-3,并将其与表达载体pET-32a连接,构建重组表达质粒;用IPTG诱导表达重组蛋白,采用Western-blot进行特异性鉴定;将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,然后筛选制备AD13单克隆抗体(monoclonal antibody,m Ab)。12%SDS-PAGE电泳鉴定表明重组蛋白表达成功,其相对分子质量约为35 kD;Western-blot和间接ELISA结果说明,重组AD13蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性;克隆化后筛选到5个AD13单克隆抗体细胞株,经间接ELISA鉴定,与AD13抗原有良好的特异性反应。上述研究为研发HCMV快速诊断试剂盒提供了原料,也为研究HCMV亚单位疫苗提供了相关的基础。
何赛廖旻晶靳晓瑞邱义兰李晓丹郑姣唐娜罗焕梁湘辉郭向荣刘如石
关键词:中和表位免疫反应性
监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42时空图像的FRET单分子探针的构建被引量:2
2008年
以PCR方法从人脑cDNA基因文库扩增Rac1、Cdc42cDNA全序列及其效应蛋白基因Pak1、N-WASP的GTP酶联结区域(GBD)序列,从dsRed1-N1质粒扩增红色荧光蛋白dsRed1cDNA全序列。将cDNA序列依次定向克隆至pECFP-N1质粒载体,获得基于FRET原理,包含dsRed1,Pak1或N-WASP的GBD,Rac1或Cdc42,ECFP编码序列的单分子探针。在dsRed1的C末端加入一段CAAM法尼基化基序,构建包含EGFP,Pak1的GBD,Rac1或Cdc42,dsRed1-CAAM的质膜特异表达的单分子探针。采用这两种探针,可用于监测活细胞中诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路的3D时空图像,检测待测蛋白分子的GEF或GAP活性。
张青岩任道全孙斌邱义兰刘如石郭向荣
关键词:RAC1CDC42FRET
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