路煜
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:上海生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化
- 目的在构建高表达INF-alb重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺。方法采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术。结果发酵密度A可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右。经破菌、离心、离子交换和...
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词:重组大肠杆菌高密度发酵纯化
- 文献传递
- 高效表达干扰素α1b(IFN-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化被引量:2
- 2003年
- 目的在构建高效表达IFN-α1b重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法采用高密度培养方法(HCDC)和柱层析纯化技术.结果发酵密度A600可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右.经破菌、离心、离子交换和分子筛凝胶过滤得到IFN-α1b纯品,FPLC测定纯度为100%,活性为4.99×107U/ml,比活为2.5×107U/mg,均符合2000版<中国生物制品规程>要求.结论已建立了适用于规模化生产的发酵纯化工艺.
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词:干扰素工程菌高密度发酵纯化
- 聚乙二醇修饰重组人干扰素α1b的制备及其性质被引量:8
- 2010年
- 目的制备聚乙二醇(PEG)修饰的重组人干扰素α1b(rhIFNα1b),并分析其部分性质。方法采用PEG修饰rhIFNα1b,通过离子交换层析分离纯化修饰混合物,单点修饰产物经超滤浓缩后,经Lowry法检测蛋白的浓度,SDS-PAGE和RP-HPLC检测蛋白的纯度,等电聚焦电泳检测蛋白的等电点,质谱法检测蛋白的相对分子质量,细胞病变抑制法检测蛋白的体外活性,ELISA法检测蛋白的抗原性。结果单点修饰产物的蛋白得率为33%;SDS-PAGE分析纯度为96.1%,RP-HPLC分析纯度为98.1%;等电点为6.22;相对分子质量为39946;比活为1.28×106IU/mg,活性保留率为14.4%;抗原性至少降至原来的1/625。结论制备的单点修饰rhIFNα1b药学性质获得改善,有望开发为安全、长效的新型干扰素。
- 杨宇峰路煜石玮马相虎秦洁朱威楼觉人
- 关键词:聚乙二醇基因修饰重组人干扰素Α
- 高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化
- 目的:在构建高表达INF-α1b重组大肠杆菌工程的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法:采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术.结果:发酵密度A<,600>可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右.经破菌、...
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词:重组大肠杆菌高密度发酵纯化干扰素
- 文献传递
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰素α1b纯化工艺的建立被引量:2
- 2004年
- 建立适合大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinanthumaninterferon α1b ,rhIFN α1b)的纯化工艺。采用高效分泌表达rhIFN α1b的甲醇酵母工程菌发酵 ,收集离心后的上清液 ,超滤脱盐 ,经离子交换柱和分子筛柱层析纯化。纯化的rhIFN α1b的纯度为 98%以上 ,比活性 2 .4× 10 7IU/mg ,活性回收率 14 % ,相对分子质量 1980 0和等电点 5 .0。经检测 ,rhIFN α1b蛋白N 端 15个氨基酸序列与正常对照完全符合。该纯化工艺简便 ,时程短 ,重复性好 。
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词:甲醇酵母纯化工艺
- 重组干扰素α1b在美国的II期临床试验
- 童葵塘楼觉人马相虎周行刘朝阳屠宗青路煜
- 我国高技术医药产品很少能进入美国市场,即使在美国进行临床试验的也不多。我所研制的重组人干扰素α_1b在研究和大规模临床应用中证明其效果与国外应用的重组人干扰素α_2a和α_2b相似,但不良反应明显较少而且轻。根据我方与克...
- 关键词:
- 关键词:重组人干扰素Α1BIFN-Α
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰毒α1b纯化工艺的建立
- 建立合适大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinant Human Interferon-α1b,rhIFN-α1b)的纯化工艺.采用高效分泌表达rhIFN-α1b的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,...
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词:甲醇酵母纯化工艺
- 文献传递
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰素a1b纯化工艺的建立
- 建立适合大规模、低成本生产重组人干扰素alb(Recombinant humaninterferon-alb-alb)的纯化工艺。采用高效分泌表达rhIFN-alb 的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,超滤脱盐,经...
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词:甲醇酵母纯化工艺
- 文献传递