赵友阳
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所分子生物学国家重点实验室更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 酵母Pho80对Pho85蛋白激酶活性的调节
- 1997年
- 酵母pho80和pho85基因编码的蛋白质是阻遏型酸性磷酸酯酶基因表达调控系统中的2种负调控因子.其中pho85基因编码产物己被证明是1种类似于p34^(cdc2/CDC28)的蛋白激酶,磷酸化该调控系统中的正调控因子Pho4,并使之失活,用抗pho85抗体从啤酒酵母YPH499及其衍生菌株的细胞抽提液中得到Pho85免疫复合物,对大肠杆菌表达的Pho4蛋白进行了体外磷酸化分析,证实酵母Pho80是Pho85蛋白激酶活力所必需,pho80基因的表达水平直接影响Pho85免疫复合物对Pho4蛋白的磷酸化程度.根据基因序列推导的Pho80蛋白氨基酸序列中,含有一段与几种cyclin同源的区域,通过寡核苷酸的插入或小片段缺失而对该区域及邻近部位在基因水平进行的微小改变均可导致Pho80丧失阻遏酸性磷酸酯酶基因表达的能力.
- 杨志勇赵友阳王勤敖世洲
- 关键词:基因蛋白激酶
- 酵母PHO4基因的结构改造与功能分析
- 1994年
- 酵母PHO4基因编码的蛋白质是阻遏型酸性磷酸酯酶基因表达系统中的正调控因子。本文根据由核苷酸序列推导的氨基酸序列对PHO4蛋白的结构域作了分析。通过寡聚核苷酸的插入或片段的缺失对PHO4基因的编码区进行改造,观察它们在细胞内对酸性磷酸酯酶基因表达的影响,推测不同结构区的功能作用。结果表明PHO4蛋白的第162到171位附近的氨基酸残基可能组成一个与负调控因子PHO80相互作用的功能区。
- 赵友阳敖世洲
- 关键词:酵母酸性磷酸酯酶基因表达
- 酵母PHO80基因的克隆、表达及功能分析被引量:3
- 1996年
- 利用原位杂交方法从野生型酵母菌染色体DNA中克隆了PHO80基因,全长约4.2kb,包括1.1kb的上游序列和879bp的编码序列。以URA3基因为筛选标记,通过体内同源重组和营养互补筛选获得了PHO80基因缺失突变株。进一步研究了PHO80在细胞内的功能,它是酵母阻遏型酸性磷酸酯酶结构基因以及调控基因PHO81表达的负调控因子,但不影响PHO4和PHO85的表达。还构建了PHO80-LacZ融合基因,探索它在细胞内的表达规律。β-半乳糖苷酶活力测定结果表明,PHO80基因在细胞内呈低水平表达,并受自身产物和PHO85的抑制,推测它与PHO5和PHO81基因的调控模式可能相似。
- 赵友阳敖世洲
- 关键词:酵母基因表达克隆功能分析