赵龙
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 重组人纤溶酶原Kringle 5的^(125)I标记及其体内代谢被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle 5(K 5)的生物学活性及其体内药代动力学。方法:采用基因工程方法制备重组人纤溶酶原Kringle 5(rhK 5),以小剂量Iodogen多次重复标记法标记rhK 5,细胞增殖抑制试验和亲和力试验检测125I-rhK 5活性,并研究其在大鼠体内的药代动力学。结果:125I-rhK 5的标记率为86%,放射化学纯度为96%。细胞增殖抑制试验表明,125I-rhK 5的生物活性与未标记rhK 5相当。大鼠单次股静脉注射2μg125I-rhK 5后,血药浓度-时间曲线符合两室模型,T 1/2α为(0.31±0.03)h,T 1/2β为(14.48±0.73)h,AUC为(436.58±34.6)ng.h.m-l 1。结论:小剂量Iodogen多次重复125I标记不影响rhK 5的生物学活性1。25I-rhK 5大鼠体内单次静脉注射的药代动力学符合两室模型,半衰期约为15h。125I-rhK 5为肿瘤的显像和靶向治疗奠定了基础。
- 尹桂芝李彪张大东张一帆赵龙尤蓓张志勇余自成于金德
- 关键词：^125I标记药代动力学
- 人纤溶酶原Kringle5区的基因克隆的表达及纯化被引量：7
- 2005年
- 目的克隆人纤溶酶原Kringle5 (K5 )区基因 ,并进行重组蛋白的表达纯化及活性鉴定。方法用PCR方法从正常成人肝cDNA库扩增出人纤溶酶原K5区基因 ,构建K5的原核表达载体pET 2 2b(+) K5 6×His,IPTG诱导蛋白表达后经Ni+ -树脂亲和层析进行纯化 ,通过血管内皮细胞增殖抑制试验检测蛋白活性。结果经PCR成功扩增出了 2 4 3bp的K5区基因 ,测序正确后克隆进大肠杆菌分泌型表达载体pET 2 2b(+) ,重组质粒在BL2 1中成功表达出分子量为 14 0 0 0的蛋白质 ,纯化后的蛋白纯度达95 % ,具有抑制血管内皮细胞增殖活性的功能 ,K5蛋白浓度为 4 μg/mL时抑制率达 5 0 %。 结论纤溶酶原K5的成功克隆。
- 尹桂芝李彪张一帆尤蓓赵龙陆林于金德
- 关键词：分泌型表达载体血管内皮细胞基因克隆人纤溶酶原IPTG
- 人源性血管内皮抑制因子Endostatin的研制及其对动脉粥样硬化防治作用的研究
- 于金德李彪尤蓓尹桂芝金玮张一帆赵龙
- 该课题组从抗内膜异常血管增生角度探索干预动脉粥样硬化新途径，系统研究了内皮抑素的体外生物活性和小鼠体内药代动力学，并探讨了重组杆状病毒－内皮抑素基因的体内分泌表达对模型兔动脉粥样硬化的作用。结果表明：分泌型原核表达载体p...
