谢小燕
- 作品数：57 被引量：46H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞培养基及其用途
- 本发明涉及细胞培养基及其用途。其中，培养基包含：基础培养基，该基础培养基为AminomaxC-100培养基；bFGF；以及DMOG。利用本发明的细胞培养基对分离的毛乳头细胞进行体外培养，能够有效地使得毛乳头细胞扩增，从而...
- 裴雪涛陈琳岳文习佳飞师伟姚海雷吕洋张秀媛谢小燕刘大庆
- 微小RNA miR-125b真核表达载体的构建及其对细胞增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:构建微小RNA125b(miR-125b)真核表达载体,研究其过表达后对细胞增殖的影响。方法:以pcDNA3.1(-)-myc-his载体为模板,PCR扩增CMV启动子,克隆入pHRS-1cla-EGFP慢病毒载体,构建pHRS-1cla-CMV-EGFP载体;以从人全血中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-125b序列,将其克隆到pHRS-1cla-CMV-EGFP载体中,构建pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP慢病毒表达载体;将pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP表达载体瞬时转染入293FT细胞,用实时定量PCR技术对miR-125b在转录水平的表达进行检测,用MTT及Brdu法检测miR-125b过表达后对293FT细胞增殖的影响。结果:构建的pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP真核表达载体经质粒酶切和测序鉴定正确,转染细胞后72h经实时定量PCR检测,成熟miR-125b表达上调约750倍(P<0.01),说明其能有效高表达,MTT及Brdu法检测显示细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)。结论:构建了pHRS-1cla-miR-125b-CMV-EGFP慢病毒真核表达载体,转染293FT细胞后能高效表达成熟miR-125b,同时证明过表达miR-125b能使细胞的增殖受到非常明显的抑制。
- 曾泉谢小燕赵爱华王静雪陈琳岳文裴雪涛
- 关键词：微小RNA真核表达载体细胞增殖
- 细胞角蛋白19启动子调控的双报告载体的构建及其在肝干/祖细胞分化研究中的应用被引量：3
- 2010年
- 肝干/祖细胞是肝细胞和胆管上皮细胞(biliary epithelial cells,BECs)共同的前体细胞,为了对这一前体细胞的分化情况进行研究,利用报告基因来监测肝干/祖细胞的分化走向.首先,通过PCR方法从肝癌细胞系HepG2的全基因组中克隆了细胞角蛋白19(CK19)启动子片段,构建了CK19启动子调控的海肾荧光素酶和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)双报告载体(pSicoR-CK19-hrl-mrfp).其次,将上述慢病毒载体转染肝干/祖细胞后,通过流式细胞分选获得稳定转染的细胞株.再次,将上述细胞株与表达"上皮形态发生素"(Epimorphin,EPM)的PT67细胞共培养后,整合有pSicoR-CK19-hrl-mrfp表达载体的肝干/祖细胞不仅形态发生了变化,而且排列为二维环状结构,另外还检测到由CK19启动子启动表达的海肾荧光素酶和RFP,细胞形态和基因表型都证明肝干/祖细胞经诱导已经分化成为BECs.与此形成对照的是肝干/祖细胞与不表达EPM的PT67细胞共培养后,没有观测到上述的变化.所以,CK19启动子调控的双报告载体不仅可以实时地显示肝原始细胞在不同的诱导环境下的分化走向,而且还可以定量地检测CK19启动子活性的变化情况.总之,这一载体的成功构建将为研究肝干/祖细胞的分化提供了便捷的工具,同时也有助于筛选可诱导肝干/祖细胞定向分化的分子.
- 张衡贾雅丽岳文陈琳谢小燕南雪何丽娟裴海云裴雪涛
- 关键词：细胞角蛋白红色荧光蛋白分化
- 核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途
- 本发明提出了核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途以及提高细胞巨核分化效率的方法，所述细胞具有巨核分化的潜能，所述核酸具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。在细胞中过表达具有SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的核酸，...
