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免疫胶体金技术及其在临床诊断上的研究进展被引量：19: 2009年; 综述了免疫胶体金技术的原理、特点以及斑点金免疫渗滤法、胶体金免疫层析法在临床诊断上的应用研究进展,并分析了该技术存在的问题及发展趋势。; 许欣王锋; 关键词：免疫胶体金技术

睾丸网注射法建立转基因小鼠被引量：7: 2008年; 目的为了研究睾丸网注射法建立转基因小鼠的可行性。方法本试验应用显微注射仪将脂质体包裹的质粒pEGFP-N1通过睾丸网注射到4周龄昆明(KM)小白鼠睾丸生精小管内。注射后6周,与自然发情雌鼠交配,用PCR法检测仔鼠基因组中的外源DNA。结果共注射4只雄性小鼠,3只存活,并且具有交配,受精能力,共获仔鼠63只,其中2只为PCR阳性仔鼠。结论用睾丸网注射法制备转基因动物是可行的。; 丁晓麟张寒莹许欣石国庆王锋; 关键词：小鼠转基因

金标孕酮单克隆抗体复合物的制备及鉴定: 2010年; 为了获得高质量的金标孕酮单抗,通过采用柠檬酸三钠还原法,制备出符合要求的30nm胶体金溶液,在此基础上摸索胶体金标记孕酮单克隆抗体的最佳条件,并对其进行质量鉴定。结果发现,用柠檬酸三钠还原法制备的30nm胶体金溶液呈深红色,透射电镜观察,胶体金颗粒大小基本一致;胶体金标记孕酮单克隆抗体的最低稳定浓度为16μg/mL,最适稳定浓度为19.2μg/mL,最适标记pH为8.5。制备的金标抗体复合物经电镜观察,周围有一层明显的低电子密度晕圈,且其D520nm值在0.2～0.4之间。; 许欣孟立王子玉王锋; 关键词：胶体金

生物炭与氮肥施用对稻田CH4和N2O排放及其相关功能微生物的影响研究: 稻田土壤是农业用地中主要的甲烷(CH4)和氧化亚氮(N2O)等温室气体排放源。生物炭对长期施用氮肥的稻田土壤温室气体排放具有显著影响。而稻田土壤中CH4及N2O的排放都是在土壤中微生物作用下产生的。其中CH4的排放是产C...; 许欣; 关键词：生物炭氮肥施用氧化亚氮微生物

湖羊早期妊娠诊断免疫胶体金层析试纸条的初步研制: 在妊娠早期,母畜外周血浆中的孕酮含量远远高于发情期,所以可以通过测定血液中的孕酮含量来进行早期妊娠诊断。传统的测定方法主要有放射免疫测定法(RIA),酶免疫测定法(EIA)和乳胶凝集测定试验(LAIT),但是由于操作比较...; 许欣; 关键词：湖羊早期妊娠诊断胶体金免疫层析法半定量检测胶体金; 文献传递

小鼠精原干细胞冷冻保存被引量：4: 2009年; 目的探索小鼠精原干细胞（SSCs）冷冻保存方法以及解冻后体外快速增殖的条件。方法实验以6d龄雄性昆明小白鼠为材料,两步酶消化法分离小鼠睾丸生殖细胞,Percoll非连续密度梯度离心法富集小鼠精原干细胞,随后加入不同的冷冻液以及采用不同的降温速率冷冻小鼠精原干细胞。以MEMα为基本培养基,加入10%胎牛血清和100μg/L的胶质细胞源性神经营养因子,WST-8比色法分析培养SSCs复苏后的增殖率,运用碱性磷酸酶细胞化学染色和RT-PCR技术,对培养的SSCs进行鉴定。结果冷冻液中添加10%二甲基亚砜、10%胎牛血清0、.07mol/L蔗糖时,以1℃/min程控降温方式冷冻小鼠SSCs,细胞解冻后活率最高,达84%以上;采用非程控降温方式冻存SSCs,尽管细胞解冻后活率相对于程控降温方式略低,但具有方法简单、易于操作、无需昂贵仪器的优点,复苏后SSCs贴壁时间为8~12h,24h可见细胞分裂,48h细胞出现迅速增殖,96h可见较多含20~25细胞的细胞团,此时精原干细胞增殖近5倍。结论本实验所用培养条件,可以使经长期冷冻的SSCs短期快速增殖。; 丁晓麟张寒莹王子玉张艳丽许欣石国庆王锋; 关键词：冷冻保护剂细胞培养精原干细胞小鼠

人乳铁蛋白cDNA基因乳腺表达载体的构建与鉴定被引量：1: 2011年; 为了构建人乳铁蛋白基因（hLF）的乳腺表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况,本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2作为5′端调控序列,下游包括部分外显子7、内含子7、外显子8、内含子8、外显子9及3′部分基因组片段作为3′端调控序列,长度分别为6.2 kb和7.1 kb,将hLF基因（目的基因）和Neo基因（筛选标记）分别插入到5′端调控序列和3′端调控序列的下游,构建成pBC1-hLF-Neo载体,其全长为25.348 kb。为了检测该载体的生物学功能,用脂质体介导法将其分别导入到山羊乳腺上皮细胞GMC和小鼠乳腺癌细胞株C127中进行表达验证,经G418抗性筛选8~10 d,得到了药物抗性细胞克隆,经催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养,通过RT-PCR、Western blotting以及重组hLF抑菌圈试验表明,山羊β-casein基因启动子驱动的hLF基因能够在C127和GMC乳腺上皮细胞中转录翻译,且重组hLF具有抑制大肠杆菌生长的生物活性,这为下一步建立稳定整合hLF基因奶山羊胎儿成纤维细胞系奠定了基础。; 孟立张艳丽许欣王子玉闫益波庞训胜钟部帅黄荣宋洋王金玉王锋; 关键词：HLF 生物学功能

人乳铁蛋白cDNA乳腺特异性表达载体的构建及其生物学功能分析: 本试验的目的是构建人乳铁蛋白(hLF)基因的乳腺特异性表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况。本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2作为5’端调控序列,下游包括部分外显子7、内含...; 孟立张艳丽许欣钟部帅闫益波黄荣宋洋王子玉王锋; 关键词：HLF 生物学功能; 文献传递

一种半定量检测孕酮胶体金试纸条: 本实用新型属于生物监测试剂领域，公开了一种半定量检测孕酮胶体金试纸条。一种半定量检测孕酮胶体金试纸条，包括含有金标孕酮抗体复合物的金标垫、硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜样品垫、吸水垫、PVC底板；所述的玻璃纤维膜样品垫、含有金...; 王锋王子玉许欣; 文献传递

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许欣