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pRL-hTNF/JM103工程菌发酵和rhTNFα表达的研究被引量：4: 1998年; 为便于下游中试规模生产，采用温度敏感型启动子PRPL构建rhTNFα工程菌，并对影响工程菌发酵培养和表达的因素进行了初步研究。结果显示，采用RTB培养基，50℃热水快速升温，诱导培养4～4．5h，湿菌体收获率和表达量均达到较高水平；50L发酵罐连续发酵3批，14000r／min连续离心，菌体收获率湿重达16．gg／L培养物，rhTNFα表达量占菌体总蛋白的10.5％，活性达1．35×107U／mg蛋白。.; 张振龙许丽峰张琰平刘德郁邓宛明樊晓翔陈梅娣窦金福宋比天倪道明李昌本; 关键词：人肿瘤坏死因子发酵工程菌

灭活与减毒两种甲肝疫苗免疫后诱导细胞免疫应答初探被引量：1: 2008年; 目的对国内普遍应用的减毒和灭活甲肝疫苗诱导的细胞免疫水平（产生时间、应答水平）进行检测和比较。方法筛选健康志愿者18人，随机分组后分别接种甲肝减毒活疫苗和甲肝灭活疫苗。按实验程序以周次为时间点采血，用化学发光法对特异性甲肝抗体（HAV-IgG）进行检测；同时收集外周血单个核细胞（PBMC），用特异性甲肝抗原刺激后，以酶联免疫斑点试验（ELISPOT）法检测效应T细胞分泌TH1型细胞因子IFN-1的情况；用胞内细胞因子染色法测定CD4^＋T和CD8^＋T淋巴细胞中分泌IFN-γ的阳性细胞百分比，Luminex法检测细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-4等多种细胞因子水平。结果两种疫苗均可诱导产生特异性抗HAV抗体，且观测期间抗体水平差异无统计学意义。两种疫苗接种初期即可诱导产生病毒特异性T细胞免疫应答反应，同时伴随高水平的效应细胞因子IFN-γ产生。在免疫接种后1～3周，灭活疫苗诱导的细胞免疫应答水平高于减毒疫苗；而在4-6周，减毒疫苗诱导的细胞免疫应答水平明显增高，超过灭活疫苗。灭活疫苗所诱导的细胞免疫应答在加强免疫后明显增强。结论两种疫苗接种初期均可诱导体液和细胞免疫应答；灭活疫苗加强免疫后可激发记忆性免疫应答。; 杨中楠万宗举徐静许丽峰姜典才; 关键词：甲型肝炎抗体疫苗体液免疫

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许丽峰

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