- 裴雪涛谢小燕曲洺逸岳文房芳陈琳何丽娟张博文
- 文献传递
- 红细胞生成素基因修饰的间充质干细胞条件培养基促进人胚胎干细胞向造血细胞分化被引量：2
- 2010年
- 本研究探讨EPO基因修饰的间充质干细胞条件培养液对人胚胎干细胞向造血细胞诱导分化的影响。通过重组慢病毒系统感染人间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),建立能够稳定高效表达红细胞生成素(eryth ropoietin,EPO)的细胞株EPO/MSC。用EB培养液诱导人胚胎干细胞形成拟胚体,然后用EPO/MSC条件培养液处理拟胚体细胞;通过免疫荧光、集落形成实验和RT-PCR检测等方法对诱导的细胞进行了相关鉴定。结果表明:EPO/MSC体外能够稳定表达EPO。条件培养液诱导生成的细胞表达造血干/祖细胞抗原CD34和相关造血基因,可产生不同的造血集落,且明显高于对照组。结论:EPO基因修饰的间充质干细胞条件培养液能显著促进人胚胎干细胞向造血细胞分化。
- 杨超吉蕾岳文王若永李艳华习佳飞谢小燕何丽娟南雪裴雪涛
- 关键词：胚胎干细胞红细胞生成素造血细胞诱导分化
- HTm4基因在造血细胞周期调控中的作用
- 2005年
- 为了研究HTm4基因在造血细胞细胞周期调控中的作用,以佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导K562细胞分化为模型,利用流式细胞术(FACS)及半定量RT-PCR对分化过程中细胞周期的变化及HTm4基因的表达进行了分析,并利用.Tet-Off调控表达系统,将HTm4基因以及C端功能域缺失的HTm4-ct转染K562细胞,观察对细胞周期的影响。结果表明,PMA同时引起了K562细胞的增殖和分化,G0/G1期细胞的比例以及HTm4基因的表达均呈现出波浪形的变化趋势,说明HTm4基因可能参与了细胞退出细胞周期的过程。HTm4基因转染后引起K562细胞滞留于G0/G1期,但C端功能域缺失的HTm4-ct没有此作用,说明C端功能域在HTm4基因调控细胞周期的功能中发挥重要作用。
- 李锦谢超谢小燕王冬梅裴雪涛
- 关键词：细胞周期K562细胞
- 凝集素FRIL体外维持造血干/祖细胞长期活存的机理初探
- ＜正＞ 目的体外扩增造血干/祖细胞往往面临细胞增殖和干细胞的多潜能性的丧失这样一对矛盾,因此维持造血干细胞的多潜能性、探明调控其增殖分化的分子机理具有重要意义。一种分离自豆类的新型凝集素不仅具有凝集活性,还具有在体外长期...
- 谢小燕谢超李锦白慈贤裴雪涛
- 文献传递
- 红系祖细胞冻存液及其应用
- 本发明公开了红系祖细胞冻存液及其应用，其中，该红系祖细胞冻存液包含：DMSO；HSA；以及血浆。该冻存液能够有效保存红系祖细胞，并且保存时间长，细胞复苏后增殖能力强，细胞回收率高。
- 陈琳裴雪涛习佳飞谢小燕周军年李艳华岳文房芳南雪刘大庆
- 文献传递
- 以慢病毒为基础的flt3干涉表达载体的构建
- ＜正＞目的为研究造血干细胞发育、分化过程中flt3所起的作用,利用RNA干涉技术消除CD34+ 细胞中flt3的表达,以此构建细胞模型,进行flt3的功能研究。方法构建以pSuppressorNeo为载体的干涉质粒pSu...
- 陈琳谢小燕袁红丰裴雪涛
- 文献传递
- 核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途
- 本发明提出了核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途以及提高细胞巨核分化效率的方法，所述细胞具有巨核分化的潜能，所述核酸具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。在细胞中过表达具有SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的核酸，...
- 裴雪涛谢小燕曲洺逸岳文房芳陈琳何丽娟张博文