- 关键词：
- 关键词：动脉粥样硬化
- 重组纤溶酶原Kringle 5区基因杆状病毒载体的构建及表达研究
- 2004年
- 目的克隆人源性纤溶酶原Kringle5(K5)基因,构建K5分泌型杆状病毒载体,并检测其在肌细胞中的表达。方法引物中加入前胰岛素原信号肽基因序列,PCR产物经Age Ⅰ和Acc Ⅰ双酶切后装入pFB载体中构建为pFBK5,将其转染肌细胞C2C12,经Western印迹检测重组蛋白的表达并用MTT试验进行初步活性鉴定。结果成功扩增出了K5基因序列,测序正确,转染了pFBK5的C2C12细胞及上清中均检测到了特异性的14 ku蛋白条带且其对ECV304细胞产生剂量依赖性抑制作用,而转染空载体对照组无相应蛋白表达。结论人源性纤溶酶原K5分泌型杆状病毒载体构建成功,表达的重组蛋白具有生物活性,为进一步的病毒制备奠定了基础。
- 尹桂芝李彪尤蓓陆林张一帆赵龙于金德
- 关键词：杆状病毒载体基因表达肌细胞
- 重组人纤溶酶原Kringle5的标记及其肿瘤显像
- 2005年
- 目的 探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle5（K5）用于肿瘤显像的可行性。方法 采用基因工程方法制备的重组人纤溶酶原Kringle5（rhK5），以Iodogen法制备^125I-rhK5和^131I-rhK5，进行荷瘤裸鼠体内分布和肿瘤显像研究。结果 ^125I-rhK5和^13lI-rhK5的标记率为86％和84％，放化纯度为96％和95％。竞争结合实验表明，rhK5标记后其生物活性没有改变；荷瘤裸鼠体内分布显示，12h肿瘤肌肉组织比可达4．94±0．89；^131I-rhK5肿瘤显像示肿瘤部位放射性浓聚随时间逐渐增加，3h可见肿瘤清晰显影。结论 Iodogen法制备^125I-rhK5和^131I-rhK5纯度高，稳定性好。^131I-rhK5可进行肿瘤的显像，为肿瘤的显像和治疗奠定了基础。
- 李彪赵龙张一帆尹桂芝张志勇朱承谟
- 关键词：人纤溶酶原肿瘤显像KRINGLE5IODOGEN法放射性碘标记放化纯度
- 重组人纤溶酶原Kringle 5的体内药代动力学及应用价值
- 2008年
- 目的研究纤溶酶原Kringle5体内药代动力学及其显像和治疗价值。方法应用基因工程技术重组人纤溶酶原Kringle5(rhK5),Iodogen法和直接法分别制备125I-rhK5、131I-rhK5和99mTc-rhK5。MTT比色法检测rhK5、125I-rhK5和99mTc-rhK5的活性。应用3p87程序分析125I-rhK5的药代动力学。制作肺癌移植瘤裸鼠模型,按3.7MBq经尾静脉注射99mTc-rhK5,于不同时间点观察显像情况。按7.4MBq经尾静脉注射131I-rhK,观察肿瘤生长及其微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达,同时设立单纯rhK5蛋白治疗组和阴性对照组进行比较分析。结果125I-rhK5、131I-rhK5和99mTc-rhK5的标记率分别为86%、84%、90%,放化纯度均>90%;活性检测发现,标记与未标记rhK5之间无显著差异;125I-rhK5经尾静脉单剂量给药后,选择二室模型拟合药-时曲线,分布相半衰期(T1/2(α))为(0.31±0.03)h,清除相半衰期(T1/2(β))为(14.48±0.73)h,药-时曲线下面积(AUC)为(436.58±34.60)ng·mL-1·h-1。注射99mTc-rhK5后1h可见放射性浓聚,4h显像更趋清晰,肿瘤部位呈"热区"。与rhK5蛋白治疗组和阴性对照组比较,131I-rhK5治疗组肿瘤生长明显受到抑制(抑瘤率为34.14%),且MVD和VEGF表达显著减少。结论核素标记rhK5进行肿瘤显像和治疗是可行的。rhK5体内应用每天注射1次即可,为体内用药提供了实验依据。
- 赵龙李彪张一帆张敏董丽胡佳佳张志勇朱承谟
- 关键词：肿瘤血管生成
