覃桂
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中南民族大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 藕塘中Cu2+吸附菌和氨氮分解菌的筛选、鉴定及其生物学特性研究
- 我国是一个农业大国，农业生产离不开肥沃的土壤和洁净的淡水资源，湖北省作为水生蔬菜莲藕的种植大省，其种植环境正受到重金属污染及水质氨氮过量的不良影响。本研究则针对莲藕种植中重金属 Cu2+和氨氮污染的问题，在吸附Cu2+和...
- 覃桂
- 关键词：铜离子吸附生物学特性分子鉴定
- 文献传递
- 谷氨酰胺转胺酶在毕赤酵母菌的初步表达
- 2013年
- 从重组菌株pPIC3.5k-MTG/DH5α提取重组质粒pPIC3.5k-MTG,经Sac I酶切线性化处理后纯化重组质粒电击转化到毕赤酵母菌中,用甲醇诱导表达,经SDS-PAGE鉴定重组质粒P.pastoris GS115成功表达出了TGase蛋白,并初步纯化获得了较纯的目的蛋白,其表观分子量为47 kD,酶活为0.50 U/mL.
- 何冬兰叶程王亚南覃桂
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶毕赤酵母
- 谷氨酰胺转胺酶基因的结构分析及定点突变
- 2015年
- 根据分离得到的吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因,预测其三维结构,确定其酶活中心,并构建定点突变体。用PCR扩增谷氨酰胺转胺酶基因,通过SWISS-MODEL在线预测三维结构,找到酶活中心,确定突变位点,将361位的组氨酸(CAC)突变成赖氨酸(AAA),将突变后的基因片段连接到pET-22b(+)上得到重组质粒pET-22b(+)-MTG,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。结果显示,通过对比已有的三维结构模型,找到了酶活中心,并通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术成功构建了突变体。
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- 关键词：谷氨酰胺转胺酶定点突变
- 莲藕淤泥中吸附Cu^(2+)芽孢杆菌的筛选及生物学特性研究
- 2014年
- 本研究从莲藕淤泥中筛选出4株具备良好耐盐、耐酸、耐碱稳定性的Cu2+吸附特性菌株,并对具备最强Cu2+吸附效应的菌株进行了生物学特性的研究。结果表明:4株菌株的铜离子吸附率达30.81%至67.33%。最强Cu2+吸附效应菌株的形态学、生理学及生物学特性符合枯草芽孢杆菌的特征。它在分解并利用葡萄糖产生有机酸的同时还具备分解色氨酸产生吲哚的能力。葡萄糖、柠檬酸为优势C源,尿素、酵母粉、蛋白胨为优势N源。温度、pH的单因素与组合试验表明:当温度为37℃、pH值为7.01时,该株菌长势最好。
- 覃桂代风娇詹锐何冬兰
- 关键词：芽孢杆菌生物学特性
- 重叠延伸PCR法定点突变微生物产谷氨酰胺转氨酶基因被引量：4
- 2013年
- 目的通过重叠延伸PCR法,定点突变微生物产谷氨酰胺转氨酶(Microbial transglutaminase,MTG)基因。方法根据GenBank中登录的Streptomyces sp.H197基因中MTG序列及重叠延伸PCR定点突变技术的原理,利用DNA-MAN5.0软件设计引物,以提取的Streptomyces sp.H197基因组DNA为模板,PCR扩增MTG基因,以扩增的MTG基因片段为模板,采用重叠延伸PCR技术对一个位点进行定点突变,胶回收PCR产物,与克隆载体pMD19-T连接后,转化感受态E.coli DH5α,提取质粒,经PCR及单、双酶切鉴定,并测序。结果重叠延伸PCR产物可见含有酶切位点和突变位点的特异性片段;重组质粒pMD19-T-MTG经PCR及单、双酶切鉴定,证明构建正确;测序结果表明,与野生型序列比对,仅有一个碱基发生改变,即第773位腺嘌呤突变为胞嘧啶,突变位点与预期一致,实现了目标位点的定点突变。结论重叠延伸PCR法对MTG基因序列预定位点突变成功,证明阳性克隆子含突变位点,为下阶段突变型功能表达奠定基础。
- 叶程邵坤彦王亚南覃桂代风娇何冬兰
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶点突变
