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表达日本乙型脑炎病毒E基因的重组杆状病毒的构建及其免疫效果评价: 日本乙型脑炎（Japanese encephalitis，JE）是一种重要的人畜共患虫媒性传染病。研制、开发新型疫苗是预防和控制该病的有效手段。杆状病毒/哺乳动物表达系统是一种新型基因治疗和疫苗开发的基因转移载体。本研究...; 叶静李么明曹胜波肖少波赵骞刘学芹金梅林陈焕春; 关键词：日本乙型脑炎病毒杆状病毒免疫保护力基因疫苗; 文献传递

基于SFV复制子的重组杆状病毒的研究: 杆状病毒载体是目前应用十分广泛的病毒载体之一,它被广泛的应用于基因治疗、基因功能研究、疫苗开发等领域。长期以来,由于其宿主特异性,这种高表达的载体仅限用于介导外源基因在其受纳昆虫细胞内表达,近年来的研究发现,杆状病毒可进...; 赵骞; 关键词：杆状病毒细胞凋亡免疫原性 HA基因

伪狂犬病病毒Ea株UL6基因的克隆、序列分析及表达: 2007年; 以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,通过PCR扩增UL6全长基因,将PCR产物克隆于pMD18-T载体,并采用双脱氧终止法进行序列测定。序列分析显示UL6全长1 938 bp,可编码646个氨基酸。将该基因克隆到插入原核表达载体pET28a的6×His下游,获得原核表达质粒pET28a-UL6,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导在大肠埃希菌中成功表达获得分子质量约70 ku的融合表达蛋白6×His-UL6,Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生特异性反应。根据测定的序列,设计一对能扩增UL6基因完整编码区的引物,PCR扩增UL6基因并将其插入真核表达载体pEGFP-C2中EGFP基因的3′端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL6,转染Hela细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染48 h,融合蛋白EGFP-UL6主要定位在胞浆,为进一步研究伪狂犬病病毒Ea株UL6基因的结构和功能奠定了基础。; 薛念波肖少波江云波梅小伟刘曼莉赵骞罗锐陈焕春方六荣; 关键词：伪狂犬病病毒

一种重组杆状病毒载体骨架质粒及其应用: 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种重组杆状病毒载体骨架质粒的构建及应用。本发明克隆得到一种重组杆状病毒转移载体骨架质粒pFB－G－SFV，该质粒保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC N...; 肖少波方六荣赵骞江云波潘永飞; 文献传递

伪狂犬病毒UL14基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究被引量：11: 2007年; UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株(PRV-Ea)为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测和荧光观察证实获得了能稳定表达EGFP的UL14插入失活突变株PRV-UL14D。将PRV-UL14D感染IBRS-2细胞,发现该突变株较PRV-Ea野毒株增殖缓慢,而且PRV-UL14D突变株感染细胞后形成的蚀斑也明显小于PRV-Ea野毒株,但在稳定表达UL14的IBRS-2细胞系中,PRV-UL14D与PRV-Ea野毒株的增殖速度、形成的蚀斑大小均无明显差异。进一步将PRV-UL14D感染BALB/c小鼠,发现与相同剂量的PRV-Ea野毒株感染相比,小鼠平均死亡时间明显延缓。上述研究结果表明,UL14并非伪狂犬病毒增殖必需的,但其缺失可延缓病毒增殖,推测UL14可能与病毒粒子在细胞间的扩散有关。; 张辉方六荣赵骞薛念波江云波肖少波陈焕春; 关键词：伪狂犬病毒突变株生物学特性

伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达被引量：1: 2008年; 本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含UL18全长基因的片段并克隆至pMD18-T载体,采用双脱氧末端终止法测序。序列分析显示UL18全长891bp,可编码297个氨基酸。将该基因亚克隆到原核表达载体pQE-82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6×His-UL18的分子量约为33ku。Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。进一步将UL18基因插入真核表达载体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48h时则主要定位在细胞核,但对照载体pEGFP-N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中。; 薛念波肖少波江云波常天明刘曼莉赵骞罗锐陈焕春方六荣; 关键词：伪狂犬病病毒

一种重组杆状病毒载体骨架质粒及其应用: 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种重组杆状病毒载体骨架质粒的构建及应用。本发明克隆得到一种重组杆状病毒转移载体骨架质粒pFB-G-SFV，该质粒保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC N...; 肖少波方六荣赵骞江云波潘永飞; 文献传递

伪狂犬病毒UL14基因缺失影响病毒的增殖和细胞间扩散: UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株(PRV -Ea)为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测、荧光观察...; 张辉肖少波方六荣赵骞薛念波陈焕春; 关键词：伪狂犬病毒突变株生物学特性; 文献传递

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赵骞