- 肿瘤诊断和治疗的新载体:纤溶酶原Kringle 5
- 2004年
- 肿瘤生长和转移需要血管生成。纤溶酶原K5能够与血管内皮细胞特异性结合,并抑制血管内皮细胞增殖。此外,纤溶酶原K5分子量小。因此。通过放射性核素标记纤溶酶原K5,利用放射性核素的显像和治疗特性,结合纤溶酶原K5的血管抑制作用以及靶向肿瘤新生血管的特点,从而实现对肿瘤的显像和治疗。可见,对纤溶酶原K5进行放射性标记研究很有应用前景。
- 赵龙李彪
- 关键词：纤溶酶原血管内皮细胞肿瘤诊断放射性核素标记新载体
- 重组人纤溶酶原Kringle5的标记及其肿瘤显像被引量：4
- 2005年
- 目的探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle5(K5)用于肿瘤显像的可行性。方法采用基因工程方法制备的重组人纤溶酶原Kringle5(rhK5),以Iodogen法制备^(125)I-rhK5和^(131)I-rhK5,进行荷瘤裸鼠体内分布和肿瘤显像研究。结果^(125)I-rhK5和^(131)I-rhK5的标记率为86%和84%,放化纯度为96%和95%。竞争结合实验表明,rhK5标记后其生物活性没有改变;荷瘤裸鼠体内分布显示,12h肿瘤肌肉组织比可达4.94±0.89;^(131)I-rhK5肿瘤显像示肿瘤部位放射性浓聚随时间逐渐增加,3h可见肿瘤清晰显影。结论Iodogen法制备^(125)I-rhK5和^(131)I-rhK5纯度高、稳定性好。^(131)I-rhK5可进行肿瘤的显像,为肿瘤的显像和治疗奠定了基础。
- 李彪赵龙张一帆尹桂芝张志勇朱承谟
- 关键词：KRINGLE5肿瘤新生血管放射性核素显像
- 重组人内皮抑素的^(125)I标记及其体内代谢被引量：1
- 2005年
- 目的探讨重组人内皮抑素(rhEndo)的^(125)I标记及其标记物(^(125)I-rhEndo)的生物学活性和体内药代动力学。方法采用小剂量Iodogen多次重复标记法标记rhEndo,细胞增殖抑制试验和亲和力试验检测^(125)I-rhEndo活性,并研究其在大鼠体内的药代动力学。结果0.5μg Iodogen3次重复标记rhEndo的标记率可达84%,放射化学纯度(94.7±2.44)%。^(125)I-rhEndo抑制bFGF诱导内皮细胞增殖的作用与未标记rhEndo相当,且能与其竞争结合内皮细胞表面受体。大鼠单次股静脉注射^(125)I-rhEndo2μg后,血药浓度-时间曲线符合两室模型,T1/2α为(0.45±0.12)h,T1/2β为(19.53±3.41)h,AUC为(484.57±137.99)ng·h·mL-1。结论小剂量Iodogen多次重复^(125)I标记不影响rhEndo蛋白的生物学活性。^(125)I-rhEndo大鼠体内单次静脉注射的药代动力学符合两室模型,半衰期约19h。^(125)I-rhEndo标记为肿瘤的靶向显像和治疗奠定了基础。
- 尤蓓李彪张一帆尹桂芝赵龙张志勇陆林于金德余自成朱承谟
- 关键词：内皮抑素^125I标记药代动力学体内代谢重组人内皮抑素
- 杆状病毒介导内皮抑素抗兔动脉粥样硬化作用被引量：1
- 2005年
- 目的研究分泌型重组杆状病毒介导内皮抑素体内抗动脉粥样硬化的作用。方法采用髂动脉内膜剥脱联合高脂喂养法建立兔髂动脉粥样硬化模型。造模后第2周,对照组和实验组分别肌肉注射空载杆状病毒rBacGFP和携带人内皮抑素基因的分泌型重组杆状病毒rBachEndo各1×109pfu,比较治疗前后肝肾功能变化。于治疗2周后处死动物,取病变部位血管观察其病理学改变。结果肝肾功能检测结果表明,rBachEndo治疗未发生肝肾毒性反应;组织学观察显示,治疗2周后,病变血管内膜增厚和管腔狭窄程度较对照组显著减轻,且内膜新生血管明显减少。结论分泌型重组杆状病毒rBachEndo通过介导兔体内骨骼肌分泌内皮抑素,有效抑制动脉粥样硬化斑块生长,且安全性高。
- 尤蓓李彪沈卫峰陆林尹桂芝张一帆赵龙贾世海于金德
- 关键词：杆状病毒内皮抑素动脉粥样硬化
